Name: 临床检查协议检测非典型和经典刮在绵羊 (视频) | JoVE Journal
Uploaded: 2014-01-19T14:00:00.000+00:00
Duration: 13 min 42 s
Description: 了解绵羊和山羊瘙痒病的临床检查方案，通过行为评估、威胁反应和抓挠反应测试区分典型与非典型病例。该方案约五分钟即可完成，有助于提高活体检测效率。

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提供动物的研究由英国食品、环境与乡村事务部以及欧洲联盟（通过资助欧盟TSE参考实验室）提供资金支持。我们感谢项目负责人M. Simmons博士和M. Jeffrey博士提供的支持。

1. 姿势评估
<ol>
	<li>在不干扰动物的情况下评估其姿势。</li>
	<li>受TSE影响的动物可能会四肢分开站立，可能出现弓背，或低头站立。</li>
</ol>
2. 行为评估
<ol>
	<li>观察动物独处时、被接近时以及被触碰时的行为表现。</li>
	<li>患TSE的动物可能出现精神状态改变，例如与其他羊只分离站立，或不能立即跟随其他羊只移动。</li>
	<li>当接近动物时，它可能会逃跑并突然倒地，或在被触碰时倒地。患有非典型痒病的羊只可能出现强迫性顺时针或逆时针转圈行为。</li>
</ol>
3. 威胁反应测试
<ol>
	<li>固定动物头部以测试恐吓反应：将手或几根手指多次移向动物的每只眼睛，以诱发眨眼反应，但需注意不要触碰到任何面部毛发，也不要产生气流扰动，以免引起动物眨眼。</li>
	<li>患痒病的动物可能缺乏恐吓反应，尤其是在患非典型痒病的绵羊中更为常见。尽管在本操作规程中，恐吓反应测试是唯一使用的脑神经检查方法，但在该操作过程中对动物面部进行肉眼观察，可能发现其他通常在痒病中不常见的神经功能缺损迹象，e.g. 面部麻痹。如果动物对恐吓刺激无眨眼反应，建议通过触碰眼睑来测试眼睑反射，以确认动物无法眨眼并非由面部麻痹所致。</li>
</ol>
4. 划痕反应的检测
<ol>
	<li>确保动物在操作过程中保持安静，因为挣扎的动物无法准确解读测试结果。</li>
	<li>分别在胸段、腰段和骶段背部区域进行划痕刺激，每次划痕后暂停一段时间。</li>
	<li>若动物在某一特定区域受到划痕刺激后出现节律性的头部或身体运动，或出现移动或舔唇反应，应重复划痕测试以确认该反应的可重复性。</li>
	<li>通常在瘙痒性动物中可诱发可重复的反应，这类动物通常包括患有典型痒病的绵羊或患有瘙痒型痒病的山羊；但非典型痒病绵羊一般无此反应，除非同时存在其他瘙痒性皮肤病或体外寄生虫。</li>
</ol>
5. 检查羊毛脱落和皮肤病变
<ol>
	<li>检查皮肤。</li>
	<li>由于痒病引起的瘙痒通常会导致脱毛，脱毛部位可能位于枕部、背部、臀部、胸侧或腹部，这是由于动物过度摩擦或抓挠所致，而 underlying 皮肤外观通常正常。</li>
	<li>如果动物有机会接触尖锐物体，后期可能出现擦伤。由于过度啃咬四肢，尤其在四肢部位可能出现咬伤创口。</li>
</ol>
6. 体况评分
<ol>
	<li>通过触诊腰椎的棘突和横突来评估动物的体况。</li>
	<li>痒病可能导致体况进行性下降，此时腰椎横突可被逐一明显触及，且突起末端触感尖锐。</li>
</ol>
7. 动物的遮光处理
<ol>
	<li>使用不透明的袋子制作一个罩子，剪去其中一个角以允许动物呼吸，然后用该罩子遮住动物的眼睛。</li>
	<li>只有在无安全风险且动物因惊慌而受伤的风险不存在时，才可释放动物；否则应继续控制住羊只，并在保持控制的同时观察其运动行为。</li>
	<li>蒙眼可能会加剧前庭系统或小脑功能障碍的临床表现，因为动物原本可通过视觉代偿这些缺陷。蒙眼后可能出现失衡、运动失调或转圈行为，尤其在临床上原本无明显异常但患有非典型痒病的羊只中更为明显。</li>
</ol>
8. 动物运动能力的评估
<ol>
	<li>观察动物自由活动时的步态和肌肉运动。</li>
	<li>运动失调可能表现为后肢步幅增宽、双后肢跳跃移动，或后躯过度摇晃，可能导致踉跄或短暂坐下。</li>
	<li>头部震颤在动物未受干扰时通常较轻微，但在临床检查期间或结束后可能变得更加明显。</li>
</ol>
9. 解读
<ol>
	<li>考虑这些发现对于羊瘙痒病的意义。</li>
	<li>尽管个别临床症状（如可重复的搔抓反应、震颤、行为异常、转圈、倒地发作、共济失调或恐吓反应消失）可能由多种原因引起，但当两种或两种以上此类症状同时出现时，强烈提示绵羊或山羊患有羊瘙痒病。</li>
</ol>

