为什么零假设检验对甲氧基-X04斑块成像具有重要意义？

零假设检验能够客观评估实验组之间观察到的斑块分布是否存在显著差异，从而支持阿尔茨海默病模型中的靶点验证。

自变量隔离如何融入成像工作流程？

分离处理或基因型等变量可确保斑块定位图谱输出的差异归因于特定干预措施，从而加强机制解释及发现流程中的决策可靠性。

定量因变量测量在斑块分析中能够实现什么？

斑块负荷和定位的定量测量为比较不同队列间的疾病进展、干预效果以及解剖学特异性提供了可操作的数据。

为什么复制要求对于跨职能协作至关重要？

成像与图谱绘制方案的可重复性可确保数据的可靠性与可比性，有助于神经退行性疾病研究中发现、临床前及转化研究团队之间的协作。

在实施斑块定位图绘制之前需要具备哪些统计分析能力？

需要强有力的统计工具来分析空间分布、量化斑块指标并验证其显著性，从而推动阿尔茨海默病研究管线中的科学决策。

阿尔茨海默病小鼠脑切片中甲氧基 X04 标记的淀粉样蛋白斑块的可视化和标测

JoVE Encyclopedia of Experiments

神经科学

0 次观看 • 3:19 分钟 • May 29th, 2025

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从小鼠脑组织切片开始，该切片包含缓冲液中的感兴趣区域，以在成像期间保持水合作用。

该组织是从注射甲氧基X04（一种荧光染料）的阿尔茨海默病小鼠模型中获得的。

甲氧基 X04 特异性结合淀粉样斑块中的β褶片结构，并保留其荧光以进行成像和分析。

使用带有紫外线滤光片的荧光显微镜，激发甲氧基-X04并捕获发射的荧光，以可视化周围组织的荧光标记的淀粉样斑块。

无需调整显微镜载物台，即可在明场模式下捕获同一区域的图像以详细了解组织结构，并以荧光模式捕获斑块。

使用图像处理软件对齐明场和荧光图像，将斑块精确映射到解剖结构上。

这些图像提供了淀粉样斑块在其结构背景下的详细可视化，以研究阿尔茨海默病病理学。

在

立体定位小鼠脑图谱的帮助下，选择包含感兴趣区域的脑切片，并将每个切片放入24孔培养板的孔中冷冻保护剂中。接下来，使用一次性移液器将 PBS 液滴添加到显微镜载玻片上，然后将切片放在液滴上。

在荧光显微镜下检查切片，以识别含有甲氧基-X04标记的A-β斑块的区域。无需移动显微镜载物台，即可在明场和荧光模式下捕获感兴趣区域的图像。每张图像必须在两个区域中显示相同的区域，以将斑块与组织切片的结构区域相关联。

根据动物编号保存并命名拍摄的图像。另外，记录板中的井号和拍摄照片的字段。成像完成后，将切片放回指定孔中。使用相同的程序检查序列中的下一部分，以避免干燥这些部分。

要对齐图像，请在图像 J 中打开相同 ROI 的明场和紫外场图像。然后，使用马赛克 J 插件对齐两个图像的边缘。根据孔号将对齐和组合的图像保存在文件夹中，并附上特定动物的编号。结合来自同一动物不同部分的图像，以识别和定位感兴趣区域的斑块。