Name: 在麻醉大鼠的硅探头录制的大型神经元合唱 (视频) | JoVE Journal
Uploaded: 2011-10-19T13:00:00.000+00:00
Duration: 5 min 45 s
Description: 学习使用硅探针在麻醉大鼠前肢体感皮层进行大规模神经元记录的方法。该技术可同时记录超过一百个神经元的电生理活动，为研究神经群体动态和认知功能提供重要工具。

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本工作由 NSERC 和 AHFMR 资助。作者感谢 Mariam Alaverdashvili 和 Amanda Mauthe-Kaddoura 对手稿提出的修改意见，以及 Hiroe Yamazaki 在手术准备方面的帮助。

1. 手术准备
<ol>
	<li>使用适当类型和剂量的麻醉剂对大鼠进行麻醉。本实验采用乌拉坦（1.5 g/kg，Sigma-Aldrich Co.，St. Luis, MO），将其20 g溶于100 ml磷酸盐缓冲液（PBS）中配制成20%溶液，即动物腹腔注射（IP）给予7.5 ml/kg的乌拉坦溶液。由于乌拉坦的剂量-反应曲线特性，总剂量分为四次给药，每次间隔约30分钟。在前两次注射乌拉坦之前，先使用异氟烷（浓度3-4%，氧气流速2升/分钟）对动物进行麻醉，并在之后维持于2%浓度（氧气流速最高2升/分钟），以防止动物因注射而产生应激反应。在手术过程中，如需要，可额外给予异氟烷（2%浓度，持续2分钟）。</li>
	<li>剃除切口部位（头部背侧）的毛发，以确保毛发不会污染伤口，并保证切口周围有足够的区域可进行消毒处理。</li>
	<li>使用有机碘或氯己定皂液及消毒剂（乙醇）对手术区域进行无菌准备。</li>
	<li>准备硅探针（NeuroNexus Technologies, Ann Arbor, MI）。探针可用70%乙醇消毒，随后用蒸馏水冲洗。如需要，可在探针上涂抹无菌配制的荧光标记物（例如Dye I, Invitrogen Co.），以便后续通过组织学分析确定探针位置。操作时使用细小且极柔软的画笔，轻轻接触硅探针背面进行染色。此操作必须在显微镜下进行，以确保探针不被损坏或弯曲。务必检查确认染料未堵塞任何通道。探针上残留的染料可在后期用酒精清除，再用清水冲洗。</li>
	<li>硅电极使用注意事项：由于尺寸微小，硅探针非常脆弱，即使操作谨慎也极易断裂。因此，建议始终注意潜在风险，包括：(i) 将探针存放于专用的保护盒中；(ii) 操作时避免碰撞或掉落探针；(iii) 确保立体定位仪操纵器固定牢固，防止意外发生；(iv) 记录过程中，周围组织和/或血液可能附着在探针上，因此记录结束后取出探针时也需格外小心。强烈建议使用持续的PBS或生理盐水冲洗；(v) 每次记录后必须清洁探针。清洁时强烈推荐将探针浸入液体酶清洁剂（Boston, Bausch &amp; Lomb）中数分钟，随后用蒸馏水彻底冲洗，并放回专用储存盒中。根据我们的经验，妥善维护的硅探针可保证超过10次实验的良好记录质量。若使用过程中某一通道出现噪声，应在后续分析中排除该通道。我们发现通道间的串扰极小，因此单个噪声通道通常对其他通道信号影响甚微。</li>
</ol>
2. 手术
<ol>
	<li>手术操作前，在眼表涂抹眼膏。</li>
	<li>皮下注射地塞米松 5 mg/ml 以减轻脑部炎症。</li>
	<li>在整个手术过程中，将动物固定在立体定位仪中。</li>
	<li>在切口前，于切口部位皮下注射盐酸利多卡因2%含肾上腺素（2-4 mg/kg，稀释至0.5%溶液），以减少伤口出血风险并实现局部麻醉。</li>
	<li>沿头皮正中线做一个2 cm的切口，并将皮肤向两侧剥离以暴露颅骨表面。</li>
	<li>通过钝性分离清除头皮背侧的筋膜，并使用显微电凝或骨蜡控制出血。</li>
	<li>在颅骨枕骨上钻两个孔，用于安装小螺丝，作为动物接地和参考电极。参考电极螺丝必须与硬脑膜接触。为减少记录过程中的电噪声，建议始终使螺丝保持湿润。为此，可在螺丝周围制作一个小的丙烯酸屏障，或用琼脂覆盖螺丝。</li>
