评估大鼠蔗糖渴求育成的一个通用方法

该实验的总体目标是评估大鼠在短期或长期强制戒除蔗糖自我给药后对蔗糖的渴望。这是通过首先允许大鼠在每天 10 次自我给药中自我施用蔗糖来实现的。然后将大鼠置于强制禁欲期，无需蔗糖自我给药，只需将它们放在家笼中 1 天或 30 天即可。

该程序的最后一步是将大鼠返回到自我给药环境，并允许它们对以前与蔗糖明确相关的线索做出反应，自我给药，但不是蔗糖本身。最终，结果显示了对蔗糖配对线索的反应 Vigo 如何根据强制禁欲的长度而变化。正如我们之前报道的那样，对蔗糖的渴望会增加或孵育超过一个月强制戒除蔗糖的情况。

可以使用该程序进行自我给药实验，以研究渴望孵化的行为和神经生物学底物。与现有方法相比，这种技术的主要优点是最后一次自我管理会话之后的时间长度可能会有所不同。这种方法可以帮助回答成瘾研究领域的关键问题，特别是强制戒酒时间的长短如何影响渴望。

使用这种技术的影响延伸到复发行为的治疗。特别是，因为绝大多数人在长时间戒断后复发。虽然这种方法可以提供对糖的渴望的洞察力。

它也可以应用于其他奖励，例如滥用药物。这项研究使用研究开始时三个月大的雄性长埃文斯大鼠。将大鼠以 12 小时的反向昼夜循环单独饲养，在开始程序之前，用颗粒食物和水随意提供，然后对所有实验和对照动物进行称重。

在研究期间，应在每周一、周三和周五对动物进行称重。最后，在开始蔗糖渴望研究前大约 20 小时开始禁水。这将鼓励蔗糖在训练的第一天自我给药。

所有培训和测试都在 900 到 1300 小时之间进行，并且队列总是每天在同一时间在测试室进行培训和测试。作调节室封闭在带有换气扇的消音柜中。本研究中使用的腔室尺寸为 30 x 20 x 24 厘米，包含两个杠杆、一个固定杠杆和一个可伸缩杠杆。

两个杠杆都位于距离网格地板 10 厘米的位置。此外，这些腔室还包含一个音调发生器、可伸缩杆上方的白色刺激灯和对面墙上的红色室内灯。为了评估运动活动，这些腔室在这些腔室中配备了红外光束，前光束距离侧壁 10.5 厘米，侧光束距离侧壁各 6 厘米。

每根横梁高出不锈钢吧台地板 4.5 厘米。将新鲜的 10% 蔗糖溶液添加到位于每个腔室顶部的输液泵中。对相关软件进行编程以激活泵，将 0.2 毫升 10% 蔗糖溶液输送到控制杆右侧的容器中。

此外，使用相关的软件对腔室进行编程，以便按下可伸缩或主动杠杆也会激活由音调和白光组成的复合刺激。复合刺激应持续 5 秒，然后是第 42 次超时，在此期间将记录按下活动杆的时间，但没有编程结果。固定或非活动杠杆被编程为在按下时没有影响，而只记录按下次数。

从本质上讲，该软件应记录每个控制杆上的所有按压以及每次训练期间红外光束断裂的次数。在训练的第一天，将大鼠放入作调节室中总共两个小时。在此期间，允许大鼠自由移动，并可以按下可伸缩杆以输送 10% 蔗糖溶液，或者大鼠可以按下不活跃的固定杆。

所有反应和运动测量都记录在两个分钟的箱中作为时间过程，但通常报告为每个会话的总数。两个小时过后，将老鼠带走并将其放回家笼。确保彻底清洁作调节室，以去除任何残留物、口腔工厂提示，这些可能会干扰后续的训练课程。

