Name: 大鼠原位肝移植 (视频) | JoVE Journal
Uploaded: 2012-07-01T14:00:00.000+00:00
Duration: 18 min 25 s
Description: 学习大鼠原位肝移植的改进技术，通过精确的血管吻合和快速植入方法提高手术效率。本视频详细演示了从供体准备到受体植入的完整显微外科操作流程，为移植生物学研究提供可靠的实验方法。

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CT 获得了瑞士国家科学基金会（SCORE 项目编号 3232230-126233）的支持。本研究得到了 Artères 基金会、欧洲安斯泰来基金会和 Boninchi 基金会的资助。

1. 供体手术
<ol>
 <li>使用异氟烷通过锥形面罩对体重为200±20克的雄性大鼠进行麻醉（诱导浓度3%，术中维持2%，气流速度1升/分钟，FiO₂为70%）。</li>
 <li>行大范围正中及横行剖腹切口，并电凝双侧上腹部血管。</li>
 <li>切断镰状韧带，分离左膈静脉与肝上腔静脉，最后在两根7-0丝线结扎线之间切断膈静脉。</li>
 <li>切断左侧三角韧带和胃肝韧带。</li>
 <li>在7-0结扎线之间分离肝食管韧带及其动脉（电凝为可接受的替代方法）。</li>
 <li>游离肝下腔静脉至左肾静脉水平，将右肾静脉与其周围组织分离，并在其近端和远端分别使用10-0和7-0结扎线结扎后切断。</li>
 <li>在7-0结扎线之间切断右肾上腺静脉，并在轻柔牵引下切断肝脏后方的韧带以游离肝脏。</li>
 <li>游离胃脾静脉，并在其近端和远端分别使用10-0和7-0结扎线结扎后切断。</li>
 <li>在7-0结扎线之间切断肝固有动脉。</li>
 <li>游离胰十二指肠静脉，并在其近端和远端分别使用10-0和7-0结扎线结扎后切断。</li>
 <li>于距肝门1厘米处行小切口，将一根22G、3.5毫米的支架插入胆总管，并用7-0结扎线固定支架位置。</li>
 <li>通过阴茎背静脉注射10单位肝素，溶于1毫升生理盐水中。</li>
 <li>用21G针头穿刺门静脉（尽可能远离肝门），并用20毫升冷乳酸林格液（或其他保存液）轻柔灌注肝脏。同时在肾静脉下方切断下腔静脉以保证充分流出。肝脏冷灌注时间应持续1至2分钟。</li>
 <li>在胰十二指肠静脉远端切断门静脉。</li>
 <li>在支架周围结扎线的远端切断胆总管。</li>
 <li>完成肝下腔静脉的切断。</li>
 <li>紧贴膈肌切断肝上腔静脉并取出肝脏。</li>
 <li>将肝脏置于盛有冷乳酸林格液的容器中，并将容器放置于冰垫上。</li>
</ol>
2. 移植物制备
<ol>
 <li>将门静脉插入其套管中，然后将血管边缘外翻以暴露内膜。用7-0缝线固定套管上外翻的血管段。</li>
 <li>对肝下腔静脉进行相同的操作。</li>
 <li>在肝下腔静脉近端放置一个微型夹（4-6 mm长度），此操作可避免门静脉再灌注后发生血液流失。</li>
 <li>翻转肝脏，并从外向内在肝上腔静脉相对的两侧边缘各插入两根8-0聚丙烯缝线。</li>
 <li>将移植物浸入乳酸林格液中，置于0-4 °C冰箱中保存。</li>
</ol>
3. 受体操作
<ol>
 <li>使用异氟烷通过锥形面罩对体重为200±20克的雄性大鼠进行麻醉（诱导浓度3%，术中维持2%，气流速度1升/分钟，FiO₂ 70%），并将大鼠置于保温垫上。需注意，受体与供体的体重应相匹配（±40克）。</li>
 <li>在开腹前，皮下注射10 ml生理盐水，并肌肉注射0.03 g哌拉西林/他唑巴坦。</li>
 <li>行腹白线剑突至耻骨联合的正中开腹术。</li>
 <li>使用自锁止血钳翻转剑突，以更好地暴露肝脏。</li>
 <li>切断前方韧带，并在两根7-0结扎线之间离断左侧膈静脉。</li>
 <li>在7-0结扎线之间离断肝食管韧带及动脉（电凝为可接受的替代方法）。此步骤未在视频中展示（与供体手术相同）。</li>
 <li>游离下腔静脉至右肾静脉水平。</li>
 <li>在7-0结扎线之间离断右侧肾上腺静脉，并在轻柔牵引下切断后方韧带，使肝脏从其后部韧带中松解（此步骤未在视频中展示（与供体手术相同））。</li>
 <li>在胆总管分叉下方放置一根7-0结扎线，在其下方1毫米处再置一根结扎线，并在两者之间剪断。</li>
 <li>在肝门处游离肝动脉，并在7-0结扎线之间将其离断。</li>
 <li>轻柔分离左、右门静脉分支。注意避免损伤肝总动脉或胃脾静脉。</li>
 <li>将腔静脉环置于下腔静脉上，位置位于右肾静脉头侧。然后通过放置四根9-0缝线将血管壁固定于环上。</li>
 <li>对门静脉环和门静脉重复相同操作。</li>
 <li>通过阴茎背静脉注射10 IU肝素，用1 ml生理盐水稀释后注入。</li>
 <li>将麻醉浓度调至0.25%，FiO₂调至100%。</li>
 <li>在右肾静脉上方夹闭下腔静脉，随后在胃脾静脉上方夹闭门静脉。最后夹闭肝上段下腔静脉，确保夹闭部分包含至少2 mm的膈肌组织。</li>
 <li>靠近实质处剪断肝上段下腔静脉。</li>
 <li>剪断左、右门静脉分支，并切开其间隔。</li>
 <li>靠近实质处剪断下腔静脉，注意避免切到先前放置的任何缝线。取出肝脏并将移植物放入腹腔内。</li>
