0 次观看 • 3:43 分钟 • July 8th, 2025
取一支装有左旋多巴(多巴胺前体)和多巴胺转化抑制剂的注射器。
将该溶液注射到一只被固定且表现出多巴胺能神经元损伤的帕金森病大鼠的皮下组织中。
在大鼠中,该抑制剂与多巴胺生成酶结合,阻止左旋多巴过早转化为多巴胺。
左旋多巴进入血液,通过氨基酸通道穿过血脑屏障,并进入未受损的多巴胺能神经元。
这些神经元中的酶将左旋多巴转化为多巴胺,一种兴奋性神经递质,并将其释放到突触中。
多巴胺与其突触后神经元上的受体结合,触发信号传导。
定期重复注射以增加多巴胺的产生。
随着时间推移,过多的多巴胺会导致其受体过度兴奋以及神经元信号传递过强,最终破坏大鼠的身体运动功能。
将大鼠放入笼中并观察其行为。该大鼠表现出由左旋多巴诱导的不自主、重复性身体运动,称为运动障碍。
在注射 L-DOPA 之前,向预先称重的、装有冻干 L-DOPA 和苄丝肼混合物的棕色小瓶中加入适量无菌生理盐水,充分振荡 10 秒。配制完成后立即用 26 号针头的注射器分别吸取每只动物所需的 L-DOPA-苄丝肼混合物体积,并在每支注射器上标记对应的动物编号。
将第一个笼子移至注射台后,将大鼠从笼中取出并放置在注射台面上。用非优势手手掌抵住台面,固定大鼠的头部和肩部,并用拇指和食指捏住肩胛骨上方背部的皮肤使其绷紧。用优势手将L-DOPA溶液注射至手指之间的皮下间隙,进针时保持针头与身体平行,以避免刺入肌肉内。
注射后,将大鼠放入笼中。接着,设置计时器为一到两分钟,重复此操作,每隔一到两分钟注射一只大鼠,直至所有大鼠均完成注射。在评分当天,将计时器放置于笼旁,观察左旋多巴诱导的运动障碍(LID)行为强度,并在评分期间评估每种特定行为发生的频率。
对肌张力障碍和高动性运动障碍的严重程度及发生频率进行评分,包括LID行为的初始出现、行为高峰以及在预定多个时间点的衰退阶段。若采用每分钟评分间隔,应设置一分钟计时器对第一只大鼠进行评分,并以一分钟为间隔依次完成所有大鼠的评分。