2012年8月22日
长期感染土源性蠕虫(STHs)会导致生长发育期儿童出现营养吸收不良、生长迟缓和消瘦。因此,这些感染也可能降低儿童的身体素质。本文展示了两种用于诊断土源性蠕虫感染的技术,以及用于评估儿童身体素质的20米往返跑测试。
以下方法学的目的是促进并标准化对经传播的 Helmuth 感染状况的评估,以及评估经传播的 Helmuth 感染是否影响学龄儿童的身体健康状况。通过采用 Kato-Katz 技术来诊断常见的经土壤传播的蠕虫感染,主要包括蛔虫(Ascaris Lumbricoides)、钩虫(Ancylostoma duodenale 和 Necator americanus)。第二步采用 Kato-Katz 技术,这是目前应用最广泛的用于诊断鞭虫(Trichuris trichiura)感染的方法。
接下来,为了评估儿童的身体素质,需进行20米往返跑测试。通过上述方法获得的结果能够显示感染幽门螺杆菌(Helicobacter pylori)的儿童与未感染儿童在身体素质水平上的差异。结合使用这些方法有助于回答一些关键问题,例如经由大豆传播的幽门螺杆菌感染是否会影响感染者身体素质,以及此类感染的真实疾病负担究竟是什么。
采用Cato Catz技术有助于检测感染者粪便中排出的寄生虫卵。首先将标准的Cato CATT模板置于显微镜载玻片中央。该模板中间有一个孔,用于盛装41.7毫克粪便,操作时需佩戴手套。
取2至3克新鲜粪便样本,置于一张报纸或铝箔纸上。然后将一块金属丝网或塑料网压在粪便上,以筛滤样本。使用小型塑料刮刀刮取网筛上的筛过物,并将其完全填满Cato Kat模板中的打孔孔洞。
用刮刀将孔洞中的内容物刮平,以去除多余的粪便样本。然后垂直取下模板,注意不要扰动已粘附在显微镜载玻片上的粪便样本。模板和刮刀可在使用洗涤剂和水清洗后重复使用。
接下来,将一片已在甘油孔雀绿溶液中浸泡至少24小时的赛璐玢膜覆盖在载玻片上的粪便样本上。为了将粪便涂成厚涂片,用一片干净的载玻片轻轻按压含有粪便样本的载玻片,使样本均匀分布在直径略小于载玻片宽度的圆形区域内。然后将载玻片避光放置,静置澄清30至60分钟。
30 至 60 分钟后,取出载玻片,在光学显微镜下以 40 至 100 倍放大倍数系统地检查厚涂片。计数虫卵数量,并按物种进行分类。然后将虫卵计数乘以 24,以获得标准化的感染程度估计值,该值通常以每克粪便中的虫卵数(EPG)表示。
为了实施尔曼技术,首先设置一个能够支撑玻璃漏斗的支架。取一个玻璃漏斗,并在其茎部连接一段橡胶管。用夹子或弹簧夹关闭橡胶管,然后将漏斗固定在支架上。
接下来,将一个筛子或锥形的金属丝网放入漏斗中。在此筛网上铺一层医用纱布。然后用自来水装满漏斗,并戴上手套确保装置不漏水。
取20至30克新鲜粪便,置于医用纱布中央,并确保其完全浸没于水中,必要时可添加更多水。然后将医用纱布包裹样品折叠起来。接着,从下方用人工光源照射漏斗两小时。
这是因为厄尔曼法基于这样的原理:毛圆线虫幼虫具有趋光性,因此会从被光照的粪便样本中迁移出来。两小时后,轻轻松开橡胶管上的夹子,将漏斗中下层50毫升的水样排入离心管中。接着,以600 × g离心5分钟。
然后小心倒出上清液,注意不要扰动沉淀。保留管内最后几滴液体,重新悬浮后吸取两滴溶液置于显微镜载玻片上。先在光学显微镜下以40倍放大倍数检查寄生虫的存在,再以100至400倍放大倍数进行虫种鉴定。
