在视动反应在斑马鱼视力的定量测量

该程序的总体目标是使用视动反应或 OKR 测量成年斑马鱼的视力。这是通过首先构建由旋转鼓和数据采集设备组成的 OKR 设备来实现的。接下来，将鱼固定在设备内并引发 OKR。

然后，使用不同的大小分级和改进的楼梯方法确定双眼和单眼空间敏锐度阈值。最后，计算鱼的视力。最终，可以获得结果，显示鱼群随着年龄的增长或患病治疗鱼的视力变化，通过视动反应。

与现有方法（例如汽车反应或 OMR）相比，该技术的主要优点是使用 OKR 测量视力更具临床相关性和可靠性。光动力学研究是使用定制的记录设备进行的，该设备使用直径为 14.5 厘米的旋转鼓、具有可调光强度设置的立体显微镜、计算机和用于捕获图像和记录的相机。计算机作的微控制器用于调整旋转滚筒的速度和旋转方向，使用保持在标准条件下的鱼。

通过在 0.016% trica 中麻醉鱼 2 到 3 分钟来开始分析，然后将其放在一个小平台上，眼睛和鳃悬在边缘，以保持鱼不动，同时避免受伤。将薄海绵或毛巾放在鱼的身体上，并在鱼身上钉上两到三块泡沫，确保尾巴的运动受到限制。将鱼放置在适合 OKR 记录设备旋转滚筒内的圆柱形注水水箱中。

使用平台上的磁铁将鱼直立放置，眼睛距离滚筒边缘约 7.3 厘米。一旦鱼从麻醉中苏醒并观察到正常的呼吸和随机的眼球运动，将每度 0.07 个周期或 CPD 的基本分级放入旋转的滚筒中，并使用计算机控件开始旋转和视频捕获。在基本评分引发初始 OKR 后，请短暂暂停旋转，并将评分替换为空间频率较高的较小分级。

按顺序较小的分级重复此过程，直到无法再引出 OKR。若要验证修改后的阶梯方法后 OKR 的损失，请使用导致 OKR 的最小分级重新测试，然后使用未能引发响应的分级进行重新测试。验证 OKR 的损失以获得单眼视力测量值。

在对面眼睛附近的条纹上放置黑色塑料遮挡物，然后重复数据收集过程。然后通过重新定位乳房并进行测量来切换到另一只眼睛。使用鱼缸下方的参考测量条记录每只眼睛与条带的距离，以便进行准确的视力测量以确定视力。

使用以下公式计算 CPD，其中 A 是从镜头中心到分级的距离，H 是观察到 OKR 的最小分级的一个周期的长度。对于组合视力测量，使用从左眼和右眼计算的平均值。本视频中演示的程序可以确定许多年龄的斑马鱼的视力。

记录的最佳双眼空间敏锐度为 0.74 CPD，如图所示。双眼敏锐度通常随着年龄的增长而增加，但在大约 12 个月大后，当测量 5 个月大的野生型鱼的视力与年龄匹配的 LRP 相比时，双眼敏锐度趋于平稳。两条 bugeye 鱼 即眼睛发育不对称。

我们发现，与双眼敏锐度相比，LRP 两条虫眼鱼的敏锐度显著降低。如图所示，双眼求和的观察方式与人类视觉类似。对于某些个体鱼，双眼敏锐度通常比独立测量的右眼或左眼敏锐度高 5% 到 10%。

差异是 25% 的改进。观看此视频后，您应该对如何使用 OKR 确定成年斑马鱼的视力有很好的了解。