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神经科学
0 次观看 • 4:03 分钟 • July 8th, 2025
取一只携带基因突变的转基因成年小鼠,该突变导致抑制性中间神经元中的钠通道功能失常,小鼠应处于麻醉状态。
固定一个涂有润滑剂的直肠探头以监测其体温。
将小鼠置于恢复笼中,直至其体温稳定。
接下来,将动物转移至预热的加热室,并开始录像。
在监测小鼠体温逐渐上升的同时,定期提高舱室的温度。
随着体温升高,钠通道功能障碍加剧,导致抑制性神经递质释放减少。
这种减少的释放会破坏神经元兴奋与抑制之间的平衡,导致神经元过度兴奋和癫痫发作。
记录惊厥期间的体温,并注明其行为特征。
现在,将小鼠放置在冷却垫上,直至其体温恢复正常。
最后,移除直肠探针,让小鼠恢复。
首先按下电源按钮打开小鼠加热舱,然后按下加热按钮。使用数字温度控制器上的键盘,将加热舱的温度设置为 50 摄氏度。用玉米芯垫料铺满加热舱底部。
在热刺激箱前方安装视频记录相机。将厚层滤纸铺在直径为140毫米的培养皿中,并将其置于冰上作为冷却垫。进行筛选实验时,确保小鼠体重为15克或以上。开始操作前,通过脚趾夹捏确认小鼠已完全麻醉。
用润滑剂涂抹直肠温度探针的金属尖端,然后轻轻插入小鼠体内。用胶带将直肠探针固定在小鼠尾巴上。将小鼠放入铺有玉米芯垫料的新恢复笼中。启动计时器,监测小鼠的核心体温并观察5分钟,直至小鼠完全从麻醉中恢复,且体温稳定在35至36摄氏度。
5 分钟结束时,记录小鼠的体温作为 0 分钟时的初始体温。迅速将小鼠转移至预热的小鼠加热舱底部,以开始实验的试验阶段。将小鼠放入预热的小鼠加热舱后,启动摄像机和秒表。
以规律的时间间隔升高加热室的温度,使小鼠体温以每分钟0.25至0.5摄氏度的速率上升。从实验开始起,每隔1分钟记录一次小鼠的体温,持续记录至实验结束。在第9.5分钟时,将加热室的温度设置为55摄氏度,以便在第10分钟时使加热室的温度稳定在55摄氏度。
同样,在第20分钟时使热室温度稳定达到60摄氏度。每次惊厥筛查试验持续30分钟。若小鼠出现惊厥,记录其在惊厥期间的体温作为惊厥阈值温度。注意观察并记录小鼠表现出的惊厥行为特征。
然后迅速将小鼠从实验舱中取出,放置于冷却垫上。当小鼠体温降至36至37摄氏度时,将其转移至恢复笼中。为移除直肠探针,需小心剪断小鼠尾部与直肠探针导线之间的胶带。
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