用于模拟阿尔茨海默病的β-淀粉样蛋白释放型聚合物微球的制备

0 次观看3:08 分钟 • July 8th, 2025

取一细胞悬液,该细胞可分泌具有神经毒性的淀粉样蛋白β,并将其与生物相容性聚合物混合。

将装有悬浮液的注射器连接至微珠制备装置,然后推动使其形成连续的液体流。

设备中的振动频率将液流破碎成均匀的微米级液滴。

这些液滴穿过静电场后获得均匀电荷,彼此排斥,从而防止融合。

随后,液滴落入含有钙离子的凝胶浴中。这些离子使聚合物发生交联,将细胞包裹在球形微珠中。

孵育微珠以完成凝胶化,然后用滤膜收集微珠。

将滤膜倒置在离心管上方,加入培养基冲洗磁珠进入离心管,然后将悬液转移至含有培养基的培养瓶中。

聚合物基质可允许营养物质进入以支持细胞增殖,同时实现β-淀粉样蛋白的缓慢释放,模拟在阿尔茨海默病中观察到的慢性累积过程  阿尔茨海默病患者的大脑

制备微珠时,取5毫升细胞海藻酸盐悬浮液加入20毫升注射器中,并将该注射器连接至包封仪。启动包封仪并开启流体驱动,使细胞海藻酸盐悬浮液经由进样器推送,从喷嘴处挤出液滴流。初始1毫升收集于废液烧杯中,以避免初始阶段液流不均匀。随后继续注入剩余的4毫升,使液滴落入氯化钙凝胶浴中固化。

当液滴与凝胶浴接触时,其中的海藻酸钠会立即与凝胶浴中的钙离子发生交联,形成球形微珠。一分钟后,将凝胶烧杯从磁力平台上取下,并在不搅拌的条件下静置微珠额外四分钟,使其在室温下完成凝胶过程。为收集微珠,首先使用无菌镊子去除任何较大的海藻酸钠碎片或杂质。剪去塑料移液管末端后,用其将微珠从凝胶浴转移至置于废液杯上方的74微米筛网过滤器中。

为了确保成功,我们每次在包封后将微珠从一个容器转移至另一个容器时,都会剪去塑料移液管的末端,以避免损坏微珠。

将网状滤膜倒置在离心管上方。用移液器吸取适量的培养基冲洗滤膜,使珠子沿管壁洗入离心管中,并在该培养基中平衡5分钟。随后,将珠子转移至预先加入适量培养基的培养瓶中,用于孵育及后续实验。

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最后更新:29 八月 2026