使用光学相干断层扫描技术对小鼠视网膜进行活体成像

取一只表现出视神经萎缩的麻醉转基因小鼠。

瞳孔扩大以增强光线穿透。

给予麻醉剂以固定眼球。滴加滴眼液以保持角膜湿润。随后，用纱布包裹小鼠以维持其体温。

涂抹凝胶以减少光折射。将小鼠固定在光谱域光学相干断层扫描系统的卡匣中，确保头部位置正确。

对齐右眼与成像镜头的光轴。使用对准控制将视神经乳头置于成像视野中心，确保视网膜正确对齐。

射入视网膜的低相干光会在具有不同折射率的各层组织上发生反射。反射光与参考光束结合，产生干涉图样，从而生成视网膜的高分辨率横断面图像。

成像后，让小鼠恢复。

OCT 图像分析显示神经节细胞复合层增厚，这是视神经萎缩的典型特征。

吸除液滴，再次滴加10% 去氧肾上腺素和0.5% 托吡卡胺。当瞳孔充分散大以满足成像要求时，使用黏稠的乙二醇基眼药水润滑眼睛，以提供角膜水合作用，并用外科纱布包裹小鼠以保持其体温。

使用海绵或棉芯，将含有0.3%羟丙基甲基纤维素的眼用凝胶薄薄地涂抹于每只眼睛上。操作时，将眼睫毛和胡须拨开。将小鼠放置于样品盒中，头部保持平直并朝向前方，并小心地将咬合杆放入其口中。在小鼠身体一侧被检测眼睛的下方放置一个棉卷。

然后保持夹式瞄准尖端位于小鼠专用镜头上，逆时针旋转Z轴调节螺钉，使镜头向眼睛方向移动。通过旋转和摆动样本盒，并调节咬杆及X轴调节螺钉，预先调整小鼠的位置，直至实验眼正对镜头中心。

当眼睛的光轴与镜头对齐后，选择检查中的第一项扫描。点击“开始对准”，使用Z向调节螺丝在左侧面板中垂直移动视网膜，在右侧面板中水平移动视网膜。通过旋转胶片盒，上下移动视神经头，使其位于右侧面板中央。使用咬合杆螺丝在右侧面板内校正视网膜的方位，并旋转胶片盒，使视神经头位于左侧面板中央。

然后，使用 X-translator 螺丝在左侧面板内调平视网膜，并根据每个调制器的主要功能，进一步调整视网膜位置，使其精确对准视神经乳头中心。当视网膜定位完成后，单击“开始快照”以启动谱域光学相干断层扫描。

请勿忘记保存扫描图像和报告。必要时调整居中位置。将小鼠从暗盒中取出。为每只眼睛涂抹含0.3%羟丙基甲基纤维素的眼用凝胶，并将小鼠置于加热板上，持续监测直至完全恢复。