Name: 测量中晚期胚胎和新生小鼠左心室压力 (视频) | JoVE Journal
Uploaded: 2012-02-23T13:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 15 s
Description: 了解如何使用超声引导技术在小鼠中晚期胚胎和新生阶段测量左心室压力。该方法结合压力传感器与实时成像，为心血管生理学和发育生物学研究提供可靠的收缩压数据。

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本工作部分由美国国立卫生研究院（NIH）资助，项目编号为 HL087653 和 HL105314。部分方法是在华盛顿大学医学院 Robert Mecham 博士的实验室中开发的。

1. 超声与压力系统
<ol>
	<li>根据制造商的说明启动超声系统（Vevo 770，Visualsonics）。安装合适的探头（E18–P7 阶段使用型号 708，年龄 &gt; P7 = 型号 707B）用蒸馏水冲洗，并连接至超声系统。将探头置于可调节支架上，调整至大致方位，以便对固定在成像平台上的小鼠获取左心室长轴切面图像，使左心室心尖朝向注射臂。</li>
	<li>压力系统由充满液体的压力传感器、桥式放大器、数据采集系统和数据记录软件（LabChart）组成。连接部分包括三通旋塞阀、管路、鲁尔锁接头和软管接头。一支20 mL注射器一端充入10%肝素化生理盐水用于冲洗，另一端连接针头；另取一支3 mL注射器筒体经改装后用作外壳，以固定注射臂中的针头管路（图1）。</li>
	<li>使用压力计校准压力传感器系统。</li>
	<li>将针管和套管安装至超声系统的注射臂上。将压力传感器用铁架台夹住，固定在成像平台大致相同的高度。根据小鼠的年龄选择合适的针头（E18至P3阶段使用30G针头，年龄 &gt; P3 = 25G）连接至针头导管。较细的针头更容易堵塞，穿过胸壁时操作更困难，且响应速度较慢。因此，应针对每个年龄段选择能够适配左心室腔内径的最大针径。</li>
	<li>在成像平台上放置一 mound 超声耦合剂，并使用可调节支架仔细对准探头，使针头能够直接穿过耦合剂进入探头中心下方（图 2）。针头必须位于探头下方足够深的位置，以避免刺破探头护套，但又需足够接近，以确保处于探头的焦深范围内。如有必要，可手动弯曲针头，使其在整个行进过程中始终保持在正确的成像平面内。</li>
	<li>保持对齐，回撤针头并抬起成像探头，以便将小鼠放置在成像平台上。冲洗针头，以清除可能进入针尖的凝胶。</li>
</ol>
2. 小鼠准备
<ol>
	<li>本方案中所示所有方法均已获得机构动物护理和使用委员会批准。通过持续吸入1.5%异氟烷对定时妊娠母鼠（E18）或新生小鼠（P1–20）进行麻醉。可将导管插入标准鼻罩，以适应早期新生小鼠（P1–15）较小的头部。</li>
	<li>将小鼠以仰卧位固定在超声系统的成像平台上，使左心室心尖朝向注射臂。对于妊娠母鼠，涂抹超声耦合剂，使用附带的ECG检测器监测心率，并插入直肠温度计以实现体温的反馈控制。新生小鼠体型过小，无法使用这些检测设备，因此在压力测量期间监测心率，并通过外部加热灯维持体温。</li>
	<li>使用脱毛膏去除妊娠母鼠腹部或幼鼠胸部的毛发。新生小鼠（P1–10）无需进行脱毛处理。</li>
	<li>对于妊娠母鼠，使用解剖剪刀和弯头镊子切开腹部。外置一侧子宫角，并置于用温盐水浸湿的纱布上。小心调整胚胎位置，利用超声探头获得左心室的胸骨旁长轴切面图像。在暴露另一侧子宫角之前，测量该侧所有胚胎的压力。定期补充温盐水，以保持所有胚胎及母鼠腹部的湿润状态。</li>
</ol>
3. 压力测量
<ol>
	<li>将预热并脱气的超声耦合剂涂抹于胚胎期或新生期小鼠。对于未脱毛的新生小鼠，应先在胸部轻轻涂抹少量超声耦合剂以增强耦合效果，然后再涂抹剩余的耦合剂。降低成像探头，并调整成像平台的角度，以获得最佳的胸骨旁左心室长轴切面。切勿调整探头角度，以免破坏针头的对准位置。</li>
	<li>在超声屏幕监控左心室图像的同时，缓慢推进针头，直至其接近探头底部。如有必要，调整针头和探头位置以纠正对准偏移。用生理盐水轻轻冲洗针头。开始记录压力数据，并使用 LabChart 软件对压力传感器进行调零。由于传感器会随温度和位置发生漂移，因此在每只小鼠测量前立即调零至关重要。</li>
	<li>缓慢推进针头，直至其出现在超声图像边缘，但尚未进入左心室。如有必要，调整针头位置，使其从心尖处进入左心室。如有必要，调整探头位置以保持针头的清晰成像。在推进针头进入左心室腔（图3）的同时，持续记录压力数据并监控超声图像上的针头位置。当压力传感器开始记录到搏动性波形时，即可确认针头已进入左心室腔内（图4）。</li>