 <li>在移植物与受体的肝上段下腔静脉之间行端对端吻合。先从左至右连续缝合后壁，再从右至左缝合前壁。前壁缝线应保持松弛直至最后，以便在收紧两端前充分冲洗管腔内部。</li>
 <li>将吻合器的尾侧支插入腔静脉环手柄；然后将移植物的门静脉插入吻合器头侧支的切口中，使门静脉套管准确嵌入槽位。</li>
 <li>在用生理盐水冲洗受体门静脉的同时关闭吻合器，使套管顺利插入血管。用一根7-0环形结扎线将受体门静脉固定在其套管周围。</li>
 <li>移除吻合器。依次开放肝上段下腔静脉和门静脉的血管夹：此时门静脉血流已恢复。</li>
 <li>使用超细剪刀剪断9-0结扎线，移除门静脉环。</li>
 <li>将吻合器的尾侧支插入腔静脉环手柄；然后将移植物的下腔静脉插入吻合器头侧支的切口中，使腔静脉套管准确嵌入槽位。</li>
 <li>在用生理盐水冲洗受体下腔静脉的同时关闭吻合器，使套管顺利插入血管。用一根7-0环形结扎线将受体下腔静脉固定在其套管周围。</li>
 <li>移除吻合器。依次开放移植物与受体的下腔静脉微夹：此时静脉血流已恢复。</li>
 <li>对受体胆总管做部分切开，轻柔向头侧牵引，将先前插入移植物胆管内的支架自由端插入。用一根7-0环形结扎线固定支架。</li>
 <li>逐层缝合关闭动物体腔，使用5-0缝线。苏醒后可自由饮水和进食。</li>
 <li>根据当地机构的规范给予有效镇痛治疗，建议最短持续时间为24小时。</li>
</ol>
需要注意的是：根据实验设计的需要，可进行端对端的肝动脉吻合（在大鼠肝移植术后长期存活中，该动脉并非必需）。
4. 代表性结果
我们的团队在经过大约10次训练手术后，成功掌握了所述技术。在短期训练后，连续36例Lewis至Lewis及黑褐色大鼠至Lewis的移植手术实现了100%的长期（&gt;21天）存活率（目前已有大量同系肝移植受体存活超过12个月）。同系移植术后第1天的肝功能检测显示，天冬氨酸转氨酶（AST）中位数为84 U/l（51.7 - 92.7），丙氨酸转氨酶（ALT）中位数为172.5 U/l（127.5 - 240.2）。无肝期平均为14 ± 2分钟，其中最长步骤为肝上腔静脉吻合（连续缝合）时间，平均为9 ± 2分钟。
快速连接系统可将内径为1.55 mm的套管用于门静脉，将内径为2.40 mm的套管用于下腔静脉（受体体重为200 ±20 g）。相比之下，采用Kamada技术进行移植时，套管内径分别不能超过1.40 mm和2.16 mm（匹配品系和体重的大鼠）。如图7所示，快速连接环的设计可使受体血管保持在最佳拉伸状态，最大限度减少套管和血管长度的浪费，从而获得更接近生理状态的血流动力学结果。
<img src="/files/ftp_upload/4143/4143fig1.jpg" alt="微型血管夹及其尺寸，与硬币的对比大小，用于外科手术。" data-altupdatedat="1761809329000" data-alt="图 1"> 
图 1. 环形尺寸测量。
<img src="/files/ftp_upload/4143/4143fig2.jpg" alt="用于外科或实验室操作中精确定位夹持的微型夹具及施夹工具。" data-altupdatedat="1761809329000" data-alt="图 2"> 
图 2. 微型夹具尺寸。
<img src="/files/ftp_upload/4143/4143fig3.jpg" alt="手术器械示意图；止血钳和用于医疗设备研究的小型金属弹簧。" data-altupdatedat="1761809329000" data-alt="图 3"> 
图 3. 快速连接器套件。
<img src="/files/ftp_upload/4143/4143fig4.jpg" alt="显示缝合用缝线工具的外科器械、医疗设备设置、特写视图。" data-altupdatedat="1761809329000" data-alt="图 4"> 
图 4. 快速连接器已装填。
<img src="/files/ftp_upload/4143/4143fig5.jpg" alt="止血钳置于纹理表面；用于医疗操作中的夹闭。" data-altupdatedat="1761809329000" data-alt="图 5"> 
图 5. 快速连接器闭合状态。
<img src="/files/ftp_upload/4143/4143fig6.jpg" alt="带有泡沫平台和SHVC夹具的静力平衡示意图" data-altupdatedat="1761809329000" data-alt="图6"> 
图6. SHVC夹具。
<img src="/files/ftp_upload/4143/4143fig7.jpg" alt="套管技术比较示意图；血管吻合中的湍流和死腔。" data-altupdatedat="1761809329000" data-alt="图7"> 
图7. 传统套管法与快速连接器辅助套管吻合术的血流动力学比较。
<img src="/files/ftp_upload/4143/4143fig8.jpg" alt="大鼠皮肤移植手术；供体和受体已标记；关于移植技术的实验。" data-altupdatedat="1761809329000" data-alt="图8"> 
图8. 供体与受体皮肤的准备及切口操作。

