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神经科学
0 次观看 • 4:52 分钟 • April 28th, 2025
将已麻醉并完成准备的小鼠固定在立体定位仪框架中，暴露其颅骨。
确定颅骨参考点。然后，在动物头部下方放置头颅支撑装置，并充气以防止耳部损伤。
将立体定位引导的电磁撞击器对准头部。
重置立体定位坐标，精确定位撞击探针于目标位置上方。将接触传感器连接至动物耳部。
探针接触颅骨后，将其回撤。设定所需的撞击深度，并使用适当的参数启动撞击。
探针向颅骨施加可控的力，引起皮层神经元轴突的拉伸和剪切，从而导致轻度创伤性脑损伤。
测量动物的翻正时间，即受伤后恢复至正常体位所需的时间。
检查小鼠是否存在可见的颅骨骨折。
然后，将小鼠从固定架上取出，缝合切口，并涂抹抗生素。
让小鼠恢复。
使用轻质乙缩醛树脂锥形耳棒、咬合杆和小鼠麻醉面罩将小鼠固定在立体定位仪框架中。随后，密切监测小鼠的呼吸，以确保麻醉深度。在眼睛上涂抹无菌眼用润滑剂，防止角膜干燥。用聚维酮碘棉签对头皮进行消毒。
确认麻醉深度后，使用手术刀在眼睛与颈部之间的中线位置做一条长约1厘米的头皮切口，暴露颅骨。让颅骨干燥1至2分钟，然后确定前囟（bregma）和后囟（lambda）。接着，将头部固定装置置于头部下方，并用水充盈球囊，直至其顶住小鼠头部底部，但不使头部脱离咬合杆。
将撞击器移至小鼠头部上方。通过将伸缩切换开关拨至“伸出”位置，使撞击器伸出。然后调整撞击器位置，使其对准前囟中心。在立体定位读数器中将数字立体定位的 X 和 Y 坐标重置为 0。接着，将探针从前囟移动至目标坐标位置，即内侧-外侧方向为 0 毫米，前-后方向为 -1.6 毫米，以完成探针对撞击位置的准确定位。
将接触传感器轻触小鼠耳部。使用延长探针缓慢降低探针尖端，直至首次接触表面，听到蜂鸣声时停止。随后，在立体定位仪读数器中将数字立体定位 z 坐标重置为 0。
仔细检查探头是否与颅骨齐平。然后，将控制箱上的拨动开关置于回缩位置，使撞击器回缩。探头随之撤回，直至撞击前不再与头部接触。通过调节背腹向深度至负1.2毫米来设定撞击深度。密切监测小鼠的呼吸，以确保麻醉深度，并根据需要调整气体浓度。
通过按下右侧的切换开关来触发撞击。探针尖端以显示的速度下降，保持设定的停留时间后回缩。在造成闭合性头部损伤（CHI）撞击后立即启动计时器，以记录翻正时间。平均翻正反射时间为 5 至 15 分钟。
检查小鼠是否存在可见的颅骨骨折、出血和呼吸暂停。将小鼠从立体定位仪上取下。通过缝合钉将头皮皮肤闭合。然后用无菌棉签在闭合的切口处涂抹三联抗生素软膏。将小鼠放回清洁的饲养笼中进行恢复。