通过Cre-LoxP介导在小鼠模型中诱导脑海绵状血管畸形

从携带CCM2基因的转基因小鼠幼崽开始，该基因对血管稳定性至关重要。

该基因两侧各有一个 loxP 位点。幼鼠的内皮细胞还表达与雌激素受体（ER）融合的 Cre 重组酶。

向幼鼠胃内注射 4-羟基他莫昔芬或 4-HT。

4-HT 穿过内皮细胞，并与 Cre-ER 融合蛋白的雌激素受体部分结合。

这种结合会触发一种构象变化，从而激活Cre重组酶，该酶进入内皮细胞的细胞核并结合到loxP位点上。

这促进了 loxP 位点之间的重组事件，形成一个环状结构并切除 CCM2 基因片段。

CCM2 的缺失会破坏内皮细胞的完整性， 损害血管壁的稳定性。

这会导致形成肿胀的异常血管结构，称为脑海绵状血管畸形（cerebral cavernous malformations 或 CCMs），这些结构脆弱且容易渗漏。

首先将4-HT溶于100%乙醇中，配制成浓度为10毫克/毫升的溶液。分装成每份30微升，于-80摄氏度保存。使用当天，用玉米油将分装的4-HT稀释至0.5毫克/毫升。然后用胰岛素注射器对P1新生幼鼠进行胃内注射，每只注射50微升4-HT，以诱导实验性CCM病灶形成。