在EAE小鼠模型中进行生物发光成像

0 次观看2:27 分钟 • May 29th, 2025

从一只患有实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)的麻醉小鼠开始。该疾病可引起眼睛和脑部的炎症。

将小鼠放入成像设备中,使其背部上部位于中心位置。

用黑色布料覆盖小鼠的下半部分,以防止该区域产生信号干扰。

使用成像软件记录小鼠的位置。

取一支装有含生物发光底物试剂的注射器,将试剂腹腔注射到小鼠体内。

试剂循环并进入炎症部位,在该处底物与炎症特异性酶相互作用。

酶与底物的反应产生生物发光信号。

以固定的时间间隔捕获图像,以监测该信号。

视神经位于较浅的位置,使得眼睛周围的生物发光现象较为明显。相比之下,由于颅骨会吸收发射出的光,来自大脑的信号则较弱。

在图像中,蓝色表示轻度炎症,红色表示重度炎症。

进行活体成像时,在整个成像过程中使小鼠保持在 2% 至 2.5% 异氟烷麻醉状态下。将两只小鼠并排置于仪器中,并使其上脊柱位于中心位置。

接下来,用黑色布料遮盖免疫接种部位。打开图像采集软件并初始化相机,然后拍摄基线图像以评估小鼠位置的正确性。

随后,使用B聚焦模式,将相机与目标距离保持在6.5厘米,以采集所有图像。然后,在填充注射器前,将即用型化学发光试剂配制为40毫克/毫升的浓度。接着,向小鼠腹腔内注射100微升该试剂,并在注射后5、10和15分钟时采集生物发光图像。