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神经科学
0 次观看 • 2:08 分钟 • June 18th, 2025
取一个含有机型小鼠脑切片和肿瘤细胞的多孔板。这些细胞表达荧光素酶。
取出插入物,在培养基中加入荧光素溶液并充分混匀。将插入物放回孔中。
荧光素进入肿瘤细胞后,被荧光素酶氧化,产生生物发光。
将培养板放入活体成像系统的成像室中,该系统可捕获样品发出的生物发光信号。
锁定腔室以防止外部光线干扰。
调整相机设置,使每张图像仅捕获一个孔。
移动载物台,使孔直接位于相机正下方。
根据发射的生物发光强度优化采集时间。
确定肿瘤的形状,然后开始生物发光成像。
定量分析生物发光信号,以评估脑切片上的肿瘤生长情况。
在无菌操作台内,将5微升浓度为30毫克/毫升的荧光素溶液用移液器加入插入式培养小室下方的培养基中。将带盖的六孔板放入仪器成像室中,置于固定相机下方,并锁紧成像室门。
打开软件并初始化仪器。选择相机设置后,确保每次成像仅显示并捕获一个孔。将待成像的孔置于相机正下方。使用感兴趣区域(ROI)工具,将其调整至与肿瘤的形状和大小相匹配。测量该ROI,并记录总读数,以定量分析切片上每个肿瘤的生物发光信号。
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