<ol><li>Starzl, T. E., Marchioro, T. L., Porter, K. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Experimental+and+clinical+observation+after+homotransplantation+of+the+whole+liver%5BTitle%5D)+AND+%22Revue+internationale+d%27hepatologie%22%5BJournal%5D)">Experimental and clinical observation after homotransplantation of the whole liver.</a> Revue internationale d'hepatologie. 15, 1447(1965).</li>
<li>Starzl, T. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evolution+of+liver+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Hepatology%22%5BJournal%5D)">Evolution of liver transplantation.</a> Hepatology. 2, 614S-636S (1982).</li>
<li>Kamada, N., Calne, R. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Orthotopic+liver+transplantation+in+the+rat.+Technique+using+cuff+for+portal+vein+anastomosis+and+biliary+drainage%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">Orthotopic liver transplantation in the rat. Technique using cuff for portal vein anastomosis and biliary drainage.</a> Transplantation. 28, 47(1979).</li>
<li>Kashfi, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+review+of+various+techniques+of+orthotopic+liver+transplantation+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation+proceedings%22%5BJournal%5D)">A review of various techniques of orthotopic liver transplantation in the rat.</a> Transplantation proceedings. 37, 185-188 (2005).</li>
<li>Hori, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comprehensive+and+innovative+techniques+for+liver+transplantation+in+rats%3A+A+surgical+guide%5BTitle%5D)+AND+%22World+Journal+of+Gastroenterology%3A+WJG%22%5BJournal%5D)">Comprehensive and innovative techniques for liver transplantation in rats: A surgical guide.</a> World Journal of Gastroenterology: WJG. 16, 3120(2010).</li>
<li>Oldani, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+novel+technique+for+rat+liver+transplantation+using+Quick+Linker+system%3A+a+preliminary+result%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Surgical+Research%22%5BJournal%5D)">A novel technique for rat liver transplantation using Quick Linker system: a preliminary result.</a> Journal of Surgical Research. 149, 303-309 (2008).</li>
<li>Nosaka, T., Bowers, J. L., Cay, O., Clouse, M. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Biliary+complications+after+orthotopic+liver+transplantation+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Surg.+Today%22%5BJournal%5D)">Biliary complications after orthotopic liver transplantation in rats.</a> Surg. Today. 29, 963-965 (1999).</li>
<li>Li, G. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High+incidence+of+biliary+complications+in+rat+liver+transplantation%3A+can+we+avoid+it%5BTitle%5D)+AND+%22World+J.+Gastroenterol%22%5BJournal%5D)">High incidence of biliary complications in rat liver transplantation: can we avoid it.</a> World J. Gastroenterol. 17, 3140-3144 (2011).</li>
<li>Peng, Y., Gong, J. P., Yan, L. N., Li, S. B., Li, X. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Improved+two-cuff+technique+for+orthotopic+liver+transplantation+in+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Hepatobiliary+Pancreat.+Dis.+Int%22%5BJournal%5D)">Improved two-cuff technique for orthotopic liver transplantation in rat.</a> Hepatobiliary Pancreat. Dis. Int. 3, 33-37 (2004).</li>
<li>Urata, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Decreased+survival+in+rat+liver+transplantation+with+extended+cold+preservation%3A+role+of+portal+vein+clamping+time%5BTitle%5D)+AND+%22Hepatology%22%5BJournal%5D)">Decreased survival in rat liver transplantation with extended cold preservation: role of portal vein clamping time.</a> Hepatology. 28, 366-373 (1998).</li>
</ol>

