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神经科学
0 次观看 • 5:12 分钟 • April 28th, 2025
将一只已固定并麻醉的新生大鼠置于加热垫上。
用乙醇和聚维酮碘交替消毒宫颈区域。在切口部位给予局部麻醉。
做颈部切口,暴露颈总动脉。
放置拉钩以确保清晰的术野暴露。
识别颈内动脉(ICA)并去除周围组织。
在颈内动脉(ICA)根部结扎一根结扎线,并将其牵开,以暂时阻断血流。
在颈内动脉(ICA)上放置一个松散的第二根结扎线。
在结扎线之间做一切口。
取一根硅胶包被的尼龙阻塞缝合线,通过切口插入,直至到达大脑中动脉(MCA)。
这会阻断向大脑中动脉的血流,从而在脑部诱发局部缺血。
用结扎线在阻断缝线上打结以固定。
缝合切口部位。在进行后续研究前,让幼鼠充分恢复。
根据批准的方案,使用吸入式异氟烷对幼鼠进行麻醉,确保其对足部夹捏无反应。在手术台上使用加热垫以维持动物体表温度。用胶带固定动物肩部区域,使其保持仰卧位。
使用无菌棉签先用70%乙醇擦拭颈前区域,随后用聚维酮碘溶液棉签擦拭。接着,在计划切口部位局部浸润0.25%布比卡因。然后,在体视显微镜下操作,沿颈前正中做5至7毫米的切口,以暴露颈总动脉。
放置2到4个牵开器,以保持术野开放并暴露动脉。接着,定位颈内动脉、枕动脉和颈外动脉。清除动脉周围的结缔组织和脂肪,以获得清晰的视野。
剪取1.5厘米长的6-0编织丝线缝合线后,将缝合线拆解,抽出单股丝线。确保单股丝线整齐,无散开或毛边。
用45度持针钳夹住缝合线,将持针钳沿弧线在颈内动脉(ICA)下方移动,使钳尖从颈内动脉与眼动脉(OA)之间穿出。接着,夹住缝合线的末端并将其拉出,以便于操作。松开持针钳对缝合线的夹持,将持针钳沿原路径反向退出颈内动脉下方。
在颈内动脉(ICA)靠近其与颈总动脉(CCA)分叉处的基部绑扎一根临时结扎线。小心地将颈内动脉向侧方牵开,然后使用夹子将牵开线固定在切口对侧腋区附近的多余皮肤上。确保牵开线足够紧绷,以阻断血流后,再进行下一步操作。
动脉应呈扁平且颜色苍白。用45度镊子夹住另一根未编织的缝合线,像之前一样将其环绕在颈内动脉(ICA)下方并绕一圈。将此线置于牵拉线的外侧。
然后在结扎线与未结扎线之间的中点处,靠近结扎线的位置,切开一个0.2毫米的动脉切口。现在,使用刻度尺量取10毫米长的硅胶包被尼龙缝线作为阻断缝线。剪断缝线时额外留出2至3毫米,以便在再灌注期间移除。
用45度角的持针钳夹住阻断缝线,用直血管钳在缝线上弯折,标记推进的终止点。将阻断缝线经动脉切口送入,使其方向与颈外动脉(ECA)平行并朝向头部。平稳推进缝线,直至到达弯折处。然后利用位于牵拉缝线外侧的线段打一个临时结,以固定阻断缝线。移除牵开夹。随后剪除两个临时结的线头,保留用于松解结扎的线段长于用于收紧的线段。移除牵开器。最后使用6-0编织丝线行三到四个间断缝合,关闭术区腔隙。
将幼鼠移出麻醉环境,置于室温下的加热垫上。监测幼鼠直至其恢复足够的意识以维持胸卧位,并确保其完全恢复后再放回母鼠身边。