	<li>在对应于目标皮层和/或皮层下区域的坐标处，制作一个直径为1-2 mm的颅骨开孔 5根据需要在开颅（钻孔）过程中使用压缩空气清除骨屑。通过滴加 PBS 防止钻孔导致颅骨过热。如有需要，可进行第二次开颅以插入第二根探针。本视频中展示了同时记录两个皮层区域的信号，因此进行了两次开颅。</li>
	<li>在两个颅骨开窗周围用丙烯酸树脂（例如：Lang Dental Manufacturing, Co., Inc., Wheeting, IL）构建一个小屏障，以保持磷酸盐缓冲液（PBS）覆盖暴露的硬脑膜，防止其干燥。在整个实验过程中持续灌注 PBS。</li>
	<li>打开两个颅骨切口处的硬脑膜。可使用两根针头（30½号）在尖端弯曲成钩状，用于此操作。</li>
	<li>将硅探针的连接器固定到立体定位操纵器上。连接器应固定在一根立柱上，以确保探针的探臂与立体定位操纵器完全平行。这对于维持稳定的记录并避免探针损坏至关重要。</li>
	<li>将参考螺丝连接到硅探针的参考引脚。为降低电噪声，接地螺丝必须连接至：i）探针插头的接地端；ii）记录设备的机箱接地端；iii）立体定位仪框架。</li>
	<li>将硅探针的尖端轻轻接触软脑膜。</li>
	<li>缓慢插入硅探针，并确保硅探针的探针臂（图 1 &amp; 2）可无阻力或弯曲地插入脑组织。</li>
	<li>小心地降低探针，直至到达目标记录区域。如有需要，可在颅骨开孔处滴加 PBS 液滴，以防止组织干燥。</li>
	<li>由于乌拉坦麻醉仅适用于终末性操作，动物应通过腹腔注射至少200 mg/kg的戊巴比妥钠（稀释浓度不超过60 mg/ml）实施安乐死，随后进行断头处理。</li>
</ol>
3. 代表性结果：
局部场电位和放电活动的代表性记录如图3A所示。在进行峰电位分选（区分来自不同神经元的峰电位；图3B,C；6, 7, 8）后，硅探针记录能够用于研究参与以下多种过程的神经元群体活动：记忆与决策9、可塑性10、刺激编码11、自发性活动12以及多种药物的作用13。
<img alt="使用硅探针的神经记录装置；示意图显示神经通路、探针设计及放置位置。" src="/files/ftp_upload/3282/3282fig1.jpg" data-altupdatedat="1788235205000" data-alt="图1"> 
图1. A. 单叉臂硅探针示例叠加在重建神经元的拼合图像上（承蒙S. Sakata提供14）。B. 每个8个叉臂均具有四电极构型的探针示例。C. 大鼠颅骨示意图。绿色方框表示右侧和左侧体感皮层开颅范围。
<img alt="神经科学实验；小鼠脑部手术，电极监测神经元活动，实验装置。" src="/files/ftp_upload/3282/3282fig2.jpg" data-altupdatedat="1788235205000" data-alt="图 2"> 
图 2. 将硅探针插入前额叶皮层和海马体的实验示例。颅骨开窗处覆盖有 PBS 液滴，以防止暴露的脑组织干燥。位于小脑上方的两颗螺丝将分别连接至接地端和参考电极。
<img alt="多通道瞬态吸收光谱分析；显示能量相关性和时间演化的图谱。" src="/files/ftp_upload/3282/3282fig3.jpg" data-altupdatedat="1788235205000" data-alt="图3"> 
图3. A. 图像显示了一个四电极记录的代表性局部场电位（LFP）500毫秒的电生理记录（注：纵坐标向上表示负电压）。插图显示了一个动作电位的波形。B. 来自一个四电极在特征空间中神经元簇的二维视图。每个簇代表来自单个神经元单元（神经元）的动作电位。C. 来自单个四电极四个记录位点的代表性神经元单元（以颜色编码）的平均动作电位波形。D. 记录到的动作电位随时间变化的波形能量（与幅度相关）。注意每个单元的能量值相对恒定；这表明在显示时间段内记录稳定。

