转基因小鼠神经炎症的生物发光成像

从一只已麻醉的转基因小鼠开始，该小鼠体内存在致病性蛋白聚集体，可引发神经炎症和星形胶质细胞活化，从而导致荧光素酶表达增加。

去除头部的毛发，以防止成像过程中发生光散射。

使用无刺激性标记笔对耳朵进行染色，以阻断非特异性生物发光。

根据小鼠的体重取适量的荧光素酶底物，进行腹腔注射。

荧光素进入血液，到达脑部，并被活化的星形胶质细胞摄取。

在星形胶质细胞内，荧光素酶氧化荧光素，产生生物发光信号。

设置成像参数，并将小鼠精确放置在生物发光成像室的加热板上。

确保麻醉气体流量适当，并在所需时间内采集生物发光信号。

然后，选择感兴趣区域并定量目标生物发光信号。

该信号的强度对应于荧光素酶活性，反映星形胶质细胞的活化状态，并为神经炎症提供直接的量化指标。

成像前，对异氟烷麻醉的小鼠进行头部剃毛和脱毛处理。使用无刺激性记号笔将耳朵涂成黑色，以阻断非特异性生物发光。注射前称量动物体重，然后根据150 mg/kg的剂量计算所需D-荧光素的准确注射体积。

按计算体积腹腔注射 d-luciferin，然后将每只动物放回麻醉舱中。启动成像软件。待成像系统达到工作温度后，点击控制面板上的初始化按钮以初始化系统，随后选择发光和拍照模式。

将曝光时间设为 60 秒，binning 设为中等，光圈设为 1，EM 增益关闭。选择“block”，然后点击“open”，在“subject height”选项卡下，从下拉菜单中选择 1.50。注射 D-荧光素钠 10 分钟后，将动物放置于成像室内的加热板上，并确保其肌肉正确连接至麻醉输出口。

将异氟烷气流从吸入室切换至成像室，并妥善关闭成像室的门。点击采集按钮以测量生物发光信号，该过程持续60秒。