通过颈内动脉注射癌细胞建立脑肿瘤转移模型

从一只麻醉后暴露颈总动脉（CCA）的小鼠开始。

颈总动脉（CCA）分为供应面部血液的颈外动脉（ECA）和供应脑部血液的颈内动脉（ICA）。

首先，在 ECA 周围放置一根缝线并收紧。

然后，在注射部位下方的颈总动脉（CCA）上结扎一道紧密的缝线，以阻断血流。

在 CCA 下方插入一条湿润的试纸条以提供支撑。

在注射部位上方打一个松结，然后将癌细胞注入胆管（CCA）。

由于颈外动脉（ECA）被结扎，细胞经颈内动脉（ICA）进入大脑。

注射后，拔出针头并扎紧颈总动脉远端的结扎线，以防止反流。

最后，剪断缝线，移除条带，用生理盐水冲洗，并闭合伤口。

随着时间的推移，迁移的癌细胞在大脑中增殖并形成肿瘤。

将精细镊子置于颈外动脉下方，穿过一根5-0丝线。打结并拉紧丝线，剪去多余线头。将精细镊子置于颈总动脉下方，穿过另一根5-0丝线。

在预定注射部位近端打结并拉紧缝线。剪除多余的缝线，留下约10毫米的线头。剪取一条约10毫米×5毫米的低尘一次性擦拭条，并将其润湿。

将条带折叠并置于预定注射部位下方的颈总动脉处，以在注射过程中支撑血管。在预定注射部位头侧的颈总动脉上，用松结放置第三根结扎线，该结扎线仅在注射完成后收紧。

轻轻振荡细胞悬液，并用胰岛素注射器（带31号针头）吸取200 µL细胞悬液。将注射器装入连接激活脚踏板的注射泵中。

将一根带有31号针头的细导管连接到注射器上，并预充管路。检查颈动脉是否位置良好并有压力。使用两把精细的弯头镊子，一把轻轻牵拉第一根结扎线的末端，另一把夹住31号针头，缓慢将针头斜面向上插入血管腔内，注意不要刺穿血管。

以每秒10微升的速度，将先前制备的100微升细胞悬液缓慢注入颈总动脉。这将向血管内输送2.5×10⁵个细胞。成功的注射可通过颈动脉血管内血液的清除现象进行观察。

拔出针头后，轻轻提起并拉紧松散的结扎线，以防止回流和出血。剪除多余的缝线，并移除湿润的低絮一次性擦拭布。

使用P200移液器，用150至200 µL无菌水或生理盐水冲洗手术腔两次。检查有无出血后，将软组织、唾液腺和皮肤复位至颈动脉和气管上方。使用持针器、镊子以及可吸收或不可吸收的6-0单股缝线，以连续缝合方式关闭切口的皮肤层。