Name: 寄生蜂简介果蝇和Antiparasite的免疫反应的 (视频) | JoVE Journal
Uploaded: 2012-05-07T12:00:00.000+00:00
Duration: 13 min 4 s
Description: 了解寄生蜂在果蝇宿主上的培养方法，并学习解剖淋巴腺和脂肪体以分析免疫组织。该技术利用免疫荧光显微镜观察基因表达变化，为研究昆虫感染与免疫机制提供重要模型。

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我们感谢 Todd Schlenke 教授提供 Trichopria drosophilae，Tony Ip 教授提供转基因果蝇品系，以及 Carl Hashimoto 教授提供抗 Spätzle 抗体。感谢实验室现任和往届成员对本展示内容所做出的贡献。本研究工作得到以下基金资助：美国国立卫生研究院（NIH）（S06 GM08168、RISE 41399-009 和 G12-RR03060）、美国农业部（USDA NRI/USDA CSREES 2006-03817 和 2009-35302-05277）以及 PSC-CUNY 项目。

<ol><li>Schlenke, T. A., Morales, J., Govind, S., Clark, A. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Contrasting+infection+strategies+in+generalist+and+specialist+wasp+parasitoids+of+Drosophila+melanogaster%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+Pathog%22%5BJournal%5D)">Contrasting infection strategies in generalist and specialist wasp parasitoids of Drosophila melanogaster.</a> PLoS Pathog. 3, 1486-1501 (2007).</li>
<li>Chiu, H., Morales, J., Govind, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Identification+and+immuno-electron+microscopy+localization+of+p40%2C+a+protein+component+of+immunosuppressive+virus-like+particles+from+Leptopilina+heterotoma%2C+a+virulent+parasitoid+wasp+of+Drosophila%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Gen.+Virol%22%5BJournal%5D)">Identification and immuno-electron microscopy localization of p40, a protein component of immunosuppressive virus-like particles from Leptopilina heterotoma, a virulent parasitoid wasp of Drosophila.</a> J. Gen. Virol. 87, 461-470 (2006).</li>
<li>Gueguen, G., Rajwani, R., Paddibhatla, I., Morales, J., Govind, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((VLPs+of+Leptopilina+boulardi+share+biogenesis+and+overall+stellate+morphology+with+VLPs+of+the+heterotoma+clade%5BTitle%5D)+AND+%22Virus+Res%22%5BJournal%5D)">VLPs of Leptopilina boulardi share biogenesis and overall stellate morphology with VLPs of the heterotoma clade.</a> Virus Res. 160, 159-165 (2011).</li>
<li>Paddibhatla, I., Lee, M. J., Kalamarz, M. E., Ferrarese, R., Govind, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Role+for+sumoylation+in+systemic+inflammation+and+immune+homeostasis+in+Drosophila+larvae%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+Pathog%22%5BJournal%5D)">Role for sumoylation in systemic inflammation and immune homeostasis in Drosophila larvae.</a> PLoS Pathog. 6, e1001234(2010).</li>
<li>Sorrentino, R. P., Carton, Y., Govind, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cellular+immune+response+to+parasite+infection+in+the+Drosophila+lymph+gland+is+developmentally+regulated%5BTitle%5D)+AND+%22Dev.+Biol%22%5BJournal%5D)">Cellular immune response to parasite infection in the Drosophila lymph gland is developmentally regulated.</a> Dev. Biol. , 243-265 (2002).</li>
<li>Sorrentino, R. P., Melk, J. P., Govind, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genetic+analysis+of+contributions+of+dorsal+group+and+JAK-Stat92E+pathway+genes+to+larval+hemocyte+concentration+and+the+egg+encapsulation+response+in+Drosophila%5BTitle%5D)+AND+%22Genetics%22%5BJournal%5D)">Genetic analysis of contributions of dorsal group and JAK-Stat92E pathway genes to larval hemocyte concentration and the egg encapsulation response in Drosophila.</a> Genetics. 166, 1343-1356 (2004).</li>
<li>Jung, S. H., Evans, C. J., Uemura, C., Banerjee, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Drosophila+lymph+gland+as+a+developmental+model+of+hematopoiesis%5BTitle%5D)+AND+%22Development%22%5BJournal%5D)">The Drosophila lymph gland as a developmental model of hematopoiesis.</a> Development. 132, 2521-2533 (2005).</li>
<li>Krzemien, J., Crozatier, M., Vincent, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ontogeny+of+the+Drosophila+larval+hematopoietic+organ%2C+hemocyte+homeostasis+and+the+dedicated+cellular+immune+response+to+parasitism%5BTitle%5D)+AND+%22Int.+J.+Dev.+Biol%22%5BJournal%5D)">Ontogeny of the Drosophila larval hematopoietic organ, hemocyte homeostasis and the dedicated cellular immune response to parasitism.</a> Int. J. Dev. Biol. 54, 1117-1125 (2010).</li>