	<li>若针头看似已在左心室腔内，但记录到的压力信号无搏动性，可轻推注射器活塞进行冲洗，直至检测到压力上升（约 5 - 10 μL 体积）。此举可清除可能阻碍准确读数的堵塞。若压力信号仍无搏动性，则针头可能位于正确平面的上方或下方，未真正进入左心室腔。此时应撤回针头，用生理盐水冲洗后再次推进。若仍无法获得搏动性信号，则应更换下一只小鼠。每只小鼠均应使用新的针头。</li>
	<li>在尝试的胚胎期和新生期小鼠中，约 75% 可成功获得压力读数。每次读数应持续 5 - 10 分钟，若某只小鼠的心率与预期值显著不同，则其压力数据不应纳入分析（图5A）。心率对心血管参数具有显著影响，异常心率提示心脏功能受损。胚胎期小鼠通常在子宫首次暴露于体外后 1 - 1.5 小时出现应激反应，因此在整窝小鼠中快速完成压力测量至关重要。</li>
</ol>
4. 代表性结果
所有结果显示均为 C57BL6J 小鼠的数据。图 3 展示了 P1 小鼠左心室腔内针头位置的图像。针头用于穿刺胸壁并进入较小的左心室腔，但它显著延长了压力系统的响应时间。当手动对系统施加近似阶跃的压力增加时，仅使用导管时达到最大压力 67% 所需的时间为 0.067 秒（最可能代表实际施加压力阶跃所需的时间），使用 25 G 针头时为 0.105 秒，使用 30 G 针头时为 0.529 秒。在图 4A 和 4C 所示的完整记录曲线中可以观察到达到最大压力的延迟。尽管使用 30 G 针头时响应时间较慢，但在胚胎期和新生早期阶段能更准确地捕捉波形，因为小鼠的心率随年龄增长而增加5。尽管存在这一限制，仍可假设真实的左心室舒张压（最小值）为零，并根据稳态读数所确定的平均左心室压力的两倍来计算收缩压（最大值）（图 4B 和 4D）6。通常认为左心室收缩压与动脉压相等。图 5 展示了 E18 至 P14 不同年龄段测得的心率及计算得到的左心室压力。
<img src="/files/ftp_upload/3756/3756fig1.jpg" alt="压力测量装置示意图；包含注射器、三通阀、换能器、放大器连接部分。" data-altupdatedat="1787630408000"> 
图1. 带有连接的三通阀、公（M）和母（F）鲁尔锁接头、软管接头、管路、注射器和针头的压力换能器图像。
<img src="/files/ftp_upload/3756/3756fig2.jpg" alt="超声成像装置，包括探头支架、耦合剂、平台；用于医学诊断中的针头注射。" data-altupdatedat="1787630408000"> 
图2. 针头与成像探头对齐的装置示意图（A）。成像平台已旋转，使小鼠左心室心尖朝向注射臂。探头安装在可调节支架上，大致调整至获取左心室长轴图像所需的方向。针头的管路外壳固定在注射臂上。将针头插入成像平台上的一堆超声耦合剂中，以确定其相对于成像探头的合适角度以及垂直和水平位置（B）。
<img src="/files/ftp_upload/3756/3756fig3.jpg" alt="心脏组织的超声图像，显示心腔壁和左心室，用于心脏分析。" data-altupdatedat="1787630408000"> 
图3. 针头（N）穿过P1小鼠胸壁（CW）并进入左心室腔内的图像。比例尺 = 0.1 mm。
<img src="/files/ftp_upload/3756/3756fig4.jpg" alt="血压随时间变化的曲线图，显示实验装置结果中的动态压力变化。" data-altupdatedat="1787630408000"> 
图4. 针头进入E18（A）和P14（C）小鼠左心室（LV）时记录到的典型脉动压力读数。由于连接针头后系统的响应时间，达到稳态存在延迟。B和D展示了稳态时读数的放大视图。注意，E18小鼠左心室的最低压力接近零，但在P14小鼠较高心率条件下，无法完整记录从零到最大压力的整个波形。平均压力由稳态读数测得，并假设左心室收缩压 = 2 × 测得的平均压力。
<img src="/files/ftp_upload/3756/3756fig5.jpg" alt="心率和血压柱状图；E18至P14发育阶段的比较分析" data-altupdatedat="1787630408000"> 
图5. E18至P14小鼠测得的心率（A）和计算的左心室收缩压（B）。E18组n=7，P1组n=5，P3组n=22，P7组n=23，P14组n=165-7。

