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将一只背部去毛的麻醉大鼠固定在立体定位仪中。
对剃毛区域进行消毒,并用铺巾覆盖大鼠。
在胸椎T6至T10节段处切开皮肤并牵开皮下脂肪组织。
分离椎旁肌以暴露第7至第9胸椎。
在 T7 和 T8 椎骨上双侧切断小关节突关节。
在第8和第9椎骨之间的背侧结缔组织上做浅层切口。
切除 T8 棘突并轻微旋转其椎板。
在两侧切开椎板,暴露脊髓。
施加麻醉剂,并移除覆盖在T8脊髓节段上的硬脊膜。
确定脊髓中线,并向一侧切开,注意不要损伤脊前动脉。
这种半切手术会破坏一侧的神经束。
放置生理盐水浸湿的吸收性海绵以控制出血。
缝合切口并让大鼠恢复。
在确认麻醉的成年大鼠对足趾夹捏无反应后,于T6至T10椎骨上方剃毛的皮肤处做一个2.5厘米长的切口,使用钝头剪刀分离皮肤及浅层脂肪组织。用钝性分离剪刀和自持式牵开器分开附着于T7至T9椎骨背侧的椎旁肌,并使用精细镊子和棉签清除残留组织,暴露棘突和椎板。
将大鼠置于体视显微镜下,使用精细的骨剪在 T7 和 T8 椎骨两侧对称地剪除椎板关节面。用手术刀在 T8 与 T9 椎板之间的背部结缔组织上做一深约 1 毫米的浅表切口,注意避免损伤下方的脊髓,再用骨剪去除 T8 椎骨的棘突。
使用弯止血钳小心夹住第7胸椎棘突,将第8胸椎椎板的尾端轻轻向头侧旋转约20度,并将骨剪插入第8胸椎椎板下方。沿椎板中线进行切割,并在椎体椎板左右两侧、横突内侧重复上述切割操作,继续扩大椎板切除范围,以暴露脊髓。
向暴露的脊髓腔内滴加 100 微升 2% 利多卡因,使用精细镊子和虹膜剪去除覆盖在 T8 脊髓节段上的硬脊膜。对暴露的脊髓再次给予利多卡因,并通过观察位于暴露的 T7 至 T9 椎骨棘突之间所形成的中线,确定脊髓的中线位置。
使用精细镊子固定脊髓,用解剖刀从正中线向动物一侧进行脊髓半切,注意避免切透腹侧的脊髓前动脉。使用虹膜剪小心剪断脊髓损伤侧残留的任何组织,以确保腹外侧象限被充分横断,并将一块无菌的、约6毫米×2毫米大小的生理盐水浸湿止血海绵置于脊髓上方暴露的腔隙中。
然后使用4-0聚乳酸-羟基乙酸共聚物910缝线缝合肌肉层及切口周围的皮肤,将大鼠置于温暖环境中,在加热灯下持续监测直至完全恢复。