在小鼠模型中制造皮层刺伤以诱导反应性星形胶质细胞增生

将麻醉后的小鼠固定在立体定位仪上。

剃除头部毛发并消毒手术部位。涂抹眼膏以防止角膜干燥。

切开以暴露颅骨。

去除表面的膜结构，并用生理盐水清洁表面。

在颅骨上标记一个区域，以皮层为靶点。

沿标记区域进行钻孔。使用生理盐水保持组织湿润。

移除松动的骨片，暴露其下方的皮质骨。

放置经生理盐水浸湿的明胶海绵，以防止组织干燥并吸收血液。

将连接在探针架上的无菌刀片置于皮层上方，然后移除明胶海绵。

降低刀片以穿透皮层，并通过重复的水平移动产生机械性损伤。

取下刀片，使用明胶海绵吸收血液。缝合手术切口。

在损伤部位，星形胶质细胞会发生反应性胶质化，即被激活并增殖，释放具有保护作用的分子，以减轻炎症并支持组织修复。

在此步骤中，将一只完全麻醉的小鼠放入立体定位仪框架中。将其鼻子固定在与异氟烷相连的鼻罩内。接着，拧紧耳杆，并确保头部稳定。

从眼睛水平线到耳朵水平线剃除头部毛发。然后使用异丙醇和聚维酮碘溶液交替擦拭三次，对皮肤进行消毒。之后，在双眼涂抹眼药膏，防止眼睛干涩。

通过轻捏动物的脚趾或尾巴来监测其麻醉深度。当小鼠无反应且呼吸缓慢均匀时，表明已达到适当的手术麻醉平面。从眼睛后方开始，沿近中线方向，向两耳之间位置做一矢状切口，切口应果断、连续、一次完成。将皮肤向一侧推开，并用止血钳夹住右侧皮肤固定。

在显微镜下，使用手术刀的钝面和棉签轻轻清除颅骨表面的覆盖膜。然后用浸有0.9%生理盐水的棉签擦拭颅骨，并使其完全干燥。使用小型直尺和永久性记号笔，在冠状缝后方1毫米处标记开颅区域的前界，再在矢状缝外侧1毫米处标记开颅区域的左侧边界。

接着，从矢状缝和冠状缝分别向右和向尾侧 4 毫米处标记开颅区域的右侧和尾侧边界。使用 0.5 钻头，沿记号笔标记的轮廓小心钻孔，注意切勿完全穿透颅骨。用镊子轻轻按压分离的顶骨骨片，当骨片周边已足够薄弱时，即可将其移除。

现在，使用装有23号针头的10毫升注射器，向分离的骨骼及钻孔区域滴加少量0.9%生理盐水。将操纵臂连接至立体定位仪装置，然后将新的手术刀片安装至探针夹持器上，刀刃朝向头侧。

将操纵臂移至一旁以免妨碍操作，使用弯头镊子小心夹起骨片：将镊尖插入骨片侧面，一次性将其提起移开。随后，将一小块浸湿的可吸收明胶海绵放置在暴露的脑组织上，以防止脑组织干燥并吸收可能存在的血液。明胶海绵放置到位后，将操纵臂移回操作位置，调整刀片使其正对明胶海绵中心。

然后移除凝胶泡沫，缓慢降低刀片直至其尖端接触硬脑膜但不刺破。使用立体定位仪垂直臂上的游标尺标记背腹向坐标。接着，利用操纵臂将刀片精确地缓慢插入脑内3毫米，保持刀片原位5至10秒。

然后，将装有刀片的立体定位臂在前后方向上缓慢移动三次。在移向另一端之前，确保刀片到达颅骨开窗的前部和后部边界。之后，缓慢抬起立体定位臂，并将刀片从脑组织中取出。

立即在脑表面放置另一块明胶海绵，以吸收任何多余的血液或液体。同时，取下立体定位仪臂并处理手术刀片。待出血停止后，移除明胶海绵。

使用不可吸收缝线（如Ethilon或Prolene）缝合皮肤以关闭切口，并于术后9至10天拆除缝线。随后，皮下注射0.5至1毫升乳酸林格氏液，以确保充分水化。