一种研究肽自组装的傅里叶变换红外光谱技术

傅里叶变换红外光谱 （FTIR） 有助于研究肽自组装成通过非共价相互作用结合在一起的超分子结构。

首先采集未组装的蛋白质样品——淀粉样蛋白肽的悬浮液，能够形成富含 β 折叠的超分子结构。将样品放入配备ATR晶体的FTIR仪器中。

红外光束以临界角照射到晶体上;光束穿过它并击中晶体和样品之间的界面。折射率高于样品的晶体会导致光束的内反射。

光束的一小部分以倏逝波的形式延伸到样品中——反射点处的驻波。该波与样品的相互作用导致波能量的吸收，导致反射光束衰减，由探测器记录。

根据肽的结构，样品在红外光谱的特定区域吸收。通过信号的傅里叶变换获得的吸收光谱显示出特定波数处的宽峰，这是未组装的蛋白质样品的特征。

育样品，允许自组装，形成富含 β 折叠的淀粉样蛋白纤维。孵育后，记录吸收光谱。

数与前一个宽峰不同的尖峰表示转化为 β 片组装。

要制备自组装溶液，请将 1 毫克冻干肽粉末溶解在 20% 乙腈和 10 毫摩尔 HEPES 的混合物中，放入 1.5 毫升微量离心管中。然后，涡旋组装溶液，让样品在室温下组装。

当肽组装成熟时，将8至10微升组装溶液作为薄膜干燥在衰减的全反射金刚石晶体上，并监测干膜形成时从1,640至1,630反厘米的大而宽的水峰消失。

采集 1,500 至 1,800 反厘米的背景和红外光谱，以 2 反厘米的分辨率平均 50 次扫描，在每次样品扫描之前减去背景扫描。

β-片组装的红外特征应观察为1,625至1,635反厘米之间的尖峰。