0 次观看 • 3:15 分钟 • July 8th, 2025
取一只经历大脑中动脉闭塞的大鼠，以限制右侧大脑半球的血流。
血液供应减少会使脑细胞缺氧，破坏水的调节，导致细胞肿胀或水肿，并引起血脑屏障破坏。
受损的细胞最终会死亡，形成梗死区域。
向大鼠尾静脉注射蓝色染料以检测血脑屏障的破坏。
取出脑组织，用刀片将其切片，并将脑片置于氧化还原染料溶液中孵育。
在活细胞中，染料与线粒体脱氢酶发生反应并被还原，使活体组织呈现红色。
缺乏脱氢酶活性的梗死区域保持白色。
扫描切片以获得高分辨率图像。
使用图像分析软件，应用蓝色滤光片以消除蓝色染料的颜色，将图像转换为灰度图。
应用阈值法区分健康的黑色组织与梗死的白色组织。
以未受累的对侧半球为参照，计算梗死区域和脑水肿所占的百分比。
首先，取出大鼠脑组织，使用未涂层的0.009英寸不锈钢单边剃须刀片切割成2毫米厚的水平切片。将切片置于0.005% TTC溶液中，在37摄氏度下孵育30分钟。随后，将脑组织放置在显微镜载玻片上，以1600×1600 DPI的分辨率对六片脑切片进行光学扫描。使用图像编辑软件为图像添加蓝色滤光效果。
打开软件后，进入图像（Image），调整（Adjustments），然后选择通道混合器（Channel Mixer）。将输出通道设为蓝色（Blue），并勾选单色（Monochrome），然后点击确定（OK）。将图像以 JPEG 文件格式保存。使用 ImageJ 1.37 版本中的多边形选区工具，分别选中六张脑切片中每一侧的大脑半球，并将其保存为独立的图像文件。
为计算梗死体积和脑水肿，使用宏命令根据阈值将图像中的像素转换为白色或黑色。然后关闭所有文件，使用第二个宏命令比较白色和黑色像素的数量，以确定梗死体积和脑水肿。将原始数据复制到电子表格中。在计算梗死体积时，通过同侧与对侧大脑半球的比值校正组织肿胀的影响。将脑水肿区域以未受累对侧半球标准面积的百分比形式表示。