未声明任何利益冲突。

目前的大鼠肝移植模型易于建立。根据我们的经验，把握几个关键点有助于将死亡风险降至最低（≤20%）。术后早期死亡（再灌注后3小时内发生）大多由肠梗死引起，其原因为门静脉阻断时间过长。因此建议无肝期应控制在15分钟的理想范围内（20分钟以内仍可接受）。中心性空气栓塞也可能导致猝死，故在吻合前必须彻底冲洗所有静脉。
术后第1至第3天之间的死亡通常由肝功能衰竭或下腔静脉血栓形成引起。因此，在供体器官切除前应避免对移植物进行任何剧烈的灌注冲洗（我们以约60秒时间灌注20 ml），并确保适当的低温保存（完全浸入0–4 °C的乳酸林格液中）。通过尽量减少对血管内膜的操作并保持其完整性，可降低血栓形成的风险。我们不建议术后使用抗凝治疗。
术后第4天至第9天之间的死亡通常与细菌性胆管炎相关7。根据我们的经验，术前给予单次剂量的哌拉西林/他唑巴坦（0.03 g）足以最大限度降低胆总管感染的风险。
10天后死亡事件较为罕见。然而，由于缺乏动脉血流，可能会出现一些胆管问题，如胆汁淤积8。根据研究者的需要，可考虑进行动脉化处理9。值得注意的是，冷缺血时间长达24小时仍可被视为可接受10。
快速连接系统最初设计用于进行带有三个套管吻合的肝移植手术（无肝期极短）。然而，三套管技术需要对肝上腔静脉（SHVC）套管使用非常小的卡尺，由于存在肝脏流出道问题的风险，该技术尚未被广泛接受11-14。因此，我们仅在需要热缺血时间短于十分钟的情况下，倾向于采用快速连接系统辅助的三套管技术。但在大多数研究中，植入阶段长达15-18分钟仍可接受，此时可采用两套管技术，实现更生理性的肝上腔静脉引流。如本视频论文所示，我们常规仅在植入手术的第二阶段使用快速连接系统。尽管放置快速连接手柄需要额外的手术时间，但该步骤风险极低，并且由于套管插入更为简便，可显著缩短关键的无肝期。快速连接系统的其他优势还包括移植物与受体血管的更好对位，以及使用更宽的套管，相比以往描述的技术（包括Kamada et al. 所述技术）具有更优的血流动力学效果6（图7）。

