通过自体血注射在大鼠模型中诱导桥脑大量出血

0 次观看 • 4:38 分钟 • April 28th, 2025

从一只固定在立体定位仪上的麻醉大鼠开始,使用经抗凝涂层处理的汉密尔顿注射器。

暴露大鼠颅骨,并在脑桥区域上方钻一个孔。

将针灸组件插入尾静脉,抽取血液并转移至试管中。

将注射器设置为回抽模式并吸取血液。

切换至输注模式,并将注射器通过孔洞插入至脑桥区域。

注射少量自体血液。固定注射器以防止回流。注入的血液会随时间逐渐凝固。

间隔一段时间后,将注射器回撤至原始位置。将剩余的血液注入同一区域,再停留一段时间后回撤。

双注射法可防止血液扩散至周围区域。

输入的血液使血凝块增大,对周围血管施加局部压力,导致血管破裂。

这会导致大量失血,并引发严重的脑桥出血。

首先将手术巾覆盖在小鼠身上。沿标记的正中线用手术刀做一切口。用棉签清除可能存在的血液。然后在头皮瓣两侧各放置一把镊子以暴露颅骨。将棉签蘸取0.9%生理盐水,轻轻去除颅骨上的结缔组织。

使用记号笔标记前囟中央点作为原点。使用微型钻头进行颅骨开孔,操作时需小心谨慎。完成后,将微型钻头从立体定位架上移除。将100微升Hamilton注射器放入立体定位仪的持针器中。

打开注射泵开关。点击快速吸入按钮,将肝素溶液吸入至100 µL,然后完全排出。使用氯己定和75%酒精外科擦洗液对整个尾巴从根部到尖端进行至少三次擦拭,以消毒皮肤、软化角质并扩张尾静脉,从而提高注射成功率。

将头皮针连接至1毫升注射器,然后将头皮针插入距尾尖3厘米处的尾侧静脉,采集150微升血液。将头皮针从1毫升注射器上取下,迅速将血液转移至试管中,操作需迅速以防止血液凝固。更换外科手套。

选择抽取模式。将体积设为 100 微升,速度设为 200 微升每分钟。点击运行按钮,将 100 微升血液吸入 Hamilton 注射器中。切换至注入模式,并将速度设为 1 微升每分钟。

将注射器推进至针尖到达脑表面以下 9.2 毫米处,注入第一份 10 微升血液。点击“运行”按钮。停止注射,并将注射器保持在原位 20 分钟,以防止血液流入蛛网膜下腔。

将注射器回撤,直至针尖到达脑表面下方9毫米处。然后以相同的速度(每分钟1微升)重新开始注射,直至残余血液完全注入。将注射器留在原位10分钟,以防止血液回流。缓慢地将注射器从脑组织中取出。

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