小鼠脊髓神经元的脱髓鞘与再髓鞘化

将麻醉后的小鼠固定于立体定位仪上，切开皮肤以暴露脊髓区域。

取含有溶血卵磷脂（一种去垢剂）的注射器，将其置于暴露区域上方，并接触中线的一侧。

将溶血卵磷脂注射至脊髓的白质中，靶向具有髓鞘轴突的神经元，这些轴突可促进更快的信号传导。

保持注射器原位片刻以防止回流，然后将其取出。

缝合切口，涂抹抗菌剂以预防感染，并让小鼠恢复。

注射的溶血卵磷脂会破坏神经元周围的髓鞘，损害轴突信号传导。

该过程还会引发炎症，募集免疫细胞以清除髓鞘碎片，导致轴突局部脱髓鞘，这是一种神经病理学状态。

随着时间推移，少突胶质前体细胞迁移到该部位并分化为少突胶质细胞。

随后，这些少突胶质细胞会在脱髓鞘的神经元周围再生髓鞘，并逐渐恢复信号传导。

将动物置于立体定位仪中，背侧朝上，用折叠的纸巾垫高腹部中段，以增大脊柱的弯曲度。然后用门齿夹固定头部，并用手术胶带固定四肢和尾巴。无需使用稳定耳杆。

现在，使用手术刀从耳下稍下方开始，沿尾侧方向做一条3厘米长的正中切口。然后，找到两个大型脂肪结构之间的分界处，用双手各持一把精细镊子将它们分开。撑开拉钩以暴露手术视野。

在手术显微镜下，找到 T2 椎骨明显的骨性突起，这是 C57 black 6 小鼠品系的特征。为观察椎骨，使用闭合的弹簧剪对覆盖的肌肉组织进行钝性分离。然后，触摸 T3 和 T4 的坚硬表面，以确认正确的解剖位置。

现在，在 T3 和 T4 之间的结缔组织中进行浅层侧向切口。注意切勿切得过深，以免刺破并损伤脊髓。少量出血较为常见，可用海绵棒清除。脊髓表面覆盖有一层较厚的硬脑膜，若该脑膜层尚未被切开，则脊髓将清晰可见。

若硬脑膜保持完整，使用32号金属针轻轻侧向刮除，小心将其移除。避免刺穿下方残留的脑膜，因为这些脑膜较薄且更难观察。若蛛网膜有脑脊液渗出，用海绵棒将其吸除。开始注射时，将毛细管移至脊髓上方的适当位置。

不应将明显的尾侧-头侧血管用作中线标志。应利用背柱两侧的灰质-白质边界来估计中线位置。现在，缓慢降低毛细管，直至其尖端刚好接触脊髓，在中线任一侧的稍外侧位置。在此位置锁定机械臂。

然后，记录立体定位臂 z 方向刻度测量上的基线位置。从该读数中减去 1.3 毫米，并以快速而轻浅的向下动作刺穿组织，小心地将毛细管降至目标深度。

现在，使用显微操作仪，每5秒旋转一周，持续2分钟，共注射0.5微升的总体积。然后将毛细管静置在原位2分钟。2分钟后，小心地将毛细管从组织中撤出。这有助于溶液渗入，否则可能发生回流。

将注射装置从动物体上移开，并取下牵开器。通过在覆盖脊柱的肌肉脂肪组织上打单个缝合结来关闭切口。然后，使用连续缝合线缝合皮肤，并在切口部位再次涂抹碘液。最后将动物放入加热的恢复室中，直至其苏醒，随后将其放回笼中。术后护理与分析步骤详见文本方案。