<li>Martinez-Agosto, J. A., Mikkola, H. K., Hartenstein, V., Banerjee, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+hematopoietic+stem+cell+and+its+niche%3A+a+comparative+view%5BTitle%5D)+AND+%22Genes+Dev%22%5BJournal%5D)">The hematopoietic stem cell and its niche: a comparative view.</a> Genes Dev. 21, 3044-3060 (2007).</li>
<li>Lemaitre, B., Hoffmann, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+host+defense+of+Drosophila+melanogaster%5BTitle%5D)+AND+%22Annu.+Rev.+Immunol%22%5BJournal%5D)">The host defense of Drosophila melanogaster.</a> Annu. Rev. Immunol. 25, 697-743 (2007).</li>
<li>Schlegel, A., Stainier, D. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lessons+from+%22lower%22+organisms%3A+what+worms%2C+flies%2C+and+zebrafish+can+teach+us+about+human+energy+metabolism%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+Genet%22%5BJournal%5D)">Lessons from "lower" organisms: what worms, flies, and zebrafish can teach us about human energy metabolism.</a> PLoS Genet. 3, e199(2007).</li>
<li>Ferrandon, D., Jung, A. C., Criqui, M., Lemaitre, B., Uttenweiler-Joseph, S., Michaut, L., Reichhart, J., Hoffmann, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+drosomycin-GFP+reporter+transgene+reveals+a+local+immune+response+in+Drosophila+that+is+not+dependent+on+the+Toll+pathway%5BTitle%5D)+AND+%22EMBO+J%22%5BJournal%5D)">A drosomycin-GFP reporter transgene reveals a local immune response in Drosophila that is not dependent on the Toll pathway.</a> EMBO J. 17, 1217-1227 (1998).</li>
<li>Bruckner, K., Kockel, L., Duchek, P., Luque, C. M., Rorth, P., Perrimon, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+PDGF%2FVEGF+receptor+controls+blood+cell+survival+in+Drosophila%5BTitle%5D)+AND+%22Dev.+Cell%22%5BJournal%5D)">The PDGF/VEGF receptor controls blood cell survival in Drosophila.</a> Dev. Cell. 7, 73-84 (2004).</li>
<li>Tokusumi, T., Shoue, D. A., Tokusumi, Y., Stoller, J. R., Schulz, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((New+hemocyte-specific+enhancer-reporter+transgenes+for+the+analysis+of+hematopoiesis+in+Drosophila%5BTitle%5D)+AND+%22Genesis%22%5BJournal%5D)">New hemocyte-specific enhancer-reporter transgenes for the analysis of hematopoiesis in Drosophila.</a> Genesis. 47, 771-774 (2009).</li>
<li>Tokusumi, T., Sorrentino, R. P., Russell, M., Ferrarese, R., Govind, S., Schulz, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Characterization+of+a+lamellocyte+transcriptional+enhancer+located+within+the+misshapen+gene+of+Drosophila+melanogaster%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Characterization of a lamellocyte transcriptional enhancer located within the misshapen gene of Drosophila melanogaster.</a> PLoS One. 4, e6429(2009).</li>
<li>Morales, J., Chiu, H., Oo, T., Plaza, R., Hoskins, S., Govind, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Biogenesis%2C+structure%2C+and+immune-suppressive+effects+of+virus-like+particles+of+a+Drosophila+parasitoid%2C+Leptopilina+victoriae%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Insect+Physiol%22%5BJournal%5D)">Biogenesis, structure, and immune-suppressive effects of virus-like particles of a Drosophila parasitoid, Leptopilina victoriae.</a> J. Insect Physiol. 51, 181-195 (2005).</li>
<li>Bettencourt, R., Asha, H., Dearolf, C., Ip, Y. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hemolymph-dependent+and+-independent+responses+in+Drosophila+immune+tissue%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Cell+Biochem%22%5BJournal%5D)">Hemolymph-dependent and -independent responses in Drosophila immune tissue.</a> J. Cell Biochem. 92, 849-863 (2004).</li>
<li>Melk, J. P., Govind, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Developmental+analysis+of+Ganaspis+xanthopoda%2C+a+larval+parasitoid+of+Drosophila+melanogaster%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Exp.+Biol%22%5BJournal%5D)">Developmental analysis of Ganaspis xanthopoda, a larval parasitoid of Drosophila melanogaster.</a> J. Exp. Biol. 202, 1885-1896 (1999).</li>
</ol>

