0 次观看 • 3:08 分钟 • July 8th, 2025
取一细胞悬液,该细胞可分泌具有神经毒性的淀粉样蛋白β,并将其与生物相容性聚合物混合。
将装有悬浮液的注射器连接至微珠制备装置,然后推动使其形成连续的液体流。
设备中的振动频率将液流破碎成均匀的微米级液滴。
这些液滴穿过静电场后获得均匀电荷,彼此排斥,从而防止融合。
随后,液滴落入含有钙离子的凝胶浴中。这些离子使聚合物发生交联,将细胞包裹在球形微珠中。
孵育微珠以完成凝胶化,然后用滤膜收集微珠。
将滤膜倒置在离心管上方,加入培养基冲洗磁珠进入离心管,然后将悬液转移至含有培养基的培养瓶中。
聚合物基质可允许营养物质进入以支持细胞增殖,同时实现β-淀粉样蛋白的缓慢释放,模拟在阿尔茨海默病中观察到的慢性累积过程 阿尔茨海默病患者的大脑
制备微珠时,取5毫升细胞海藻酸盐悬浮液加入20毫升注射器中,并将该注射器连接至包封仪。启动包封仪并开启流体驱动,使细胞海藻酸盐悬浮液经由进样器推送,从喷嘴处挤出液滴流。初始1毫升收集于废液烧杯中,以避免初始阶段液流不均匀。随后继续注入剩余的4毫升,使液滴落入氯化钙凝胶浴中固化。
当液滴与凝胶浴接触时,其中的海藻酸钠会立即与凝胶浴中的钙离子发生交联,形成球形微珠。一分钟后,将凝胶烧杯从磁力平台上取下,并在不搅拌的条件下静置微珠额外四分钟,使其在室温下完成凝胶过程。为收集微珠,首先使用无菌镊子去除任何较大的海藻酸钠碎片或杂质。剪去塑料移液管末端后,用其将微珠从凝胶浴转移至置于废液杯上方的74微米筛网过滤器中。
为了确保成功,我们每次在包封后将微珠从一个容器转移至另一个容器时,都会剪去塑料移液管的末端,以避免损坏微珠。
将网状滤膜倒置在离心管上方。用移液器吸取适量的培养基冲洗滤膜,使珠子沿管壁洗入离心管中,并在该培养基中平衡5分钟。随后,将珠子转移至预先加入适量培养基的培养瓶中,用于孵育及后续实验。
本文介绍了一种利用生物相容性聚合物制备包封神经毒性β-淀粉样蛋白细胞的微珠的方法。该过程模拟了阿尔茨海默病中β-淀粉样蛋白的慢性积聚,可实现可控释放和细胞增殖。
可控制备可释放淀粉样蛋白β的聚合物微球,能够实现阿尔茨海默病研究中与疾病相关的慢性神经毒性累积的建模。该系统有助于提高对神经退行性疾病项目早期靶点验证和作用机制风险评估的预测可信度。该方法提供了一个可扩展、可重复的平台,用于在生理相关背景下评估治疗假设并筛选干预手段。
这种微珠制备方法可融入从发现到临床前研究的连续流程,实现对淀粉样蛋白-β毒性的假设验证、筛选及转化建模。
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最后更新:29 八月 2026