<table><tbody><tr><td>&lt;strong&gt; 工具 / 试剂&lt;/strong&gt;</td><td>&lt;strong&gt; 公司&lt;/strong&gt;</td><td>&lt;strong&gt; 目录号&lt;/strong&gt;</td><td>&lt;strong&gt; 评论&lt;/strong&gt;</td></tr><tr><td>门静脉套管</td><td> &lt;a href=&quot;http://altecweb.com&quot; 目标=&quot;空白&quot;&gt;altecweb.com&lt;/a&gt; 或 &lt;a href=&quot;http://smiths-medical.com&quot; 目标=&quot;空白&quot;&gt;smiths-medical.com&lt;/a&gt;</td><td> Coil 01-96-1729 800/100/420</td><td> 内径：1.55 mm &lt;br/&gt; 壁厚：0.30 mm &lt;br/&gt; 长度：3.5 mm</td></tr><tr><td>肝下腔静脉套管</td><td> &lt;a href=&quot;http://altecweb.com&quot; 目标=&quot;空白&quot;&gt;altecweb.com&lt;/a&gt; 或 &lt;a href=&quot;http://smiths-medical.com&quot; 目标=&quot;空白&quot;&gt;smiths-medical.com&lt;/a&gt;</td><td> Coil 01-96-1733 800/100/540</td><td> 内径：2.40 mm &lt;br/&gt; 壁厚：0.30 mm &lt;br/&gt; 长度：3.5 mm</td></tr><tr><td>胆总管支架</td><td>普通22G静脉留置针</td><td>&amp;nbsp;</td><td>&amp;nbsp;</td></tr><tr><td>7-0 丝线结扎</td><td>&lt;a href=&quot;http://georgetiemann.com&quot; 目标=&quot;空白&quot;&gt;georgetiemann.com&lt;/a&gt;</td><td>160-1226-7/0</td><td>&amp;nbsp;</td></tr><tr><td>10-0 prolene</td><td>&lt;a href=&quot;http://ethicon.com&quot; 目标=&quot;空白&quot;&gt;ethicon.com&lt;/a&gt;</td><td>&amp;nbsp;</td><td>&amp;nbsp;</td></tr><tr><td>9-0 prolene</td><td>&lt;a href=&quot;http://ethicon.com&quot; 目标=&quot;空白&quot;&gt;ethicon.com&lt;/a&gt;</td><td>&amp;nbsp;</td><td>&amp;nbsp;</td></tr><tr><td>8-0 prolene</td><td>&lt;a href=&quot;http://ethicon.com&quot; 目标=&quot;空白&quot;&gt;ethicon.com&lt;/a&gt;</td><td>&amp;nbsp;</td><td>&amp;nbsp;</td></tr><tr><td>直头显微镊子</td><td>s-and-t.net</td><td>FRC-15RM-8 </td><td>&amp;nbsp;</td></tr><tr><td>弯头显微镊子</td><td>s-and-t.net</td><td>FRS-15-RM-8 </td><td>&amp;nbsp;</td></tr><tr><td>解剖针持</td><td>s-and-t.net</td><td>B-15-8.2 </td><td>&amp;nbsp;</td></tr><tr><td>吻合针持</td><td>rumex.net</td><td>8-021T</td><td>&amp;nbsp;</td></tr><tr><td>微型钳</td><td>&lt;a href=&quot;http://finescience.com&quot; 目标=&quot;空白&quot;&gt;finescience.com&lt;/a&gt;</td><td>18055-03</td><td>6 × 1 mm</td></tr><tr><td>微型钳夹施加器</td><td>&lt;a href=&quot;http://finescience.com&quot; 目标=&quot;空白&quot;&gt;finescience.com&lt;/a&gt;</td><td>18057-14</td><td>&amp;nbsp;</td></tr><tr><td>肝上腔静脉夹</td><td>&lt;a href=&quot;http://pharmap.ch&quot; 目标=&quot;空白&quot;&gt;pharmap.ch&lt;/a&gt;</td><td>13.349.14</td><td>&amp;nbsp;</td></tr><tr><td> 快速连接环</td><td> &lt;a href=&quot;http://dltchiropody.co.uk&quot; 目标=&quot;空白&quot;&gt;dltchiropody.co.uk&lt;/a&gt;</td><td> 步骤 10</td><td> 改良的手术刀片</td></tr><tr><td> 快速连接器吻合装置</td><td>pharmap.ch</td><td> UD-04-275</td><td> 改良Kocher法&amp;rsquo;s 钳</td></tr></tbody></table>