未声明任何利益冲突。

寄生蜂的研究兴趣 黑腹果蝇 随着解码全基因组的分子技术变得高效且经济实惠，相关研究正在迅速发展。然而，相较于其宿主已被深入研究的程度，关于寄生蜂生物学的许多引人入胜的方面仍不甚清楚，包括宿主范围、免疫抑制、重寄生以及行为等方面的问题。本演示的重点是展示感染对果蝇免疫组织的影响。此处演示的解剖技术可用于在RNA水平上分析基因表达原位 杂交），或用于提取核酸以进行微阵列或PCR分析，或用于蛋白质的Western印迹分析。大量果蝇品系可从保种中心及各个研究实验室获得，可用于操控和标记免疫细胞。果蝇品系的选择取决于具体的实验问题。这些解剖技术也可用于其他生物免疫组织的分析 果蝇 物种

<table><tbody><tr><td>酵母</td><td>Fisher Scientific</td><td>S80245-3</td><td>活性干酵母</td></tr><tr><td>果蝇饲料 </td><td>自制</td><td>玉米粉，糖</td><td>标准</td></tr><tr><td>蜂蜜</td><td>荷兰金</td><td>从储存处</td><td>三叶草</td></tr><tr><td>小瓶</td><td>Fisher Scientific</td><td>AS514</td><td></td></tr><tr><td>棉塞/泡沫塞</td><td>Fisher Scientific</td><td>14-127-40A</td><td></td></tr><tr><td>刮勺</td><td>Fisher Scientific</td><td>21-401-15</td><td></td></tr><tr><td>Pyrex 解剖皿</td><td>Fisher Scientific</td><td>50-930-382</td><td>9孔</td></tr><tr><td>预清洁的显微镜载玻片 </td><td>Fisher Scientific</td><td>7101</td><td>25.4 mm × 76.2 mm</td></tr><tr><td>玻璃盖玻片</td><td>珍珠</td><td>D12544</td><td>22 x 50</td></tr><tr><td>玻璃盖玻片</td><td>珍珠</td><td>G12544</td><td>22 x 60</td></tr><tr><td>巴斯德吸管</td><td>J H Berge</td><td>71-5200-05</td><td></td></tr><tr><td>100 毫米镊子</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>T-4662</td><td>款式 # 5</td></tr><tr><td>洗瓶</td><td>Fisher Scientific</td><td>03-409-22A</td><td>Fisherbrand</td></tr><tr><td>金·威佩斯</td><td>Fisher Scientific</td><td>34155</td><td>Kimberly Clark</td></tr><tr><td>纸巾</td><td>Fisher Scientific</td><td>Fisher X-101-C</td><td>1/8 × 13 1/8 英寸</td></tr><tr><td>Leica 体视显微镜 </td><td>Empire Imaging Systems, INC.</td><td>10446208</td><td>MZFLIII</td></tr><tr><td>蔡司体视显微镜 </td><td>卡尔·蔡司股份公司</td><td>000000-1006-126</td><td>&quot;STEMI&quot; 1000 或 2000-C</td></tr><tr><td>光源 - LED 鹅颈灯照明器</td><td>Fisher Scientific</td><td>12563501</td><td></td></tr><tr><td>阶段</td><td>卡尔·蔡司股份公司</td><td></td><td></td></tr><tr><td>蔡司Laser 510激光共聚焦扫描显微镜</td><td>卡尔·蔡司股份公司</td><td></td><td></td></tr><tr><td>培养箱</td><td>赛默飞世尔科技公司</td><td>815</td><td></td></tr><tr><td>杜尔贝科&amp;rsquo;1× 磷酸盐缓冲液 </td><td>Fisher Scientific</td><td>MT-21-030-CM Mediatech</td><td></td></tr><tr><td>乙醇</td><td>Fisher