2013年5月5日
我们介绍了“快速连接器”装置的设计,该装置可简化大鼠原位肝移植手术。
在 JoVE 最近发布的一篇视频论文中,我们介绍了使用快速连接装置以简化大鼠肝移植操作。该装置目前尚未在市场上销售,但无需专业技能即可自行制作。在本视频中,我们将介绍如何利用常见的实验室材料设计并制作一套完整的装置套件。
观看视频。大鼠原位肝移植快速连接套件由一个近似器、一个用于下腔静脉的环和一个较小的用于门静脉的环组成。将10号手术刀片用胶带固定在木板上,将环的中心置于显微镜下。环的位置应距离手术刀槽直线1.2厘米处。
将金刚石钻头安装到高速旋转装置上,钻出直径为2毫米的孔。使用fuser iconic金刚石钻头扩大孔径。对于体重在180至240克之间的大鼠,孔的直径应为2.6毫米,用于植入端口手柄。
按照模板所示设计手柄的外部形状。如图一包含的部分所示,将电钻改装成微型台式磨床,并去除形状外的刀片部分。最后,使用低速旋转刷对部件进行倒圆处理。
通过在显微镜下将直式外科持针器或考克斯止血钳的一个分支近端部分进行改造,获得该近似器。使用高速微型台式磨床,在两侧制作对称的凹槽,以便手柄能够完全滑入。在长臂上切割一条纵向狭缝,并确认长臂的中心与位置合适的手柄处于同一轴线上。
在长臂末端朝向中心的位置设计一个凹口。尽可能使分支变细。最后,使用低速旋转刷对部件进行修整。犊牛卡尺根据大鼠的体重和品系而有所不同。
然而,土地应始终保持在约四毫米左右。参见表一中的孔径范围。取一根细的 bo 聚乙烯管,并用 10 号手术刀将一端边缘修圆。
在距离边缘 0.5 毫米处设计一条凹槽。现在小心地沿凹槽向下切割。在管壁上切出一至两个贯穿管壁厚度的切口。
这些工具将有助于在移植物制备和移植过程中操作小牛血管。最后,在距离边缘四毫米处切断小牛血管。我们展示了如何构建一个套件,该套件由门静脉及其小牛血管用的环、肝静脉及其小牛血管用的环,以及一个吻合器组成。
这些工具通过辅助套管插入来促进肝脏再植。融合完成后立即移除所有金属部件,因此无论选择何种环形尺寸或形状变化,该套件均可无限次重复使用。与近似器的对齐是最重要的因素。
另一个重要因素是沟槽的厚度,其底部厚度不应小于0.5毫米。例如,在图片下方部分,沟槽形状已正确成形,形成对比;而在上方部分,两个段之间的金属桥过薄,在最终刷制阶段可能导致断裂,如此处所述措施所示。
若无问题发生,这些仪器有可能永久使用。
本文介绍了“快速连接器”装置的设计与使用方法,该装置可促进大鼠原位肝移植。该装置可使用常见的实验室材料制备,便于研究人员获取和应用。
原位大鼠肝移植仍然是评估肝脏治疗手段和外科技术的关键临床前模型。快速连接装置通过利用常见的实验室材料在实验室内低成本自制移植工具,提高了该模型的可及性。该装置通过提高手术的可重复性并降低疾病模型构建过程中的技术变异性,有助于在早期发现阶段进行机制性风险排除。
快速连接装置通过支持靶点验证和先导化合物识别阶段的稳健模型生成,整合到发现工作流程中。