一个小鼠模型，通过神经肌肉电刺激肌肉训练

小鼠模型的神经肌肉电刺激（NMES），临床安全和廉价的方式，车厢前部肌肉被描述。这种模式有针对性和具体的肌肉收缩引发小鼠的目的修改一个现成的临床设备的优势。

该程序的总体目标是展示使用神经肌肉电刺激进行肌肉训练的 murn 模型。这是通过首先将专为人类设计的临床可用表面电极适配可能用于小鼠的表面电极来实现的，然后麻醉并定位动物以进行刺激。然后将表面电极直接放在腓骨头远端的腓深神经上。

最后一步是执行前卷曲肌的刺激方案。最终，组织学分析显示骨骼肌血管增加，原位收缩测试显示撒旦峰值强度增加。大家好，我叫 Fabrizio。

我是匹兹堡大学物理医学与康复系的助理教授，也是细胞康复实验室的主任。今天，我们将为您演示使用神经肌肉电刺激进行肌肉训练的镜像模型。在演示的第一部分，我们将向您展示如何将临床可用的表面电极改造成可用于刺激小鼠骨骼肌的电极。

在第二部分中，我们将演示如何在实验中实施这种神经肌肉电刺激方案，以及开发与模式非常相似的动物模型。使用诊所很重要，因为它可以帮助我们回答与骨骼肌生理学相关的问题，例如肌肉激活如何触发机械转导反应，在这方面，我们可以在分子、细胞和组织水平上进行研究。大家好，我是 Ricardo Ferrari。

我是匹兹堡大学物理治疗系的博士生。靠近肌肉电刺激是临床上用于增加肌肉力量和改善肌肉愈合的常见程序。然而，关于应该使用的最佳参数，仍然存在许多问题。

这种动物模型可能有助于开发用于临床环境的特定电刺激方案。要准备电极，首先将两个 6 毫米长的金针以 90 度角弯曲。接下来，通过移除外部绝缘层，露出大约 7 厘米的两根铜线。

然后将连接器的电线焊接到两个金引脚上，这两个金引脚相距约 3.5 毫米。之后，在铜线和金针之间的连接处使用收缩管进行绝缘和稳定，加热收缩管，确保金针彼此平行，并将它们穿过电路板，使尖端对齐。接下来，将针嵌入透明环氧树脂的多个应用中，让环氧树脂在两次应用之间完全干燥，将环氧树脂打磨以露出金针的尖端。

接下来，使用电压表检查引线是否没有电气短路。然后使用塑料管将母双向线连接器的金属引脚绝缘。接下来，将 NMES 设备的电极引线连接到母双向线连接器。

所有程序均由匹兹堡大学 Iacuc 审查和批准，并在 PHS Assured 和 alac 中进行。国际认可的计划和设施通过吸入 isof 氟来麻醉动物。动物应在整个 NMES 会议期间保持麻醉状态。

应使用脚趾捏伸肌反射试验确认麻醉。然后将动物置于侧卧位。随后剃掉后肢，用酒精擦拭，用 3% 漂白剂擦拭电极。

然后用水设置刺激参数，包括 150 微秒的脉冲持续时间和 50 PP s 的频率。然后将刺激时间设置为 5 秒，增加 0.5 秒，减少 0.5 秒。这将使肌肉逐渐适应刺激，对动物来说更舒适。

之后，将宫缩之间的关闭时间设置为 10 秒。这可以根据所需的效果进行调整，但减少关闭时间会导致肌肉疲劳的开始更快。接下来，用 3% 漂白剂对电极消毒，然后用水并将导电凝胶涂在电极上，以刺激前室肌肉，包括胫骨前肌和趾伸肌最长的肌肉，将表面电极直接放在动物的会阴总神经上位于股骨外侧髁的远端。

当刺激引起踝关节完全背屈和手指完全伸展时，确认电极的位置。另一方面，没有手指伸展的爪背屈表明只有胫骨前肌受到刺激。接下来，以 9 毫安开始 NMES 强度，完成两组收缩，总共 20 次收缩，两组之间休息 5 分钟，在休息期间，刺激对侧肢体。

现在将动物放入恢复室。在 3 至 5 个月大的 MDX 滑移小鼠中接受 NMES 4 周后，与未刺激的对照小鼠相比，血红素和 eoin 骨骼肌染色显示中央有核纤维的数量没有增加。这表明 NMES 的应用不会启动退化再生级联反应。

CD 31 免疫组织化学作为内皮细胞标志物显示，相对于未接受刺激的对照小鼠，4 周的 NMES 导致治疗肌肉的显着血管生成。该图显示了相对于对照未处理的肌肉，NMES 治疗的肌肉的峰值泰坦尼克强度增加。掌握此技术后，每只动物完成方案大约需要 15 分钟。

该协议最困难的部分是为电极找到合适的位置以引发所需的肌肉反应。感谢您的观看。如果您有任何问题，请随时联系我们的实验室。