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神经科学
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取一只已麻醉的大鼠。
剃除头皮毛发,然后涂抹眼用凝胶以保持角膜湿润。
将动物固定在立体定位仪上,并对手术部位进行消毒。沿中线做一切口并牵拉切口以暴露颅骨。
在右侧额叶半球钻孔以进入前额叶皮层。
将含有胶质母细胞瘤或脑肿瘤细胞悬液的立体定向引导注射器置于钻孔位置上方。
使用泵控制器将细胞悬液注入前额叶皮层。
缓慢撤出针头,以防止注射的细胞回流。然后,用骨蜡封闭钻孔部位。
缝合手术切口并消毒手术部位。
将大鼠放回笼中,并使用红色灯泡维持其体温。
注射后,脑肿瘤细胞增殖、浸润周围组织并诱导血管生成,破坏正常脑功能,从而建立胶质母细胞瘤模型。
为了将胶质瘤细胞接种到一只170克重的雌性F344大鼠(Fisher品系)的脑内,首先通过脚趾夹捏无反应来确认动物已进入麻醉状态。去除从眼睛水平至颅骨后部的毛发,并在动物的眼睛上涂抹眼膏。将动物固定在立体定位仪中。用聚维酮碘对暴露的皮肤进行消毒,并做一条长约2厘米的正中头皮切口以暴露颅骨。使用金刚石钻头,在右侧额叶半球、前囟后方2毫米、外侧2.5毫米处钻一个直径1毫米的孔。
接下来,用29号胰岛素注射器吸取5 µL细胞悬液。在立体定向引导下,使用微量注射泵控制器将细胞注入颅骨下深度3 mm处,然后缓慢拔出针头。用骨蜡封闭切口。随后,用更多聚维酮碘对皮肤进行缝合和消毒。术后使用红灯照射以维持动物体温稳定,并持续监测直至其完全恢复。