从人外周血制备富血小板血浆

从锥形管中的人类外周血开始。

以低速离心试管，使血液分离成三层：底部为红细胞，中间为白细胞和血小板层（buffy coat），顶部为含血小板的血浆。

将血浆层转移至新的离心管中，高速离心以沉淀血小板。

将血浆上清液转移至新试管中。

收集血小板沉淀，并用适当体积的血浆上清液重悬，以获得富含血小板的血浆（PRP），其中含有高浓度的血小板。

首先，在无菌环境中，将含有抗凝血液的离心管放入设定为室温的临床级台式离心机中。以 100 g 的相对离心力进行 15 分钟的初次低速离心，使抗凝血液分离为三层：底部为红细胞，上层为血浆，中间为白膜层。

使用18号无菌脊髓穿刺针，以无菌操作方式移取三分层样本中的上层血浆。将血浆收集至单独的锥底离心管中，确保每管含有10毫升血浆。

然后，将含有10毫升血浆的15毫升离心管放入离心机中。在1,600 ×g 条件下进行高速离心10分钟，使血小板沉淀至管底。收集上清液至新的离心管中。

接下来，使用18号无菌脊椎穿刺针，将血小板沉淀转移至5毫升注射器中。将不同试管中的所有血小板沉淀收集至同一支5毫升注射器中，用于后续应用。

随后，将收集的沉淀物用第二次离心所得的上清血浆按所需体积重悬，用于临床应用。使用临床级血细胞计数板或自动化血液学分析仪，对最终PRP样本中的血小板进行计数。根据以下公式计算绝对血小板计数、血小板浓度梯度及血小板回收效率。