离心辅助的线粒体转移至胶质母细胞瘤干细胞

从一个含有深红色荧光标记供体线粒体的离心管开始。

加入冷增殖培养基以分散线粒体。

将线粒体溶液加入至含有经修饰的胶质母细胞瘤干细胞或GSCs的孔板底部附近。

这些经修饰的脑癌细胞用蓝色荧光染料标记，并含有红色荧光标记的内源性线粒体。

悬液覆盖了孔板的整个表面，使线粒体均匀分布。

离心培养板，使线粒体更接近细胞，以促进它们之间的相互作用。

现在，将培养皿放入培养。

细胞膜形成较大的囊泡，吞噬包括供体线粒体在内的细胞外物质。

随后，细胞内化这些囊泡，将供体线粒体释放到其细胞质中，可能改变GSC的代谢和功能。

在共聚焦显微镜下观察细胞。

图像分析后，观察到含有绿色供体线粒体和红色内源性线粒体的蓝色细胞，表明线粒体转移成功。

为了将分离的间充质干细胞（MSC）线粒体转移至胶质瘤干细胞（GSCs），向线粒体沉淀中加入200微升预冷的GSC增殖培养基。用GSC增殖培养基稀释线粒体制备物，以确保始终可向GSCs中添加20微升线粒体悬浮液。

接着，缓慢将线粒体加入到孔板底部附近。在4摄氏度下以1,500 × g离心板片15分钟。然后立即将培养物置于37摄氏度环境中。最后，根据文本方案进行线粒体转移分析、流式细胞术分析以及共聚焦成像。