Scientific</td><td>64-17-5</td><td>99.5 %</td></tr><tr><td>甲醛（37% w/w）</td><td>Fisher Scientific</td><td>F79-1</td><td></td></tr><tr><td>H&amp;#8211;chst 33258</td><td>分子探针，Life Technologies</td><td>H-1398</td><td>0.2 &amp;#x03BC;g/ml 激发波长 352 nm；发射波长 461 nm</td></tr><tr><td>罗丹明鬼笔环肽</td><td>分子探针，Life Technologies</td><td>R415</td><td>200 单位/毫升（6.6 &amp;#x03BC;M) 激发 546 nm；发射 565 nm</td></tr><tr><td>Alexa Fluor 488 鬼笔环肽 </td><td>分子探针，Life Technologies</td><td>A22289</td><td>激发波长 495 nm；发射波长 518 nm 300 单位/毫升</td></tr><tr><td>CO&lt;sub&gt;2&lt;/sub&gt; 储液罐</td><td>TW Smith</td><td></td><td></td></tr><tr><td>抗Spz抗体</td><td>赠予耶鲁大学 C. Hashimoto 博士</td><td></td><td></td></tr><tr><td>二抗 TRITC 标记的驴抗兔抗体，浓度 1:50。 </td><td>杰克逊免疫研究实验室</td><td>711-165-152</td><td>在激发波长546 nm；发射波长565 nm处检测到</td></tr><tr><td>抗荧光淬灭剂 </td><td>MP Biomedicals</td><td>ICN10274790</td><td>0.08 mg 没食子酸丙酯溶于 20 ml 含 50% 甘油的 1X PBS 溶液中</td></tr><tr><td>&lt;强&gt;黄蜂品系&lt;/strong&gt;</td><td></td><td></td><td>&lt;强&gt;果蝇品系&lt;/strong&gt;</td></tr><tr><td>&lt;em&gt;L. victoriae&lt;/em&gt;&lt;sup&gt;16&lt;/sup&gt;</td><td></td><td></td><td>&lt;em&gt;y w&lt;/em&gt;</td></tr><tr><td>&lt;em&gt;L. boulardi 17&lt;/em&gt;&lt;sup&gt;1&lt;/sup&gt;</td><td></td><td></td><td>&lt;em&gt;UAS-GFP-Dorsal&lt;/em&gt;&lt;sup&gt;17&lt;/sup&gt;</td></tr><tr><td>&lt;em&gt;L. heterotoma&lt;/em&gt;&lt;sup&gt;2&lt;/sup&gt;</td><td></td><td></td><td>&lt;em&gt;SerpentHemoGal4&lt;/em&gt;&lt;sup&gt;13&lt;/sup&gt;</td></tr><tr><td>&lt;em&gt;L. heterotoma 14&lt;/em&gt;&lt;sup&gt;1&lt;/sup&gt;</td><td></td><td></td><td>&lt;em&gt;MSNF9-moCherry&lt;/em&gt;&lt;sup&gt;14&lt;/sup&gt;</td></tr><tr><td>&lt;em&gt;Trichopria drosophilae &lt;/em&gt;</td><td></td><td></td><td>&lt;em&gt;MSNF-GFP&lt;/em&gt;&lt;sup&gt;15&lt;/sup&gt;</td></tr><tr><td>&lt;em&gt;G. xanthopoda&lt;/em&gt;&lt;sup&gt;18&lt;/sup&gt;</td><td></td><td></td><td>&lt;em&gt;y w Serpent-Gal4 UAS GFP-Dorsal/Basc&lt;/em&gt;&lt;sup&gt;4&lt;/sup&gt;</td></tr><tr><td colspan="4">&lt;em&gt;y w ; Drosomycin-GFP/CyO y+&lt;/em&gt;&lt;sup&gt;12&lt;/sup&gt;</td></tr></tbody></table>

