术中检测微小子宫内膜异位症：一种针对腹膜完整性缺失相关盆腔疼痛检测与治疗的新范式

以下实验的总体目标是为治疗女性盆腔疼痛的临床医生提供一种简便的方法，以明确提示隐匿性子宫内膜异位症的存在及其范围。该方法首先通过检查可见的子宫内膜异位病灶，识别明显的病变；第二步应用亚甲蓝染料，可显示出在常规腹腔镜检查中可能被遗漏的隐匿性子宫内膜异位区域。

接下来，将所有蓝色染色区域进行切除，以彻底清除患者的病灶。通过扫描电子显微镜获得的结果显示，该方法能够清除影响腹膜下层细胞的隐匿性子宫内膜异位病灶，从而阻断月经血或排卵期血液与支配盆腔的感觉神经接触，进而缓解疼痛。该技术的意义不仅在于治疗，同时也涉及子宫内膜异位症的诊断，因为它使我们能够识别出那些微小甚至肉眼不可见的子宫内膜异位病灶，这些病灶可能破坏腹膜表面，使血液与组织下方的神经发生接触，从而解释患者所经历的疼痛症状。

通常在排卵或月经期间，会有一些血液进入盆腔。盆腔和腹腔的内衬含有一层完整的间皮细胞，可防止这些血液或血液中引起疼痛的因子与感觉神经纤维接触。在子宫内膜异位症女性中，炎性的子宫内膜样细胞可导致腹膜细胞失去细胞间的连接，从而使血液能够进入深层组织和神经纤维。

通过扫描电子显微镜可以观察到间皮细胞之间的这些间隙，这些间隙也是蓝色染料能够对下方组织进行染色的原因。I. 对于经历慢性盆腔疼痛的女性，首先会进行访谈以确定其病史以及疼痛发生时间与月经周期关系的详细信息，同时记录伴随症状，包括肠易激惹相关主诉或膀胱相关主诉。此外，在完成患者筛选后，会对患者进行体格检查。

务必在进行腹腔镜手术的女性患者术前征求其同意，以备可能切除子宫内膜异位病灶并将其组织用于科研。通过脐部5毫米穿刺套管及下腹部其他5毫米套管，采用标准技术实施腹腔镜手术。仔细检查盆腔，将术中发现的子宫内膜异位病灶与患者术前疼痛部位的定位进行对照分析。

随后将亚甲蓝染料与无菌生理盐水按1:200比例混合，使用抽吸针将溶液注射至盆腔表面。然后进行负压冲洗，以清除多余的染料并清洗腹膜表面。再次仔细检查盆腔，记录任何出现蓝色染料摄取的区域。

尽可能切除受累的腹膜区域。切除完成后，检查盆腔以确认无出血。随后释放CO2气体，取出器械，并使用组织粘合剂关闭切口。

在恢复室静卧一小时后，患者可回家。为通过扫描电子显微镜记录隐匿性子宫内膜异位症，首先将腹膜组织切片用缝线固定于无菌的Telfa垫上，以展平标本并保持腹膜内侧朝上的方向。随后将组织切片置于戊二醛固定液中以进行扫描电镜（SEM）处理。固定充分后，可在另一位既往因膀胱子宫内膜异位症接受过切除手术且该区域已无疼痛症状的患者中，对样本进行扫描电子显微镜分析。

染料未染色腹膜表面，这支持了蓝色染料染色与盆腔疼痛存在之间具有相关性。此腹膜表面图像来自一名患有慢性盆腔疼痛且伴有经期加重的膀胱症状的女性。腹腔镜图像在应用蓝色染料前拍摄，仅腹腔镜光源的反射即显示出疑似子宫内膜异位症透明病灶的区域（如本图中箭头所示）。在同一区域拍摄的图像可见，应用于膀胱的蓝色染料染色了腹膜的特定部分。

此图像显示了覆盖膀胱的腹膜切除样本，此图像展示了通过扫描电子显微镜观察到的该区域细胞。样品按照标准程序制备，并溅射镀上厚度为20纳米的金铂合金。可见腹膜表面被推测为子宫内膜异位症的细胞所覆盖，且腹膜间皮细胞之间的细胞连接存在间隙，暴露出下方的细胞外基质。

而以相同方式制备的正常腹膜样本的扫描电子显微镜图像显示，正常腹膜的上皮细胞紧密连接。如您所见，这是一种相当简单的技术，可在腹腔镜手术中加以应用，有助于识别导致腹膜表面通透性的微小且肉眼不可见的子宫内膜异位病灶。通过完整切除整个病灶以及所有子宫内膜样细胞，您将为患者提供最佳的疼痛缓解机会。