建立自体血注射诱导的蛛网膜下腔出血大鼠模型

取一只麻醉后暴露颅骨并植入探针以测量颅内压的大鼠。

以颅骨上的参考点为基准，标记目标位置并钻孔。

清除骨碎片，并用骨蜡填充骨孔。

再钻一个孔。找到一条血管，并固定探头以测量脑血流量。

取一根针，将其插入大脑，直至感觉到颅骨。

轻微回撤以确保其位于视交叉前方，此处有主要的血管分布。

用从大鼠尾部采集的新鲜血样填充针管室，并连接含有血液的注射器。

将血液注入充满液体的蛛网膜下腔（位于脑外层和内层膜之间的腔隙），以增加颅内压，从而引起血管收缩。

这会导致脑血流量减少，从而建立蛛网膜下腔出血模型。

为放置激光多普勒探头，在中线处从眼前方稍靠前的位置开始，向尾侧做一条15毫米长的切口。用镊子去除结缔组织和肌肉后，使用无菌棉签的一端作为工具，确定前囟和冠状缝的位置。

放置好持针器后，将一根25号脊髓穿刺针准确置于立体定位仪的前囟位置，并记录当前位置。随后，将穿刺针从前囟处移开，将定位仪向前移动6.5毫米，然后重新将穿刺针置于中线位置，以标记钻孔侧。

钻孔直至在骨下方识别出硬脑膜。使用直血管钳轻轻去除骨碎片，然后用骨蜡填充骨腔。接下来，在冠状缝前方、bregma点右侧3至4毫米处进行激光多普勒检测，再钻另一个孔，注意不要穿透硬脑膜。

寻找激光多普勒可测量血流的血管位置。放置激光多普勒探头并检查读数，要求最小值达到100个灌注单位。若移除显微镜后读数仍处于可接受范围，则添加一滴胶水以固定探头。重新检查，确认读数高于80个灌注单位。

为了诱导蛛网膜下腔出血，将针头轻柔地沿大脑半球间中线穿过颅骨，直至感觉到颅底阻力。将针头回撤1毫米，以确保其准确地位于视交叉前方。为在注射血液时获得最均匀的效果，将针头顺时针旋转90度，使针尖朝向右侧。然后，取出针芯。

经过15分钟的平衡后，调整麻醉水平，使平均动脉血压维持在80至100毫米汞柱范围内。然后进行血气分析，以确认pH值、二氧化碳分压和氧气分压均处于生理参数范围内。

接下来，使用带有钝头23号针头的1毫升注射器，从尾部导管中抽出500微升血液。为避免空气注入，先用血液填充脊髓穿刺针管腔内的死腔。将注射器中的血液体积调整至300微升后，将注射器连接至脊髓穿刺针。然后牢固握住注射器，手动注入血液，使其压力超过平均动脉压。此时可观察到颅内压急剧升高，同时脑血流量显著下降。