<ol><li>Ji, R. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Onset+of+cardiac+function+during+early+mouse+embryogenesis+coincides+with+entry+of+primitive+erythroblasts+into+the+embryo+proper%5BTitle%5D)+AND+%22Circ.+Res%22%5BJournal%5D)">Onset of cardiac function during early mouse embryogenesis coincides with entry of primitive erythroblasts into the embryo proper.</a> Circ. Res. 92 (2), 133-135 (2003).</li>
<li>Ishiwata, T., Nakazawa, M., Pu, W. T., Tevosian, S. G., Izumo, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Developmental+changes+in+ventricular+diastolic+function+correlate+with+changes+in+ventricular+myoarchitecture+in+normal+mouse+embryos%5BTitle%5D)+AND+%22Circ.+Res%22%5BJournal%5D)">Developmental changes in ventricular diastolic function correlate with changes in ventricular myoarchitecture in normal mouse embryos.</a> Circ. Res. 93 (9), 857-865 (2003).</li>
<li>Huang, Y., Guo, X., Kassab, G. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Axial+nonuniformity+of+geometric+and+mechanical+properties+of+mouse+aorta+is+increased+during+postnatal+growth%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Physiol.+Heart+Circ.+Physiol%22%5BJournal%5D)">Axial nonuniformity of geometric and mechanical properties of mouse aorta is increased during postnatal growth.</a> Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. 290 (2), H657-H664 (2006).</li>
<li>Ishii, T., Kuwaki, T., Masuda, Y., Fukuda, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Postnatal+development+of+blood+pressure+and+baroreflex+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Auton.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Postnatal development of blood pressure and baroreflex in mice.</a> Auton. Neurosci. 94 (1-2), 34-41 (2001).</li>
<li>Le, V. P., Knutsen, R. H., Mecham, R. P., Wagenseil, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Decreased+aortic+diameter+and+compliance+precedes+blood+pressure+increases+in+postnatal+development+of+elastin-insufficient+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Physiol.+Heart+Circ.+Physiol%22%5BJournal%5D)">Decreased aortic diameter and compliance precedes blood pressure increases in postnatal development of elastin-insufficient mice.</a> Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. , (2011).</li>
<li>Wagenseil, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reduced+vessel+elasticity+alters+cardiovascular+structure+and+function+in+newborn+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Circ.+Res%22%5BJournal%5D)">Reduced vessel elasticity alters cardiovascular structure and function in newborn mice.</a> Circ. Res. 104 (10), 1217-1224 (2009).</li>
<li>Wagenseil, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+importance+of+elastin+to+aortic+development+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Physiol.+Heart+Circ.+Physiol%22%5BJournal%5D)">The importance of elastin to aortic development in mice.</a> Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. 299 (2), H257-H264 (2010).</li>
<li>Ramirez, F., Sakai, L. Y., Rifkin, D. B., Dietz, H. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Extracellular+microfibrils+in+development+and+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Cell.+Mol.+Life+Sci%22%5BJournal%5D)">Extracellular microfibrils in development and disease.</a> Cell. Mol. Life Sci. 64 (18), 2437-2446 (2007).</li>
<li>Li, D. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Elastin+point+mutations+cause+an+obstructive+vascular+disease%2C+supravalvular+aortic+stenosis%5BTitle%5D)+AND+%22Hum.+Mol.+Genet%22%5BJournal%5D)">Elastin point mutations cause an obstructive vascular disease, supravalvular aortic stenosis.</a> Hum. Mol. Genet. 6 (7), 1021-1028 (1997).</li>
<li>Roth, D. M., Swaney, J. S., Dalton, N. D., Gilpin, E. A., Ross, J. Jr <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Impact+of+anesthesia+on+cardiac+function+during+echocardiography+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Physiol.+Heart+Circ.+Physiol%22%5BJournal%5D)">Impact of anesthesia on cardiac function during echocardiography in mice.</a> Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. 282 (6), H2134-H2140 (2002).</li>
<li>Phoon, C. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Imaging+tools+for+the+developmental+biologist%3A+ultrasound+biomicroscopy+of+mouse+embryonic+development%5BTitle%5D)+AND+%22Pediatr.+Res%22%5BJournal%5D)">Imaging tools for the developmental biologist: ultrasound biomicroscopy of mouse embryonic development.</a> Pediatr. Res. 60 (1), 14-21 (2006).</li>
</ol>