寄生性黄蜂与drosophila的抗寄生免疫反应简介

An Introduction to Parasitic Wasps of Drosophila and the Antiparasite Immune Response

大多数已知的寄生蜂物种攻击宿主的幼虫或蛹阶段 黑腹果蝇。尽管 Trichopria drosophilae 感染宿主的蛹期阶段（图1A-C），该属的雌性个体 Leptopilina (图1D、1F、1G）和 Ganaspis (图1E) 攻击幼虫阶段。我们利用这些寄生蜂研究生物军备竞赛的分子基础。寄生蜂作为生物防治剂具有重要价值。大多数寄生蜂携带毒力因子及其他能够改变宿主生理和免疫反应的因子。对这些因子的分析 黑腹果蝇 黄蜂的研究为物种特异性相互作用如何塑造自然群落的遗传结构提供了见解。这些研究还为理解宿主的免疫生理学以及此类寄生生物如何破坏协调的免疫反应提供了模型。
幼虫/蛹期的表皮是第一道防御屏障。寄生蜂的产卵器是一种锋利的针状结构，可高效地将卵注入寄主的血腔。产卵后，表皮处会启动伤口愈合反应（图1C，箭头所示）。某些寄生蜂可将两个或更多卵注入同一寄主体内，但通常仅有一个卵能够成功发育。多余的卵或正在发育的幼虫会通过一种尚未明确的机制被清除。因此，这类寄生蜂被称为独居型寄生性天敌。
根据果蝇品系和寄生蜂种类的不同，寄生蜂的卵会有两种不同的命运：其一是被包裹，从而阻断其发育（宿主果蝇羽化）； 图 2 左侧）；或寄生蜂卵孵化，发育，蜕皮，并成长为成虫（寄生蜂羽化）； 图 2 右侧 L. heterotoma 是研究最为深入的物种之一 果蝇 寄生蜂。它是一种“广食性”物种，这意味着它能够利用大多数 果蝇 物种作为宿主1. L. heterotoma 和 L. victoriae 是姐妹种，它们产生的病毒样颗粒能够主动干扰包囊反应2。与 L. heterotoma, L. boulardi 是一种专性寄生虫，其宿主范围 黑腹果蝇 其利用的物种相对有限1菌株 L. boulardi 也能产生病毒样颗粒3 尽管它们在成功的能力上存在显著差异 D. melanogaster1其中一些 L. boulardi 菌株在培养时难以生长 D. melanogaster1 因为果蝇宿主经常能够成功包裹它们的卵，因此在特定的实验方案中，了解双方的特性至关重要。
除了屏障组织（表皮、肠道和气管）外， 果蝇 幼虫具有系统性的细胞免疫和体液免疫反应，分别源于血细胞和脂肪体的功能。产卵行为由 L. boulardi 同时激活免疫系统的两个分支1,4血细胞存在于循环系统中、节段性角质层下的固着细胞群中以及淋巴腺中。淋巴腺是位于幼虫背侧的一个小型造血器官。成簇的造血细胞被称为小叶，沿动物体前后轴走行的背血管两侧，以体节为单位成对排列。图 3A）。脂肪体是一个大型多功能器官（图 3B它在微生物和多细胞动物感染时会分泌抗菌肽。
黄蜂感染会激活免疫信号通路（图4）4。在细胞水平上，它可触发血细胞的分裂与分化。作为自我防御机制，感染个体的血腔内会形成聚集物和囊包（图5）5,6。活化的血细胞向黄蜂卵（或黄蜂幼虫）迁移，并在其周围开始形成囊包（图5A-F）。部分血细胞聚集形成结节（图5G-H）。细致分析显示，黄蜂感染可诱导最前端的淋巴腺叶在其周边区域发生弥散（图6C, D）。
我们展示了Toll信号转导通路组分Dorsal和Spätzle（图4,5,7）及其靶基因Drosomycin（图6）的代表性数据，以说明在黄蜂感染后如何研究淋巴腺和血腔中的特定变化。本文所述的解剖方案还可从宿主血淋巴中获得黄蜂卵（或黄蜂的发育阶段）（图8）。

