使用背根神经节注射和背根挤压损伤对大鼠的感觉轴突再生进行建模

从麻醉的大鼠开始。

颈椎 C2 和胸椎 T2 之间做一个中线皮肤切口。

接下来，沿着白色纤维组织中线切开并缩回第一层肌肉。

第二层中线的薄膜组织，然后缩回横纹纵肌。

最后，切开第三层肌肉，露出脊柱。

去除覆盖左侧 C4 至 T1 椎骨的椎板和椎弓根，以显示 C5 至 C8 背根神经节或 DRG。

重组腺相关病毒悬浮液注射到 DRG 中。

该病毒编码一种有助于轴突再生的促进生长的蛋白质。

使用镊子压碎 C5 至 C8 背根，切断从 DRG 到脊髓的轴突连接，从而造成受控的轴突损伤。

该模型已准备好研究病毒介导的轴突再生。

定位皮肤上突出的 C2 和 T2 棘突开始手术。然后用10号手术刀，在C2和T2棘突之间做一个皮肤切口。一旦皮肤打开，第一层肌肉上应该可以看到白色的纤维组织中线，具有果冻状的质地。

沿着白色中线在第一层肌肉上做一个类似大小的切口。不要超出突出的 T2 棘突，因为那里附近有一根主要血管。使用两个牵开器缩回第一层肌肉，一个位于喙侧，一个位于尾部。

横纹外观的第二层肌肉。找到第二层肌肉的中线，在那里可以观察到两块纵向肌肉，由薄薄的膜组织连接。然后用一把微剪刀解剖膜组织，将两块纵向肌肉分开。

调整牵开器以露出覆盖脊柱的第三层薄口吻。用一对镊子轻轻触摸第三层肌肉可以感觉到棘突。用微剪刀在第三层肌肉上做一个小切口。并用刮匙或手术刀侧向轻轻刮掉骨头上的肌肉，以清楚地露出椎骨。

要将左侧 C5 暴露于 C8 DRG，请使用一对细颈椎通过小心地去除部分椎板和蒂，对 C4 至 T1 椎骨进行左半切除术。一旦有足够的 DRG 暴露用于注射，通过将装有定制 33 号钝针的充满病毒的微升注射器放在立体定向注射器支架上来准备注射器。接下来，使用 30 号斜角针在每个目标 DRG 上做一个小的表面开口，以协助插入注射针。轻轻调整立体定位坐标，将 33 号针插入 DRG 的中心。

理想情况下，针头应放置在 DRG 的最中心，以确保注射溶液在整个 DRG 中均匀扩散。

针头后，使用输液注射泵将 1 微升病毒注射到每个 DRG 中。在注射过程中，如果病毒溶液中含有有色染料，DRG 会缓慢变色。不要过度插入针头，因为这可能会导致液体从 DRG 的腹侧泄漏。

如果注射过程中出现渗漏，请立即调整针头的位置。注射结束三分钟后，拔出注射针。要同时进行 C5 至 C8 背根挤压损伤，请使用一对细头镊子将每个根压碎 3 次，持续 10 秒。完全对着镊子的末端。组织中应在挤压部位出现一条白线。