无利益冲突声明。

本文所述方案提供了一种用于测量晚期胚胎及早期新生小鼠左心室（LV）压力的方法。该方案的主要局限在于压力系统的时相分辨率。压力信号从左心室经由针头传递至换能器的过程中会发生衰减，因此仅能记录平均压力值。可通过使用尽可能粗的针头来最小化衰减效应，但针头必须适配不同日龄小鼠左心室腔的大小。由于舒张压可近似视为零，因此可根据平均左心室压力测量值计算出左心室以及相应的动脉收缩压。尽管获取额外的动脉参数更为理想（例如脉压），但收缩压仍能为了解小鼠发育过程中作用于心脏及心血管系统的力学因素提供重要信息。该方案的优势在于操作简便、快速且可重复，适用于对不同小鼠基因型或处理方案进行高通量比较。通过在关键发育阶段测量收缩压，我们能够逐步理解机械力与人类疾病中心脏及心血管结构和功能变化之间的相互作用。
固态导管被认为是压力测量的金标准，其时间分辨率优于充液式换能器。固态小鼠导管的标准规格为1.0F（0.33 mm，Millar）、1.2F（0.4 mm，Scisense）或1.4F（0.47 mm，Millar）。使用1.2F Scisense导管可对出生后21天（P21）以上的小鼠获得良好的动脉压读数...