<ol><li>Buzsaki, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Large-scale+recording+of+neuronal+ensembles%5BTitle%5D)+AND+%22Nat.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Large-scale recording of neuronal ensembles.</a> Nat. Neurosci. 7, 446-451 (2004).</li>
<li>Kipke, D. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Advanced+neurotechnologies+for+chronic+neural+interfaces%3A+new+horizons+and+clinical+opportunities%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Advanced neurotechnologies for chronic neural interfaces: new horizons and clinical opportunities.</a> J. Neurosci. 28, 11830-11838 (2008).</li>
<li>Csicsvari, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Massively+parallel+recording+of+unit+and+local+field+potentials+with+silicon-based+electrodes%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurophysiol%22%5BJournal%5D)">Massively parallel recording of unit and local field potentials with silicon-based electrodes.</a> J. Neurophysiol. 90, 1314-1323 (2003).</li>
<li>Bartho, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Characterization+of+neocortical+principal+cells+and+interneurons+by+network+interactions+and+extracellular+features%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurophysiol%22%5BJournal%5D)">Characterization of neocortical principal cells and interneurons by network interactions and extracellular features.</a> J. Neurophysiol. 92, 600-608 (2004).</li>
<li>Paxinos, G., Watson, C. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aPaxinos%2C+G+%22The+rat+brain%3A+in+stereotaxic+coordinates%22">The rat brain: in stereotaxic coordinates</a>. , 4th Edition, Academic Press. San Diego. (1998).</li>
<li>Lewicki, M. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+review+of+methods+for+spike+sorting%3A+the+detection+and+classification+of+neural+action+potentials%5BTitle%5D)+AND+%22Network%22%5BJournal%5D)">A review of methods for spike sorting: the detection and classification of neural action potentials.</a> Network. 9, R53-R78 (1998).</li>
<li>Harris, K. D., Henze, D. A., Csicsvari, J., Hirase, H., Buzsaki, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Accuracy+of+tetrode+spike+separation+as+determined+by+simultaneous+intracellular+and+extracellular+measurements%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurophysiol%22%5BJournal%5D)">Accuracy of tetrode spike separation as determined by simultaneous intracellular and extracellular measurements.</a> J. Neurophysiol. 84, 401-414 (2000).</li>
<li>Luczak, A., Narayanan, N. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Spectral+representation--analyzing+single-unit+activity+in+extracellularly+recorded+neuronal+data+without+spike+sorting%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurosci.+Methods%22%5BJournal%5D)">Spectral representation--analyzing single-unit activity in extracellularly recorded neuronal data without spike sorting.</a> J. Neurosci. Methods. 144, 53-61 (2005).</li>
<li>Pastalkova, E., Itskov, V., Amarasingham, A., Buzsaki, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Internally+generated+cell+assembly+sequences+in+the+rat+hippocampus%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Internally generated cell assembly sequences in the rat hippocampus.</a> Science. 321, 1322-1327 (2008).</li>
<li>Fujisawa, S., Amarasingham, A., Harrison, M. T., Buzsaki, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Behavior-dependent+short-term+assembly+dynamics+in+the+medial+prefrontal+cortex%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Behavior-dependent short-term assembly dynamics in the medial prefrontal cortex.</a> Nat Neurosci. 11, 823-833 (2008).</li>
<li>Harris, K. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((How+do+neurons+work+together%3F+Lessons+from+auditory+cortex%5BTitle%5D)+AND+%22Hear.+Res%22%5BJournal%5D)">How do neurons work together? Lessons from auditory cortex.</a> Hear. Res. 271, 37-53 (2011).</li>
<li>Luczak, A., Bartho, P., Marguet, S. L., Buzsaki, G., Harris, K. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sequential+structure+of+neocortical+spontaneous+activity+in+vivo%5BTitle%5D)+AND+%22Proc.+Natl.+Acad.+Sci.+U.S.A%22%5BJournal%5D)">Sequential structure of neocortical spontaneous activity in vivo.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 104, 347-352 (2007).</li>
<li>Robbe, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cannabinoids+reveal+importance+of+spike+timing+coordination+in+hippocampal+function%5BTitle%5D)+AND+%22Nat.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Cannabinoids reveal importance of spike timing coordination in hippocampal function.</a> Nat. Neurosci. 9, 1526-1533 (2006).</li>
<li>Sakata, S., Harris, K. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Laminar+structure+of+spontaneous+and+sensory-evoked+population+activity+in+auditory+cortex%5BTitle%5D)+AND+%22Neuron%22%5BJournal%5D)">Laminar structure of spontaneous and sensory-evoked population activity in auditory cortex.</a> Neuron. 64, 404-418 (2009).</li>
</ol>