OID线虫的第一阶段幼虫具有活性,在显微镜下会主动移动,可用于建立穿梭实验。首先,测量出一条20米长的平坦直线跑道,并用锥形标志物标记距离。将心率监测器佩戴在受试者的手腕上,同时将相应的发射器绑在受试者胸部周围。
该设备用于测量受试者在测试前后的心率,从而监测其是否已达到最大努力程度。固定好监测设备后,要求儿童按照预录声音信号的节奏在跑道上来回跑动,信号起始对应的跑步速度为 8.5 千米/小时,每圈距离为 20 米。指示 20 米间隔的声音信号频率会自动以每分钟 0.5 千米/小时的增幅递增,以确保受试者开始新的 20 米跑动区间。
每次信号响起后,需在下一个信号出现前结束。若儿童连续两个20米区间未能跟上节奏,则停止测试。随后,记录最后一个区间的跑步速度。
参与者需完全完成测试,并记录参与者的年龄、性别以及达到的心率。测试结束时,需确认此心率为该儿童的最大心率。若未达到最大心率,则表明该儿童可能未尽最大努力,应重复测试。
现在,通过以下公式估算受试者的最大有氧能力(即最大摄氧量 VO₂max)。VO₂max = 31.025 + 3.238 × 速度(千米/小时) - 3.248 × 年龄(年) + 0.1536 × 速度(千米/小时) × 年龄(年)。以下两张图片展示了似圆线虫属(Ascaris lumbricoides)的虫卵,其长度约为 45 至 74 微米,宽度为 35 至 50 微米,具有较厚的卵壳壁,图中所示为已受精的似圆线虫卵。
注意Alta白蛋白涂层的外观,使其呈现金棕色。相比之下,此处显示的是一个未受精的a lumoid e卵。注意其缺乏外层涂层,且卵子比受精卵略显细长且体积较大。
总体而言,该图像显示了茶色毛圆线虫的虫卵。虫卵长约50微米,宽约22微米,呈长椭圆形,具有明显的极塞结构。相比之下,此处所见的钩虫卵具有非常薄的卵壳,其内围绕中央致密的细胞团,可见一圈清晰的环状间隙。
此图显示了S stir Corrales L一期幼虫。它们的长度约为180至380微米,口腔腔非常短。可以观察到明显的生殖原基,蓝色箭头已将其标出。
红色箭头指示幼虫的尾部,该尾部具有尖锐的末端。进行20米往返跑测试以测量体能。往返跑测试结果的解读可通过多种方式进行。
可以在年龄和性别相似,且在其他潜在相关健康状况、社会经济地位和文化习惯方面相近的感染与非感染儿童之间,比较其身体素质。还可以进一步尝试确定土壤传播蠕虫(STH)感染强度与身体素质之间可能存在的剂量反应关系,并将不同程度的多重寄生感染与身体素质进行比较。例如,此处的图表显示,感染鞭虫(T Tri Coria)的儿童其身体素质显著低于未感染鞭虫(T Tri Coia)的儿童。
观看本视频后,您应充分了解如何实施切口技术、裸片压片技术以及20米折返跑测试。这些方法将有助于评估大豆递质头盔感染是否对学龄儿童的身体素质产生影响。
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本研究探讨土壤传播的蠕虫(STH)感染对学龄儿童身体素质的影响。通过采用诊断技术评估感染状况,并利用20米折返跑测试评价儿童的体能水平。
评估土壤传播的蠕虫(STH)感染状况及其对体能的影响,为在资源有限的环境中评价公共卫生负担提供了一个与疾病相关的评估体系。标准化的诊断和体能测量方法有助于从机制上验证寄生虫感染与有氧能力及生产力下降之间的关联假设。通过生成关于感染强度和功能结局的定量、可重复的数据,该方法可支持被忽视疾病研究中的靶点验证和表型筛选。
该方法将土壤传播蠕虫感染的诊断确认与身体机能的评估相结合,适用于被忽视的传染病从早期发现到临床前研究的工作流程。