大鼠原位肝移植

Orthotopic Liver Transplantation in Rats

肝脏移植领域的临床进展在很大程度上得益于动物模型的支持1,2。自1979年Kamada et al.3首次发表大鼠原位肝移植模型以来，尽管已有多种替代技术被提出4，该模型仍一直是金标准。然而，由于其学习曲线陡峭，该模型的广泛应用受到限制5。
在本视频论文中，我们展示了一种对 Kamada 双套管技术进行的简单且易于建立的改良方法。肝上腔静脉吻合采用连续缝合法手工完成，而门静脉和肝下腔静脉吻合则使用快速连接套管系统6完成。快速连接套管试剂盒的制备过程在另一篇视频论文中展示。

我们介绍一种易于建立的、用于大鼠原位肝移植的经典双袖套技术的改良方法。

肝移植领域的临床进展在很大程度上得益于动物模型的支持1,2。自首例原位大鼠肝移植模型……发表以来

在大鼠中进行原位肝移植是一项技术要求较高的手术，需要经过显微外科训练才能熟练掌握。尤其是在移植阶段，操作的精确性和速度是手术成功的关键。在接下来的视频中，我们将展示成功移植的每一个基本步骤，并讲解如何利用一种快速临床装置来简化移植阶段的操作。观看视频。通过横向切口打开供体。切断镰状韧带，暴露下腔静脉。将左侧膈静脉从下腔静脉上分离，然后用两道丝线结扎并切断。切断胃骨韧带，然后在结扎线之间切断食管韧带。轻轻牵拉小肠和大肠，以暴露膈上腔静脉。左侧打开腹膜，轻柔地游离下腔静脉周围组织。分离右侧肾上腺静脉，然后用七号丝线结扎并切断。将肝脏向左侧牵拉，并轻柔地保持牵引状态。切断肝后韧带和右侧三角韧带。结扎右肾静脉近端，使用10-0尼龙线进行结扎。在远端将右肾静脉和右肾动脉一起结扎，随后离断右肾静脉。显示完全游离的下腔静脉概览。肝门及门静脉区域解剖结构概览，包括肝固有动脉、胆总管、胃脾静脉。胰腺钩突。分离胃脾静脉，并在其两端分别用10-0和7-0缝线结扎后切断。在7-0缝线之间切断肝总动脉。最后，切断胰静脉。展示了分离的门静脉的概览。在胆总管与胰腺组织交界处将其部分切开。插入一根3.5毫米的22 G支架，并牢固固定。注射10单位肝素。随后通过门静脉用20毫升低温林格乳酸盐溶液灌注肝脏，同时切开远端下腔静脉以确保充分流出；在完成共同肠管远端部分的切断后，再切断门静脉远端。然后切断肝下下腔静脉，同时切断肝上下腔静脉，并将其游离至膈肌，将整个肝脏连同膈肌一并切除，浸入4摄氏度的林格乳酸盐溶液中。将大隐静脉插入其小腿段，然后进行转流以暴露内膜，最后使用7-0缝线将其固定在小腿上。对对侧大隐静脉小腿段进行相同操作。在对侧下腔静脉的最头侧位置放置一个微血管夹。将肝脏翻转，并从下腔静脉对侧外侧边缘由外向内穿过两根ATO聚丙烯缝线。受体动物在温暖垫上维持异氟烷麻醉，剂量为10毫升。在腹正中切口开腹前，皮下注射正常细胞系，切口位于耻骨上方，将膀胱向后翻转以更好地暴露肝脏。用7-0线结扎胆总管，并在其分为左右两支前切断。准确分离门静脉分支。将下腔静脉环放置于左肾静脉头侧的下腔静脉周围。首先在血管壁的右边缘处穿过第一针9-0缝线，然后将其固定在预先确定位置的下腔静脉环上。第二针穿过对侧边缘并固定。第三针在腹侧位置固定。最后，将第四根缝线固定于背侧位置。将左侧的血管环翻转后，第一针经后壁穿过，并将血管提起。随后放置门静脉环，并将其结扎固定于后支。第二针穿过左门静脉分支的边缘，并固定第三针至右门静脉边缘，然后打结固定。最后一针穿入门静脉前壁，并在夹闭前固定到位。最后对下腔静脉进行一次清理，依次阻断下腔静脉和门静脉。随后阻断肝上腔静脉并切开至肝实质，切断左、右门静脉分支，并切开其间隔。再将下腔静脉切断至肝实质，随后取出肝脏。下腔静脉和门静脉通过两个环被安全地保持开放状态。将移植物置入腹腔内，并将NATO缝线固定于下腔静脉切口的左侧边缘，第二根缝线固定于右侧边缘。伊朗式后壁缝合术从左至右进行，以避免将肝实质组织纳入缝合线中。前壁缝合线保持松弛，以便在完全闭合前充分冲洗。该操作可避免空气栓塞。将固定器的近端分支插入套管环手柄中，同时将套管的远端部分穿过其颅侧分支的狭缝。在关闭固定器的同时，用生理盐水冲洗受体的Vina套管。为协助套管远端的插入，通过一个七号缝线将Porter固定于套管远端部分。移除分流器，并依次撤除肝动脉夹和门静脉夹以恢复门静脉血流，通过剪断的方式移除门静脉环。纳米结扎线则采用相同技术重新建立。受体的胆总管保持牵引状态，并通过一个小切口插入支架。环形结扎线固定其位置。融合移植物的概览如图 a 所示。