无利益冲突声明。

本文演示了如何使用硅电极阵列同时记录多个皮层区域中的大量神经元（&gt;100）的活动。为了确保手术和记录的成功，应考虑以下问题：

<ol>
<li>探针插入目标区域：将探针插入脑组织时，可能会造成显著的组织损伤，从而导致记录到的神经元信号质量下降。为避免此问题，我们建议采取以下措施：（i）以一定角度插入探针（推荐使用10度角），这样可减少被记录神经元树突的损伤；（ii）探针进入脑组织后，初始阶段可较快地下降（约每10–30秒下降50至100微米），直至接近目标记录区域。当探针距离目标区域约200微米时，应减慢调整速度（约每2至3分钟下降10微米）。</li>

<li>记录信号的稳定：当探针到达指定区域并检测到较明显的神经活动（多数通道出现清晰的尖峰信号）时，建议在开始正式记录前等待约30分钟。这有助于脑组织在探针插入后实现机械性稳定，从而获得更稳定的记录信号。</li>

<li>脑组织搏动：有时可观察到脑组织搏动，这会显著降低记录质量。通过制作一个较小的颅骨开窗（仅足够容纳探针）可减少记录区域的脑搏动。如有必要，可穿刺小脑延髓池，以降低脑脊液压力，减轻脑组织肿胀和搏动。</li>

