研究神经干细胞活化和迁移的最小脊髓损伤模型

拿一只麻醉的鼠标剃掉它的背部。

将其固定在立体定位装置中，并用卷纱布支撑胸椎。

对皮肤进行消毒，做一个垂直的中线切口，然后缩回皮肤。

将肌腱从胸椎上分离并缩回。

识别目标椎骨，然后切断椎间关节将其移除。

暴露脊髓并在中线的两侧插入一根弯曲的针。

针插入会在白质（包含轴突束的外脊髓层）中造成浅表损伤，同时保持中心管完好无损。

取出针头，然后缝合肌肉和皮肤。

受损细胞释放激活组织驻留免疫细胞的信号，进而激活中心管周围的神经干细胞或 NSC。

激活的 NSC 迁移到损伤部位，帮助组织修复。

在开始手术之前，使用理发器从麻醉小鼠的背部中部到颈部和耳朵去除皮毛。将鼠标固定在立体定位装置中后，将四到五块卷起的纱布放在腹部下方，同时轻轻拉动尾巴根部以拉直身体和脊柱。

胸纱布卷从小鼠腹部向上胸部推向上胸部，以支撑胸椎。并使用实验室胶带将尾巴和四肢固定在星形方向。用连续的70%乙醇和聚维酮碘拭子对暴露的皮肤进行消毒后，用10号手术刀刀片平行于动物的纵轴线，从双肩胛骨的中点到胸椎的曲率，做一个垂直切口。

回皮肤，露出软组织和脊柱轮廓，并识别肩胛上脂肪垫的下缘。然后，用手术刀小心地，但用力地沿着椎骨 T5 到 T8 和 9 骨的两侧切开，以将背部肌肉肌腱从脊柱上分离出来。重新定位牵开器，使牵开器的牙齿插入脊柱两侧的切口部位，并展开每个牵开器以调整暴露，直到脊柱充分抬高，而不会对回缩的肌肉层施加太大压力。

在手术显微镜下，仔细清洁覆盖在脊柱上的残余肌肉和其他软组织，露出椎骨，用齿镊子夹住椎骨的棘突，并轻轻上下移动镊子以识别要切除的椎骨。接下来，将一把弯曲的钝剪刀的一个尖端插入暴露的椎间孔的两侧，尾部到要切除的椎板，并在双侧切割连接的椎间关节。然后，向上提起椎板，切断椎板的上部附着物，以隔离并去除骨头。

掉和移除椎板时，注意始终将剪刀向上倾斜，以免损坏下面的脊髓。

以背中线静脉为标志，将 30 号针尖斜面朝上的 45 度弯曲轴插入脊髓背外侧表面 1 毫米深，中线两侧外侧约 0.5 毫米。将针从尾部方向移动到喙侧约两毫米，使斜面的整个长度插入绳索中。然后，追溯入口路径以取出针头。

要闭合伤口，请取下牵开器，并使用 6-0 可吸收缝合线沿中线连接伤口两侧的背部肌肉，并使用 4-0 丝线缝合上覆皮肤。