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神经科学
0 次观看 • 2:21 分钟 • July 8th, 2025
取一悬液,其中含有具有所需感染复数(即病毒颗粒与细胞数量之比)的致病性寨卡病毒。
将病毒悬液与人胎脑神经干细胞混合。
孵育该混合物,使病毒与细胞表面受体结合,促进病毒内吞作用。
接下来,离心混合物并弃去上清液,上清液中含有未内化的病毒颗粒。
将病毒感染的细胞重新悬浮于培养基中,并接种至包被有细胞外基质蛋白的多孔板中,使其贴壁。
孵育该培养板。
内化的寨卡病毒利用宿主细胞的机制产生新的病毒颗粒。
病毒复制显著改变细胞形态,导致细胞损伤,并促进感染向邻近细胞扩散。
寨卡病毒感染的细胞可用于进一步分析。
将沉淀重悬于ZIKV病毒液中,感染复数(MOI)介于1至10之间。ZIKV溶液的体积不应超过0.5毫升。将样品在37摄氏度下孵育1小时。随后,将管子轻柔颠倒混匀2至3次,然后在室温下以216 × g离心5分钟,以获得细胞沉淀。
通过吸液去除上清液。然后用DPBS重悬细胞以洗涤。接着将混合物在216 ×g离心5分钟,并通过吸液去除上清液。用12 mL适当的培养基重悬细胞。然后将500 µL感染的细胞加入24孔板中。
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