寄生性黄蜂构成许多昆虫（包括 黑腹果蝇我们将介绍在体外培养和扩增这些寄生虫的技术 黑腹果蝇 spp. 并演示如何分析它们对免疫组织的影响 果蝇 幼虫

寄生性黄蜂与Drosophila的抗寄生免疫反应简介

已知的大多数寄生蜂物种攻击果蝇的幼虫或蛹期。而黑腹果蝇重脊茧蜂（Trichopria drosophilae）则感染寄主的蛹期（图 ...）

本实验的总体目标是展示如何利用果蝇寄主维持寄生蜂的培养，以及如何解离淋巴腺和脂肪体。首先利用果蝇幼虫培养寄生蜂，随后对动物进行解剖，以分离幼虫的淋巴腺。该过程包括剥离表皮，并去除脂肪体及其他细微结构，从而获得淋巴腺。同样，脂肪体本身也可以通过类似的程序，结合免疫细胞化学和荧光显微镜技术进行分离。在免疫组织中可观察到基因表达及细胞特异性变化。在寄生蜂感染后，我们研究一种利用果蝇及其寄生蜂的独特感染与免疫系统。本实验室是少数长期维持果蝇寄生蜂活体培养的实验室之一。因此，我们经常被要求分享相关技术。寄生蜂是多种昆虫的天敌。我们研究的物种会攻击多种果蝇的幼虫阶段。在实验室中，我们利用黑腹果蝇（drosophila melanogaster）来研究昆虫免疫系统如何受到寄生性寄生蜂攻击的影响。其次，我们希望揭示沃尔巴克氏体（wasp）用来克服宿主防御的策略。通常，初次进行脂肪体和淋巴腺解剖的实验人员会遇到困难，因为尽管卵寄生蜂幼虫易于培养，但其体型较小，需要相当熟练的经验才能常规性地轻松解剖这些幼虫器官。在发现NF-κB信号通路的组成型激活会导致类似自身免疫的细胞组织包裹反应后，我们开始好奇这种反应在卵寄生蜂fla突变体中将如何发生。因此，我们假设这种诱导产生的包裹现象与其天然对应过程相关，并由此建立了本实验中将要展示的标准操作流程。接下来，我将演示如何准备和维持寄生蜂的培养体系。首先准备一个新鲜的果蝇培养管，在其中加入少量新配制的酵母糊。将50至60只年轻的野生型果蝇转移至该培养管中，在24摄氏度下产卵48小时。产卵两天后，将果蝇从培养管中移除，并在棉塞上添加一滴蜂蜜。最后，盖上瓶盖。在麻醉黄蜂前，先降低二氧化碳的流量，因为黄蜂对这种气体比果蝇更敏感。准备就绪后，挑出6至8只雌性黄蜂和6至8只雄性黄蜂，并将其加入瓶中。使用果蝇的卵和幼虫。将试管轻轻平放，直到寄生蜂苏醒。然后将试管放入24摄氏度的培养箱中。未受感染的刺茄寄主以及成功防御的寄主将在正常的发育时间点化蛹。可在蜂类羽化前将其移除。通常在25至30天左右收集蜂类，以确保获得相同发育阶段的个体。将寄生蜂与宿主卵共同培养 2 至 6 小时，而非 48 小时，以收集被感染的幼虫用于免疫组织或寄生体的解剖。将果蝇小瓶中的内容物转移至一个小的玻璃或塑料培养皿中，然后在体视显微镜下使用精细镊子小心挑选 6 到 10 条幼虫。将幼虫先放入含有一个 XPBS 的孔中，然后依次转移至水中、70%乙醇水溶液中以及一个 XPBS 中。这些步骤的目的是去除幼虫体表的果蝇食物，并彻底清洗和表面消毒。在 Zes 1000 体视显微镜的解剖台上，放置一个光源盒，使入射光能够透过样品。使用精细镊子从 PBS 中选取一只清洁的游走期三龄幼虫。将幼虫放置于显微镜载玻片上。用镊子将幼虫腹面朝上固定。将光源倾斜，避免直接照射样本，使生物体呈现透明状，

an-introduction-to-parasitic-wasps-drosophila-antiparasite-immune

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科研

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Immunology and Infection

免疫学与感染

寄生蜂简介<em&gt;果蝇</em&gt;和Antiparasite的免疫反应的

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