<table><tbody><tr><td>高分辨率超声系统</td><td>VisualSonics, inc.</td><td>Vevo 770</td><td>或其他合适的超声系统</td></tr><tr><td>高频超声探头</td><td>VisualSonics, inc.</td><td>708 和 707B</td><td> </td></tr><tr><td>成像平台与注射臂</td><td>VisualSonics, inc.</td><td>Imaging Station 2</td><td>配备平台的 ECG 和温度反馈控制系统</td></tr><tr><td>压力传感器</td><td>ADInstruments</td><td>MLT 844</td><td> </td></tr><tr><td>桥式放大器</td><td>ADInstruments</td><td>ML221</td><td> </td></tr><tr><td>数据采集系统</td><td>ADInstruments</td><td>ML866</td><td> </td></tr><tr><td>数据记录软件</td><td>ADInstruments</td><td>LabChart</td><td> </td></tr><tr><td>铁架台和夹具</td><td>Various</td><td></td><td>用于在测量期间固定压力传感器</td></tr><tr><td>带鲁尔接头的三通旋塞，公端锁定</td><td>Cole-Parmer</td><td>30600-02</td><td> </td></tr><tr><td>内径 1/16&quot; 的Tygon管</td><td>Cole-Parmer</td><td>06408</td><td> </td></tr><tr><td>带 1/16&quot; 软管接头的公鲁尔和母鲁尔接头</td><td>Cole-Parmer</td><td>45510-50 45510-00</td><td> </td></tr><tr><td>两端分别为公鲁尔和母鲁尔接头的 24&quot; 管路</td><td>Cole-Parmer</td><td>30600-60</td><td> </td></tr><tr><td>3 和 10 mL 注射器</td><td>BD Biosciences</td><td></td><td> </td></tr><tr><td>30G 和 25G 针头</td><td>BD Biosciences</td><td></td><td>长度为 1.5 英寸</td></tr><tr><td>Big Ben 压力计</td><td>Riester</td><td>1456-100</td><td> </td></tr><tr><td>生理盐水</td><td>Various</td><td></td><td> </td></tr><tr><td>肝素</td><td>Various</td><td></td><td> </td></tr><tr><td>超声耦合凝胶</td><td>Parker Hannifin Corporation</td><td>Aquasonic 100</td><td> </td></tr><tr><td>脱毛乳液</td><td>Nair</td><td></td><td> </td></tr></tbody></table>

测量晚期胚胎及新生小鼠的左心室压力

Measuring Left Ventricular Pressure in Late Embryonic and Neonatal Mice

在脊椎动物的胚胎期和出生后发育过程中，血压显著升高。在小鼠中，大约胚胎第8.5天（E8.5）可首次检测到血流1。左心室收缩压在E9.5时为2 mmHg，到E14.5时升至11 mmHg2。在这些中期胚胎阶段，由于肋骨和皮肤尚未完全发育，左心室（LV）可通过胸壁清晰观察，便于进行有创性压力测量。在E14.5至出生（约E21）之间，必须使用成像方法观察左心室。出生后，平均动脉压从出生后第2天至第35天（P2–P35）由30 mmHg上升至70 mmHg3。出生后20天（P20）以后，可使用固态导管（如Millar或Scisense导管）测量动脉压。而在P20之前，这些导管对发育中的小鼠动脉而言过大，必须使用自制的拉制塑料导管连接充液压力传感器3，或使用玻璃微移液管连接伺服零位压力传感器来测量动脉压4。
我们近期的研究表明，在小鼠从晚期胚胎期到出生后早期阶段，血压升高最为显著5-7。这一显著的血压升高可能影响发育中动脉的平滑肌细胞（SMC）表型，并触发重要的机械转导事件。在人类疾病中，当发育中动脉的机械特性因细胞外基质蛋白缺陷而受损时（例如马凡综合征8和主动脉瓣上狭窄9），此阶段血压的快速变化可能通过改变机械转导信号，影响疾病的表型和严重程度。因此，能够在人类疾病的小鼠模型中测量晚期胚胎期和新生儿期的血压变化显得尤为重要。
我们描述了一种用于测量晚期胚胎期（E18）及早期出生后（P1–20）小鼠左心室（LV）压力的方法。在超声引导下，将连接至充满液体的压力换能器的针头插入左心室。实验过程中需特别注意维持心脏的正常功能，尤其是对胚胎期小鼠。本文展示了代表性数据，并讨论了该实验方案的局限性。

本文描述了在胚胎期和新生小鼠中测量左心室压力（LV）的方法。通过在超声引导下将连接至液体填充式换能器的针头插入左心室来测量压力。在实验过程中必须注意维持心脏的正常功能。

