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首先切除小鼠脑组织，脑血管中含有血栓或血凝块。
血栓用近红外荧光或 NIRF 探针标记，该探针在血栓成熟期间与纤维蛋白链共价结合。
将脑组织置于近红外成像仪中，将大脑底部或腹侧朝上放置，以对主要脑动脉中的血栓进行成像。
将近红外光照射到脑组织，激发标记血栓中的 NIRF 探针。
激发后，探头发射更长波长的光。
这会导致血栓发出荧光并在黑暗背景下显得明亮，从而最大限度地减少周围组织的干扰。
接下来，倒置脑组织并对大脑的背侧进行成像，以可视化小皮质血管中的血栓。
这确保了脑组织中血栓的完整可视化，具有高对比度。
要通过离体近红外成像观察血栓，请将切除的脑组织放入成像仪中，底部朝上。获得威利斯环动脉中荧光标记的血栓栓塞的图像。然后，定位组织，顶点朝上并成像皮质血栓栓塞。