<li>硅探针构型：硅探针具有多种形状和记录位点排布方式。例如，其在探针臂数量、臂的长度与厚度，以及记录位点的排列方式（如四极构型与线性构型）上可能存在差异（参见：www.neuronexustech.com）。具体实验中探针构型的选择取决于所要解决的科学问题。例如，若目标是记录某一特定皮层内多个位置的神经元群体活动（如本记录所示），最佳选择是使用具有八个探针臂且为四极构型的探针。这种构型可在每个四极位点记录多个单细胞信号，并在1.4毫米范围内实现八个位置的采样。另一种情况，若研究目标是探究神经活动在皮层各层之间的传播，则应选择具有单个探针臂且记录位点沿臂均匀分布的探针，以便同时记录多个皮层层次的活动14。</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>乌拉坦</td><td>Sigma-Aldrich</td><td></td><td></td></tr><tr><td>磷酸盐缓冲液（PBS）</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>异氟烷</td><td>Benson Medical Instruments</td><td>02241315</td><td></td></tr><tr><td>硅探针 </td><td>NeuroNexus Technologies</td><td>4 X 2 - Tet - 5 mm - 150 - 200 &amp;#8211; 312</td><td></td></tr><tr><td>染料 I（DiIC&lt;sub&gt;18&lt;/sub&gt;(3))</td><td>Invitrogen</td><td>617830</td><td></td></tr><tr><td>地塞米松 5</td><td>V&amp;eacute;辅酶Q10氢醌形式</td><td>0A0640B</td><td></td></tr><tr><td>眼膏</td><td>V&amp;eacute;辅酶Q10氢醌形式</td><td>005165414</td><td></td></tr><tr><td>盐酸利多卡因 2% 加肾上腺素 </td><td>Bimeda-MTC</td><td>00141984</td><td></td></tr><tr><td>立体定位仪</td><td>Kopf Instruments</td><td>1430-B</td><td></td></tr><tr><td>电极操作器与固定器</td><td>Kopf Instruments</td><td>960</td><td></td></tr><tr><td>大鼠耳杆</td><td>Kopf Instruments</td><td>1955</td><td></td></tr><tr><td>大鼠适配器</td><td>Kopf Instruments</td><td>920</td><td></td></tr><tr><td>麻醉面罩</td><td>Kopf Instruments</td><td>906</td><td></td></tr><tr><td>手术刀</td><td>Roboz外科器械公司</td><td>RS-9843</td><td></td></tr><tr><td>手术刀片</td><td>帕拉贡</td><td>0086</td><td></td></tr><tr><td>显微解剖剪 </td><td>Roboz外科器械公司</td><td>RS-5910</td><td></td></tr><tr><td>螺钉</td><td>高德·帕斯滕斯有限公司</td><td>14084701</td><td></td></tr><tr><td>止血钳</td><td>Roboz外科器械公司</td><td>RS-7130 RS-7211</td><td></td></tr><tr><td>30&amp;frac12; 规格针头</td><td>BD 生物科学</td><td>305115</td><td></td></tr><tr><td>微马达控制</td><td>Foredom</td><td>HP4-917</td><td></td></tr><tr><td>解剖镊</td><td>Roboz外科器械公司</td><td>RS-5237</td><td></td></tr><tr><td>骨蜡</td><td>Lukens</td><td>M263500</td><td></td></tr><tr><td>压缩空气瓶</td><td>Falcon BD</td><td>50-10521C</td><td></td></tr><tr><td>酶清洁剂 </td><td>博士伦</td><td>BAUSCH497628</td><td></td></tr><tr><td>蒸馏水 </td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>牙科丙烯酸粉末</td><td>朗氏牙科</td><td>1220</td><td></td></tr><tr><td>牙科丙烯酸液体</td><td>朗氏牙科</td><td>1404</td><td></td></tr><tr><td>Digital Lynx SX 系统</td><td>Neuralynx Inc.</td><td>4SX-Z400</td><td></td></tr><tr><td>Cheeta 软件</td><td>Neuralynx 公司</td><td></td><td></td></tr><tr><td>鳄鱼夹电缆 </td><td></td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

使用硅探针在麻醉大鼠中记录大规模神经元集群活动

Recording Large-scale Neuronal Ensembles with Silicon Probes in the Anesthetized Rat

大规模神经元群体的电生理记录为研究大脑如何通过神经元的放电活动协调多种多样的行为提供了机会。同时监测多个局部神经回路中大量神经元放电活动的最有效方法之一是使用硅电极阵列1-3。
动作电位在细胞体附近产生显著的跨膜电压变化。这些输出信号可通过将导体放置在神经元附近进行测量。如果在电极尖端附近存在多个活跃（放电）的神经元，电极将记录到所有这些神经元的复合信号，其中单个神经元的贡献由其“电学距离”决定。由于具有大量记录位点（+64）和小体积，硅探针是监测多个神经元的理想记录电极。此外，多个记录位点可沿毫米级距离分布，从而实现对不同皮层层或多个皮层柱中神经元活动的同时记录（图1）。重要的是，记录位点在几何结构上的精确定位还可用于确定分离出的单个神经元之间的空间关系4。本文中，我们描述了在麻醉大鼠中，使用硅探针同时对左右前肢体感皮层进行急性、大规模神经元记录的方法（图2）。

将介绍在麻醉大鼠中使用硅探针进行神经元活动的细胞外记录技术。该技术能够同时从超过100个神经元中获取多个脑区的信息，以单细胞分辨率提供关于多个局部神经回路中神经元集群动态的信息。