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大鼠原位肝移植是生物医学研究中不可或缺的实验模型。本文介绍了我们采用50%部分移植物并进行肝动脉重建的大鼠原位肝移植手术操作步骤。...

部分原位肝移植伴肝动脉重建的大鼠手术操作

我们介绍了“快速连接器”装置的设计，该装置可简化大鼠原位肝移植手术。...

制造用于简化大鼠肝移植的器械与工具

辅助性肝移植可在急性肝衰竭时提供临时支持，直至衰竭肝脏再生。异位辅助性肝移植（HALT）联合门静脉动脉化（PVA）可提供充分的肝功能。我们建立了大鼠的类似技术，以研究门静脉动脉化对移植物形态和功能的影响。...

急性肝衰竭中带门静脉动脉化流量调节的异位辅助性大鼠肝移植

本文介绍了一种大鼠部分肝脏移植联合动脉再通的实验方案。具体而言，切除了70%的肝脏 体内...

再动脉化大鼠部分肝移植术 在体 以血管为导向的70%肝切除术

在大鼠原位肝移植中，肝上腔静脉（SHVC）的重建仍是一个困难的步骤。本文介绍了一种利用新型磁性吻合技术进行大鼠SHVC重建的逐步操作方案。...

一种采用新型磁性吻合技术进行肝上腔静脉重建的原位肝移植大鼠模型

本研究的目的是改进大鼠原位肝移植模型，以更好地模拟人类肝移植并提高受体存活率。本方法通过将供体肝脏的肝总动脉与受体肝脏的肝固有动脉相吻合，重建肝脏动脉血流。...

异位肝移植大鼠模型中动脉重建后并发症减少

本文详细描述了如何建立大鼠无肝期（肝脏缺血）动物模型，以促进肝移植后缺血-再灌注损伤的基础研究。...

通过模拟大鼠肝移植模型中的血流动力学变化研究器官缺血-再灌注损伤

在本实验方案中，我们探讨了在小鼠中成功实施原位肝移植（OLT）模型的方法。此外，还讨论了在小鼠成功进行OLT后，用于进一步分析同种异体移植物通畅性的辅助技术，特别是利用微型计算机断层扫描（microCT）成像的方法。...

利用显微计算机断层扫描血管造影术在小鼠中成功实施原位肝移植

本文所述的大鼠异位辅助性肝移植方案为研究肝同种异体移植物排斥反应的机制提供了一种实用的实验工具。该模型有助于减轻大鼠原位肝移植过程中的手术难度和动物应激反应。...

利用输尿管肝管吻合术的异位辅助性全肝大鼠移植模型用于同种异体移植物排斥研究

本方案描述了一种改良的大鼠原位左肺移植技术，重点在于降低手术难度并提高存活率。...

大鼠原位左肺移植

学习大鼠原位肝移植的改进技术，通过精确的血管吻合和快速植入方法提高手术效率。本视频详细演示了从供体准备到受体植入的完整显微外科操作流程，为移植生物学研究提供可靠的实验方法。

大鼠原位肝移植

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