使用扫描电子显微镜对小鼠脑脉络丛进行可视化

标本篮中从小鼠大脑中取出脉络丛。

该组织位于脑室内，包含一层上皮细胞，其顶端表面有微绒毛。

组织在固定溶液中孵育以保留其细胞结构。

用缓冲液洗涤以去除多余的固定剂并稳定 pH 值。

组织与与细胞膜脂质结合的四氧化二锇孵育，保持膜稳定性，然后冲洗掉多余的试剂。

使用增加酒精浓度使组织脱水，以防止成像过程中组织变形。

干燥组织，将其固定在碳涂层样品支架上，然后涂上导电铂层。

使用扫描电子显微镜，将电子束聚焦到表面上。铂层耗散电子，防止电荷积聚并最大限度地减少成像伪影。

探测器捕获从表面反向散射的电子，产生显示带有微绒毛的上皮细胞的组织图像。

要进行SEM的样品制备，请将新鲜分离的脉络丛转移到新鲜制备的固定溶液中，并在4摄氏度下孵育过夜。完成后，使用 3 至 5 毫升 0.1 摩尔二甲胂酸钠缓冲液洗涤样品 3 次，每次 5 分钟。

样品后固定在 3 至 5 毫升 2% 四氧化锇中，在 0.1 摩尔二甲胂酸钠缓冲液中 30 分钟。然后用3至5毫升超纯水洗涤样品三次，每次五分钟。接下来，以每个乙醇溶液 15 分钟的一系列逐渐增加的冰冷乙醇浓度对样品进行脱水。使用临界点干燥器正确干燥样品。将样品小心地放置在带有碳贴纸的标本支架上，并使用 SEM 可视化脉络丛样品。