在脊椎动物的胚胎期及出生后发育过程中，血压显著升高。在小鼠中，血流首次可被检测到……

本实验的总体目标是测量晚期胚胎期和新生小鼠的左心室（LV）压力。首先，准备实验设备。连接至压力传感器的针头必须与超声探头对齐。然后准备一只小鼠，并通过超声成像其左心室（LV）。接着将针头推进至左心室腔内，记录搏动性压力测量值。最终结果展示了利用这种超声引导的液体填充导管术，在晚期胚胎和早期新生小鼠中测得的收缩压。与现有的伺服法、无压力测量法或固态导管法相比，该技术的主要优势在于能够以稳定且可重复的方式对晚期胚胎期和新生小鼠进行压力测量。通常，初次接触该技术的研究人员会遇到困难，因为在操作过程中难以维持胚胎在胚胎囊内的方向，胚胎容易发生旋转。在应用超声探头时，根据所研究小鼠的发育阶段，选择合适的探头并用蒸馏水填充。将探头置于超声系统的可调节支架上。调节支架，使其对准固定在平台上的小鼠，获得左心室长轴切面图像，左心室心尖朝向注射臂。压力系统由充满液体的压力换能器、桥式放大器、数据采集系统和实验记录仪组成。使用一个软件包和一个装有10%肝素化生理盐水的20毫升注射器冲洗管路。确保管路或换能器表面不残留气泡。管路通过三通旋塞阀、鲁尔锁和软管接头与换能器连接。使用压力计校准压力传感器系统，并将针管和套管安装到注射臂上。用套管替换压力计，以将管路固定至注射臂。该套管仅为经过改装的3毫升注射器筒体。将压力传感器夹在铁环架上，高度与成像平台大致相同，以避免堵塞。在针头导管上连接尽可能大规格的针头，并继续注入肝素化生理盐水，直至有少量液滴滴出。再次退出针头。确保管路或换能器上未有气泡滞留。现在，在成像平台上放置一坨超声耦合剂。将三毫升注射器针头旋转，使针头的斜面朝上。然后使用可调支架，仔细对准探针位置，以便针头能够直接插入凝胶中。在成像探针的中心下方，针头必须低于探针足够距离，以避免刺破探针保护罩，但又需足够接近，以确保位于探针的焦深范围内。如有必要，可手动弯曲针头，以确保其在整个行进过程中保持在正确的平面内。保持对齐，回撤针头并抬起成像探头，将小鼠放置于成像平台上。在继续对小鼠进行麻醉前，需更换针头。通过持续吸入1.5%异氟烷，可对妊娠定时的小鼠或新生小鼠进行麻醉，氟烷管路可插入标准鼻罩中，以适应早期新生小鼠较小的头部。对于新生小鼠，将其固定在超声系统成像平台上的仰卧位，使左心室心尖朝向注射臂方向。对于新生小鼠，需使用外部加热灯维持其体温。怀孕的小鼠需要更多的准备工作。在四肢涂抹超声耦合凝胶，以确保与连接的心电图检测器良好接触，并监测心率。插入直肠温度计以获取反馈信息。控制体温。使用脱毛膏去除腹部毛发，并用水冲洗。使用解剖剪刀和弯头镊子剪开腹部。将一侧子宫角外置，并置于温热的生理盐水浸湿的纱布垫上。在整个操作过程中，保持所有胚胎及其母体腹部湿润。通过定期添加温热的生理盐水，小心地调整胚胎位置，以获得左心室的胸骨旁长轴切面。使用超声探头时，可用一卷纱布辅助维持胚胎的方位。在对另一侧子宫角重复该过程之前，先完成同一子宫角内所有胚胎的压力测量。首先将预热的脱气超声耦合剂涂抹于胚胎或新生小鼠体表，随后降低成像探头，并调整成像平台的角度，以获得最佳的胸骨旁左心室长轴切面图像。不要调整探头的角度，否则会导致针头错位。在超声屏幕监视左心室图像的同时，缓慢推进针头，直至接近探头底部。如有必要，调整针头和探头的位置，以校正对位偏差。新生小鼠的图像显示了左心室（lv）的理想方位，而胚胎则很难达到这种方位。开始记录压力数据。用生理盐水轻轻冲洗针头，然后关闭通向20毫升注射器和大气的旋塞阀。观察压力。调整程序以确保施加在针头上的压力最小。缓慢推进针头，直至其在超声图像边缘可见，但尚未进入左心室。如有必要，调整针头位置，使其从心尖进入左心室。必要时调整探头位置，以保持针头影像清晰。在将针头推进左心室腔的同时，记录压力数据，并在超声图像上监测针头位置。压力传感器记录到脉动波形，表明针尖已进入左心室腔内。若针尖看似位于左心室腔内，但记录到的压力波形无脉动特征，可轻轻敲击注射器活塞进行冲管，直至检测到压力上升为止。冲洗液体时必须尽量轻柔，以避免在压力测量过程中改变心脏的正常功能。如果压力读数仍然无搏动性，针尖可能位于正确平面的上方或下方，未进入左心室腔内。此时应撤回针头，用生理盐水冲洗后再次推进。如果仍无法获得脉动读数，则继续更换下一只小鼠，并且每次更换新小鼠时务必使用新的针头。整个操作过程应尽快完成，以尽量减少实验过程中对胚胎和新生鼠造成的应激。在 E18 小鼠中测定了 C57BL/6J 小鼠的心室压。正如预期，当针头位于左心室（LV）外部时，压力接近于零；而对于一只较年长的 P14 小鼠，当针头进入左心室内部时，压力呈现出搏动性读数。由于压力幅度更大且心率更高，压力读数有所衰减。心率是通过 E18 至 P14 不同年龄段小鼠的搏动性压力读数频率确定的。测量心率并计算左心室收缩压。进行该操作时，需注意定期湿润胚胎并检查母鼠的状况。该技术为心血管生理学领域的研究人员探索发育中 小鼠 的血压变化奠定了基础。

