利用背根神经节注射与背根挤压损伤在大鼠中建立感觉轴突再生模型

从一只已麻醉的大鼠开始。

在颈椎C2与胸椎T2之间沿中线做皮肤切口。

接下来，沿白色纤维组织的中线切开，并牵开第一层肌肉。

解剖第二肌层中线处的薄而膜状的组织，然后牵开横纹状纵行肌。

最后，切开第三层肌肉以暴露椎体。

切除覆盖左侧 C4 至 T1 椎体的椎板和椎弓根，以暴露 C5 至 C8 背根神经节（DRG）。

将重组腺相关病毒悬液注射至背根神经节（DRGs）中。

该病毒编码一种促进生长的蛋白质，有助于轴突再生。

使用镊子压碎 C5 至 C8 背根，以切断背根神经节（DRG）与脊髓之间的轴突连接，从而建立可控的轴突损伤模型。

该模型已可用于研究病毒介导的轴突再生。

手术开始时，先在皮肤上定位明显的C2和T2棘突。然后使用10号手术刀，在C2与T2棘突之间做皮肤切口。切开皮肤后，应在肌肉第一层中线处看到一层白色纤维组织，其质地呈胶状。

沿白色中线在第一层肌肉上做一个大小相似的切口。不要超过明显的T2棘突，因为附近有主要血管。使用两个拉钩分别置于头侧和尾侧，将第一层肌肉牵开。

现在应可见具有横纹外观的第二层肌肉。找到第二层肌肉的中线位置，此处可观察到两条纵行肌，由一层薄的膜状组织连接。然后使用显微剪刀解剖该膜状组织，分离这两条纵行肌。

调整拉钩以暴露覆盖脊柱的第三层薄肌肉组织。用镊子轻轻触碰第三层肌肉，可触及棘突。使用显微剪刀在第三层肌肉上做一个小切口。然后用刮匙或手术刀以侧向方式轻轻刮除骨骼上的肌肉，以清晰暴露椎骨。

为暴露左侧C5至C8脊神经节（DRG），使用精细咬骨钳对C4至T1椎体进行左侧半椎板切除术，小心去除部分椎板和椎弓根。当暴露出足够进行注射的DRG区域后，准备注射器：将装有病毒的微升注射器（配备自制的33号钝头针头）安装到立体定位注射器固定架上。接着，使用30号斜面针头在每个目标DRG表面制作微小的浅表切口，以辅助注射针头的插入。轻轻调整立体定位坐标，将33号针头插入DRG中心。

理想情况下，应将针头置于背根神经节（DRG）的正中心，以确保注射溶液在背根神经节内均匀扩散。

针头插入后，使用灌注注射泵将1 µL病毒溶液注入每个背根神经节（DRG）。注射过程中，若病毒溶液含有显色染料，DRG会逐渐变色。切勿过度插入针头，以免液体从DRG腹侧渗出。

若注射过程中发生渗漏，应立即调整针头位置。注射结束后3分钟，拔出注射针头。若需同时进行C5至C8节段背根挤压损伤，使用尖头镊子对每根背根挤压3次，每次持续10秒，挤压时须将镊子尖端完全闭合，挤压部位的组织应出现一条白色痕迹。