通过三维成像技术在脑切片中实时监测基因表达

从含有转染小鼠胚胎皮质脑片的培养皿开始，培养基中添加了荧光素。

皮层区域含有表达绿色荧光蛋白（GFP）以及与荧光素酶报告基因融合的目的基因的神经干细胞。

将培养皿放置到显微镜载物台上，进行荧光和亮度测量。

拍摄GFP荧光的检测图像，聚焦于感兴趣区域。

在神经元分化过程中，干细胞开始表达目的基因，并产生与荧光素酶融合的蛋白质。

荧光素与荧光素酶相互作用，产生生物发光，直接反映分化过程中目的基因的表达情况。

拍摄荧光图像以识别特定活性区域，拍摄生物发光图像以监测动态基因表达，拍摄明场图像以提供形态学信息。

获取这些三维延时图像，以在天然组织环境中可视化神经元分化过程中的基因表达。

为了在脑片培养物中观察荧光素酶报告基因的表达，选择40倍物镜，将样品皿放置在显微镜载物台上。获取荧光的测试图像，并在适当激发光照射下，将成像位置和焦平面设定至目标区域。随后进行连续24小时的延时成像，包括三维生物发光、荧光和明场图像的采集。