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科研

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Bioengineering

生物工程

测量中晚期胚胎和新生小鼠左心室压力

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右心室（RV）功能障碍在心血管疾病的发病机制中至关重要，但目前可用于评估右心室功能的方法十分有限。近年来超声成像技术的进步为长期纵向研究右心室提供了无创且准确的选择。本文中，我们详细描述了一种利用右心室压力超负荷小鼠模型进行的逐步超声心动图检测方法。...

经胸超声心动图评估肺动脉缩窄小鼠模型中右心室结构与功能

心力衰竭是导致住院的首要原因，也是死亡的主要原因之一。通过建立小鼠左前降支冠状动脉永久性结扎模型，用于研究心肌梗死后的心室重构和心脏功能障碍。本文介绍了在小鼠中进行有创血流动力学测量的技术。...

小鼠左前降支冠状动脉永久性结扎：心肌梗死后心室重构与心力衰竭模型

本文介绍了通过压力/容积分析法在不同心率下测量小鼠左心室功能的方法。...

在小鼠中进行心脏导管插入术以测量压力-容积关系：研究博特维奇效应

本文描述了一种从小鼠采集压力-容积数据的详细方案。...

测量小鼠的压力-容积环

以下方案描述了获取和分析小鼠左心房容积（LAV）、主动脉（Ao）直径及肺动脉（PA）直径所用的超声心动图图像的方法学。该技术是一种非侵入性、非终末性操作，可用于评估心肺功能。...

小鼠左心房、主动脉及肺动脉的超声心动图检查

高频超声成像技术显著提高了胎鼠心脏的成像分辨率，可实现对心脏发育过程及结构缺陷的精确、无创性表征。本文所述方案旨在进行实时胎鼠超声心动图检测 体内.

利用高频超声（30/45 MHz）系统对胎鼠心血管成像

本文描述并比较了在小鼠中获取心尖四腔切面的两种体位。这两种体位均可用于量化右心室功能，结果具有可比性，且可互换使用。...

小鼠右心室舒张期参数的超声心动图测量

本方案描述了对出生7天的新生小鼠进行左心室形态、功能及冠状动脉血流的超声心动图评估方法。...

新生小鼠左心室结构、功能及冠状动脉血流的超声心动图表征

了解如何使用超声引导技术在小鼠中晚期胚胎和新生阶段测量左心室压力。该方法结合压力传感器与实时成像，为心血管生理学和发育生物学研究提供可靠的收缩压数据。

测量晚期胚胎及新生小鼠的左心室压力

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