大规模神经元群体的电生理记录为研究大脑如何协调多种多样的……提供了机会

本实验的总体目标是描述一种在麻醉大鼠中同时记录左侧和右侧前肢躯体感觉皮层急性大规模神经元活动的方法，使用硅探针实现。首先通过乌拉坦麻醉动物，随后将大鼠固定于立体定位仪上，在颅骨表面做2至3厘米的切口。第二步是放置接地螺钉和参考螺钉。然后在体感皮层上方进行两次开颅手术，并去除硬脑膜。最后一步是将硅探针小心地插入大脑，并缓慢下降至目标区域。该操作可实现对数十个神经元的局部场电位和峰电活动的记录。该技术的主要优势在于，硅探针能够从大量记录位点进行记录。此外，多个记录位点可分布在毫米级距离上，从而能够同时跨多个皮层柱或单个皮层柱内的多个层次进行记录。重要的是，记录位点的几何学精确定位使得研究神经元群体之间的空间关系成为可能。该方法有助于解答神经科学领域中的关键问题，例如神经元群体活动如何参与记忆可塑性、刺激编码和决策过程，以及不同药物如何影响这些神经相互作用。开始实验时，使用浓度为3%至4%的异氟烷对大鼠进行麻醉，并维持在2%以防止动物因注射而产生应激反应。随后，以每千克体重7.5毫升的剂量，腹腔注射20%稀释的氨基甲酸乙酯溶液，并将该注射分为四次进行，每次间隔约30分钟。接下来，在显微镜下用蒸馏水清洁硅胶探针。使用荧光标记物对探针进行标记，以便在组织学分析中确定探针的位置。此操作必须始终在显微镜下进行，以确保探针未被损坏或弯曲。随后，剃除切口部位的毛发。然后在两只眼睛上涂抹眼膏。皮下注射5毫克/毫升的地塞米松，以减轻脑部炎症。此时，将动物固定在立体定位仪框架中。接下来，使用氯己定皂液和乙醇对手术区域进行无菌处理，然后在切口部位皮下注射利多卡因和肾上腺素，以实现局部麻醉并降低出血风险。随后，沿头皮正中线做一道2厘米长的切口，并剥离皮肤。为了暴露颅骨，通过钝性分离将背部头皮与筋膜分离，并使用骨蜡控制出血。接着，在颅骨的枕骨上钻两个孔。将小螺丝固定于孔中，用于安装接地电极和参考电极。参考螺钉必须与硬脑膜接触。随后，在对应于前肢的坐标位置制作两个直径为一至二毫米的颅骨开孔，即体感皮层区域。在开颅过程中，根据需要使用压缩空气清除骨粉，以防止钻孔导致颅骨升温。滴加生理盐水。然后在两个开颅部位周围构建一圈小型丙烯酸树脂屏障，以使磷酸盐缓冲液（PBS）保留在暴露的硬脑膜表面，并防止其干燥。在整个实验过程中持续应用 PBS。接着，使用两根30½号针头（针尖弯曲）去除两个颅骨开窗处的硬脑膜。此时，将硅探针的尖端轻轻接触软脑膜。然后缓慢插入硅探针，确保探针的柄部能够无阻力或弯曲地进入脑组织。小心降低探针，直至到达目标记录区域。如有需要，可在颅骨开孔处滴加 PBS 液滴，以防止组织干燥。此处展示的是来自一个四极记录电极（tetro）的局部场电位在 500 毫秒时间内的代表性电生理记录。插图中显示了一个动作电位波形的示例。以下是来自一个四极记录电极（tetro）所获得的神经元簇二维视图的示例。每个簇代表来自单个神经元的峰电位。此处展示了来自单个四极记录电极四个通道中各代表性神经元单位的平均峰电位波形。该图绘制了记录到的峰电位随时间变化的波形能量。请注意，每个单元相对恒定的能量值表明在显示的时间段内记录稳定。观看本视频后，您应能够同时从上百个神经元中对多个脑区进行硅探针记录。这需要完成以下步骤：麻醉动物，放置参考电极和接地螺钉，钻颅骨窗，去除硬脑膜，最后将探针插入目标记录区域。

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本视频展示了在多个位点进行脑电活动电生理记录前，制备麻醉大鼠的详细步骤。通过解剖头皮暴露颅骨，并在精确位置钻孔以安装和固定电极。随后将钨丝微电极插入目标位置，以记录数据。...

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关键词：紧密细胞外记录，单神经元记录，皮层下脑结构，清醒动物，头部固定，大鼠

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