2014年11月16日
我们提供一种保存完整树木韧皮部并对其进行观察前处理的技术。我们构建了一种称为“韧皮部三明治”的装置,可用于引入并观察栖息于韧皮部组织中的节肢动物、微生物及其他生物体。
本实验的总体目标是构建一种名为AOL三明治的装置,该装置可用于引入并观察栖息在秋季植物组织中的节肢动物、微生物及其他生物。所提供的实验方案经过适当调整后,已成为研究人员和教育工作者研究树皮甲虫、螨类、线虫和真菌的有效工具。首先,需选定一棵合适的树木。
然后去除树皮以暴露F flom层。一旦取出flom,就将其带回实验室,或置于两片有机玻璃之间。待其密封并紧密夹紧后,即可引入实验生物体。
在研究中,松树具有一种独特的流体层,其厚度可达数毫米。所研究的生物体将决定需要使用哪种F流物种。我们目前位于美国亚利桑那州北部的一片黄松林中。
我们正在寻找一棵理想的树,其体型适中,树冠较大,且下部枝条较少。在这里我们找到了一棵合适的树。这些特征可能使流胶较为浓稠且更容易清除,因为在清除流胶时,必须将每个枝条周围都切割到。
以下是我们用于采伐树木的设备示例。请注意,伐树具有危险性,必须由具备适当安全防护装备的有经验人员操作。待树木安全倒地后,开始清除树枝。
然后将树干切成便于处理的段落,通常每段长约六到八英尺,具体长度取决于树木的直径。现在开始去除树皮。以下是用于完成此操作的工具示例。
在此过程中,John Ice 至关重要,需仔细刮除树皮,直至显露出白色或浅黄褐色的迹象,这表示已到达形成层。切记不可损伤此层,否则会大幅降低其后续的可用性。当树干的某一部分已充分去皮后,使用刀具切下完整的边材部分。
必要时,在切割下层的同时小心向上提起该层。请注意,某些树种比其他树种更容易清除落叶。耐心是关键。
处理较难处理的树木时,夏季通常是清理掉落物较为容易的季节。收集到五到七段样本后,我们将它们转移到带入野外的真空密封袋中。最好将这些袋子存放在略高于冰点的环境中。
现在我们已完成本方案的野外部分,返回实验室来制作三明治。以下是制作三明治所需的材料。底部放置了各种有机玻璃板和配对组件。
使用对苯二甲醛密封边缘,并使用夹具确保有机玻璃与流道之间无间隙。将有机玻璃部件切割并钻孔后,用90%或更高浓度的乙醇进行灭菌,然后开始构建 Sandwich 结构,取出一片新的流道材料并裁剪至合适尺寸。
应选择适合该块有机玻璃的尺寸。也可使用玻璃替代有机玻璃。还可制作不同大小的培养皿,以适应不同生物体及实验时长的需求。
例如,一对树皮甲虫可能在一个月内利用一块面积为四平方米的倒木,但如果研究仅持续数天,则只需一块面积为一平方米的倒木。请注意,您也可以更改有机玻璃板上入口的数量,以同时引入多个生物体。这有助于观察不同物种之间的竞争或捕食行为。
现在使用两英寸的对二甲苯(paraform)来密封边缘。也可使用其他材料进行密封,例如非-G型环氧胶或凡士林。接下来,在边缘周围放置足够数量的夹具,以将有机玻璃牢固地固定在流动层上。
现在我们准备介绍研究用生物体。在我们的实验室中,我们经常使用所提供的方案来观察树皮甲虫及其相关生物。该方案为我们提供了绝佳的机会,以观察每日的掘道长度、产卵量等多种现象。
我们还可以提取化学释放物、火花甲虫的产物,并在之后进行分析;或者我们可以实施处理并观察其响应。此处,一只树皮甲虫正试图远离声学处理区域。我们还观察到螨类、线虫以及捕食性昆虫会利用该实验方案。
观看本视频后,您应能够构建一个流动式三明治装置,并根据特定研究需求进行调整。除了作为一种有效的研究工具外,该方法还非常适合从小学到大学各阶段学生的教学与探索性学习。
本文介绍了一种保存树木韧皮部并为其观察做准备的方法。该技术涉及构建一种“韧皮部三明治”,以促进对栖息于韧皮部组织中各类生物的研究。
研究树木组织内的节肢动物和微生物群落,有助于深入了解可为生物杀虫剂开发和森林健康管理提供依据的生态相互作用。韧皮部夹心技术能够实现对生物行为的可控观察,支持害虫防治研究中的靶标验证。该方法通过阐明与转化生物标志物鉴定相关的宿主-病原体及宿主-昆虫相互作用动态,有助于降低早期发现阶段的风险。
该方法位于从假设验证到先导物识别的发现连续体之中,可支持早期生物学去风险化及检测方法开发的工作流程。