在强制禁欲期间，大鼠留在家笼中，在 libitum 提供颗粒食物和水。强制禁欲期可以根据需要持续很长时间。渴望研究潜伏期的典型时间范围是 1 到 30 天。

此外，其他待测参数，如蔗糖、饱腹感或环境富集的效果，可以在对照条件下施用。在此期间，这里介绍了两种测试范例。其中第一个说明了没有线索的灭绝。

首先设置作调节室以复制训练条件，不同之处在于音调和白光不会因按下主动杠杆而被激活。对暗室进行编程，使其运行六次一小时的消光会议，每次间隔 5 分钟，其中关闭室内灯并缩回主动杠杆，不间断运行。然后在强制禁欲期完成后，将大鼠放入作调节室，让大鼠在六次一小时的消退过程中对主动杠杆做出反应。

如果在第六次消退过程中主动杠杆反应已减少到每小时 20 次以下，则表明行为消退。如果尚未发生灭绝，则允许大鼠进行第七次灭绝。再延迟 5 分钟后的下一个会话是一小时的测试会话，然后大鼠可以按下最初与第二次测试程序在提示期间每次交付蔗糖配对的音调加光提示，作性调节室设置为复制训练条件。

除了在按下活性杠杆时不输送蔗糖溶液外，将待测大鼠置于作调节室中两个小时。非活动杠杆按压与光束断裂数据相结合，也可以用作非特异性运动激活的量度。由于运动与动机的变化可能会使 Q 反应行为的解释复杂化。

该图说明了从一组 77 只正常大鼠获得的典型数据，这些大鼠被训练自我施用蔗糖。根据该协议中概述的训练范式，可以看出大鼠在训练过程中对主动杠杆有选择性地反应。此处显示了从测试会话中获得的数据。

可以看到老鼠在灭绝中做出反应，配对队列可用灭绝带有线索。同样，大鼠在测试过程中对主动杠杆选择性反应，非主动反应和运动活动显示出一些潜伏期，尽管对主动杠杆反应的影响最强，但组人数从每组 11 到 12 个不等，并且在第 1 天和第 30 天组之间观察到显着差异，P 值小于 0.05。该图显示了蔗糖饱腹感对强制禁欲 1 天或 30 天后蔗糖 Q 反应性的影响，一些大鼠在测试前 17 小时内在家用笼子中接受了 10% 蔗糖瓶，在没有提示的情况下使用灭绝。

程序，饱腹感减少了灭绝，在任一强制禁欲期后没有反应的线索，但在仅强制戒断一天的大鼠中，仅对蔗糖 Q 的反应降低，组大小为每组 8 至 9。星号表示与第一天组存在显著差异，叉号表示与 P 小于 0.05 的对照组存在显著差异。这些结果表明，一个月的环境富集降低了大鼠的蔗糖 Q 反应性。

在强制禁欲期间，对照大鼠留在单独的住房中，而丰富的组被转移到大笼子中，笼子里有几种玩具，包括 PVC 管。这些大鼠还在每周一、周三和周五获得新奇玩具。本研究中的大鼠使用无 Q'S 灭绝程序进行测试。

环境富集减少了孵育灭绝，而 Q 没有反应，并且对单独蔗糖 Q 行为的反应达到仅强制禁欲一天后发现的水平，每组由 8 只大鼠组成。星号表示与第一天组存在显著差异，叉号表示与对照组存在显著差异，其中 P 等于小于 0.05。在这里，大鼠在测试当天用一定剂量的多巴胺 D 一种拮抗剂 s CH 2 3 3 9 0 预处理，并使用 QS 消光程序进行测试。

可以看出，强制禁欲 1 天后，全身性 s CH 2 3 3 9 0 更有效地减少蔗糖寻找，每组由 8 至 12 只大鼠组成。星号表示与第一天组存在显著差异。叉号表示与 P 等于小于 0.05 的对照组存在显著差异。

在尝试此过程时，重要的是要记住根据他们的训练行为来平衡分配给强制戒断条件的组。按照这个程序，可以执行其他方法，如药物自我给药，以回答其他问题，如渴望效应孵化的普遍性 发展后。这项技术为成瘾领域的研究人员提供了一种探索大鼠渴望依赖变化的神经基质的方法。

看完这个视频，你应该对如何进行一项测量大鼠戒断依赖性蔗糖、渴望的研究有一个很好的了解，评估他的大鼠对以前与蔗糖相关的 Q 的反应，自我给药。