2013年8月19日
交叉共轭的十字形基于1,4 - 二苯乙烯基-2,5 - 双(芳基乙炔)苯撑苯并二恶唑核的荧光基团可用于定性识别多样化的路易斯酸和路易斯碱的分析物。此方法依赖于添加的分析物时所观察到的cruciforms的发光颜色的差异。在结构上密切相关的物种,可以彼此区分开来。
该程序的总体目标是使用基于十字形几何形状的小分子菌群四分体来分析和定性区分来自几类化合物的分析物。这是通过首先在几种不同的溶剂中制备这些十字形传感器的溶液来实现的,从而利用它们高度依赖溶剂的发射。第二步是将这些溶液暴露于目标分析物中,包括羧酸、有机酸或有机胺,它们可以以固体或溶液的形式添加。
接下来,在 365 纳米紫外光下照射组合的传感器分析物溶液,使它们在可见光区域发光。这些发光颜色是使用标准数码摄影设置拍摄的。最后一步是生成发射颜色面板,用于检测不同分析物溶液发射的定性差异。
最终,这种荧光方法将有助于快速鉴定制药和食品工业中的常见分析物。与色谱法等现有方法相比,该技术的主要优点是它可以直接分析高极性分析物,而无需进行衍生决策。这种方法可以帮助回答常规质量控制领域中的关键问题,可用于快速确定定义明确的成分是真实的还是已被泄露的。
这种方法的视觉演示至关重要,因为该方法本身使用光学检测,并且由于其最终应用将涉及非专业作员。演示该程序的将是来自海德堡 Buns 实验室的 Abel 和我在休斯顿大学实验室的 Rio Color Lire。两名研究生首先准备浓度为每 10 毫升 50 毫克的十字形动物 1 至 3 的新鲜储备溶液、二氯甲烷,然后放在一边。
称取 500 毫克羧酸分析物,装在 6 个 16 ml DR 样品瓶中,加入 16 毫升二氯甲烷乙酸乙酯、乙腈 nn、二甲基甲酰胺异丙醇或甲醇。接下来,向每个样品瓶中加入 20 μL 十字形原液,如果样品瓶不同,则摇动样品瓶,使相应的溶液沉降。将未加盖的小瓶放在紫外灯下的玻璃板上,相机镜头与样品瓶之间的距离为 60 厘米。
打开 UV 灯并关闭室内灯。拍摄照片,将每种溶液的曝光时间从 0.25 到 15 秒不等,以生成反映缓解颜色的图像。在此之后,在二氯甲烷中制备十字形 4 的 1.0 乘以 10 至负四摩尔溶液,并放置一旁。
接下来,通过将 50 毫克分析物溶解在乙腈中,为每种 onic acid 分析物制备五种单独的溶液。1、2、4、三氯苯、二氯甲烷、环海因和氯苯。将每种分析物溶液 1.8 mL 转移到 5 个单独的 10 x 10 mm 石英比色皿中。
然后将 20 微升先前制备的十字形溶液加入五个比色皿中,并搅拌两种溶液以均质化。如果观察到任何沉淀,则让相应的溶液沉降。将所有五个 Q vets 放在玻璃板上,并从顶部照射它们。
使用手持式 365 纳米紫外灯,确保房间黑暗,并立即以相机镜头与比色皿之间的距离为 45 厘米,快门速度为 0.5 秒,拍摄溶液的发射颜色的数码照片。接下来,在乙腈 1 2 4 中制备至少 80 毫升 1.0 乘以 10 至十字形四的负六摩尔溶液,三氯苯环己烷二氯甲烷和氯仿将 152.6 毫克两个六叶绿素onic acid 溶解在 40 毫升每种十字形溶液中。将 97.6 毫克苯基onic acid 分别溶解在 40 毫升每种十字形溶液中。
然后将 40 毫克所需的胺分析物溶解到 2 毫升每种 onic acid 十字形溶液中。对于每种 Amin 分析物,用 2 种 6 二叶绿素 onic acid 制备 5 种溶液,用 5 种 phü y onic acid 作为添加剂的溶液。将 10 种制备溶液的等分试样转移到 10 个单独的石英比色皿中。
将两个 5 个 vete 组放在玻璃板上,用手持式 UV 以 365 纳米照射,然后立即使用图像处理程序使用前面描述的设置进行拍摄。从每个拍摄的小瓶的发射颜色的数码照片中剪出一个具有代表性的方形片段。然后将这些切口组织成类似于此处所示的面板。
如果需要量化发射颜色的差异,请从面板中提取红色、绿色、蓝色的值,然后对其进行统计处理,以获得一种分析物相对于另一种分析物的发射颜色的相对标准偏差。使用以下公式。最后,使用该公式鉴定未知羧酸分析物,并使用十字形 Fluor 1 到 3 在六种不同溶剂中确定未知分析物与校准数据集中所有物质之间的偏差,发现荧光响应取决于图中羧酸的浓度和结构特性。
这是所有 flora 四种溶剂羧酸组合的数字记录发射颜色。该阵列显示每种分析物 18 种特征发射颜色,可用于使用发射颜色的红绿蓝值进行独特表征和分析物。所有分析物都可以相对于羧酸进行区分,从 1 到 10,并使用完全类似的程序进行鉴定,如此处的自相关图所示。
使用十字形 4 可以很容易地区分 B 1 到 B 9,发射颜色面板和此处显示的相关图证明了这一点。胺的分析是使用十字形 4 的原位形成的 2 络合物和大量过量的 onic acid 添加剂、两个 6 二叶绿素 onic acid 和苯基 onic acid 来实现的。这些发射颜色与纯十字形不同的复合物可以通过两种方式响应胺分析物。
A 比嘌呤更碱性的装置用 onic acid 添加剂从其复合物中取代十字形 4,从而再生纯纯非复杂十字形 4 的发射颜色。另一方面,较碱性的物质似乎与十字形昂酸复合物结合而不破坏它,这一事件导致复合物荧光发射的调节。因此,替代传感方法的特点是水平效应,其中高于一定阈值的分析物就不能再相互区分一旦掌握,如果执行得当,这项技术可以在几个小时内完成。
观看此视频后,您应该对如何分析羧酸、巴罗尼酸以及在一组几种不同溶剂中使用十字形流感力的简单设置的方法有很好的了解。不要忘记,使用有机溶剂和紫外线灯可能很危险,执行此程序时应始终采取预防措施,例如使用通风良好的房间和护目镜。
查看完整文字稿并访问数千部科学视频
本研究提出了一种利用交叉共轭十字型荧光探针定性识别多种路易斯酸性和路易斯碱性分析物的方法。该方法通过十字型分子在加入分析物后发射颜色的差异,实现对结构相似物种的区分。
利用十字形荧光探针对羧酸、硼酸和胺类化合物进行快速定性鉴定,解决了药物研发早期阶段分析中的一个关键难题。该方法能够根据溶剂效应直接区分结构相似的分析物,适用于高通量质量控制和真伪验证。其可视化、无需衍生化的操作流程为研发和生产环境提供了高效的操作优势。
这种基于荧光的鉴定方法整合了化合物来源、早期发现和质量控制的各个环节,将分析验证与筛选及临床前工作流程衔接起来。