<ol><li>Benestad, S. L., Arsac, J. N., Goldmann, W., Nöremark, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Atypical%2FNor98+scrapie%3A+properties+of+the+agent%2C+genetics%2C+and+epidemiology%5BTitle%5D)+AND+%22Vet+Res.%22%5BJournal%5D)">Atypical/Nor98 scrapie: properties of the agent, genetics, and epidemiology.</a> Vet Res.. 39 (4), 19 (2008).</li>
<li>D'Angelo, A., Maurella, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Assessment+of+clinical+criteria+to+diagnose+scrapie+in+Italy%5BTitle%5D)+AND+%22Vet.+J%22%5BJournal%5D)">Assessment of clinical criteria to diagnose scrapie in Italy.</a> Vet. J. 174 (1), 106-112 (2007).</li>
<li>Eloit, M., Adjou, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((BSE+agent+signatures+in+a+goat%5BTitle%5D)+AND+%22Vet.+Rec%22%5BJournal%5D)">BSE agent signatures in a goat.</a> Vet. Rec. 156 (16), 523-524 (2005).</li>
<li>Fediaevsky, A., Maurella, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+prevalence+of+atypical+scrapie+in+sheep+from+positive+flocks+is+not+higher+than+in+the+general+sheep+population+in+11+European+countries%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Vet.+Res%22%5BJournal%5D)">The prevalence of atypical scrapie in sheep from positive flocks is not higher than in the general sheep population in 11 European countries.</a> BMC Vet. Res. 6, 9 (2010).</li>
<li>Healy, A. M., Weavers, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+clinical+neurology+of+scrapie+in+Irish+sheep%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Vet.+Intern.+Med%22%5BJournal%5D)">The clinical neurology of scrapie in Irish sheep.</a> J. Vet. Intern. Med. 17 (6), 908-916 (2003).</li>
<li>Houston, E. F., Gravenor, M. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Clinical+signs+in+sheep+experimentally+infected+with+scrapie+and+BSE%5BTitle%5D)+AND+%22%22%5BJournal%5D)">Clinical signs in sheep experimentally infected with scrapie and BSE.</a> 152 (11), 333-334 (2003).</li>
<li>Kittelberger, R., Chaplin, M. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Atypical+scrapie%2FNor98+in+a+sheep+from+New+Zealand%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Vet.+Diagn.+Invest%22%5BJournal%5D)">Atypical scrapie/Nor98 in a sheep from New Zealand.</a> J. Vet. Diagn. Invest. 22 (6), 863-875 (2010).</li>
<li>Konold, T., Bone, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Associations+of+clinical+signs+and+prion+protein+genotypes+in+British+sheep+with+scrapie%5BTitle%5D)+AND+%22Dtsch.+Tier%C3%A4rztl.+Wochenschr%22%5BJournal%5D)">Associations of clinical signs and prion protein genotypes in British sheep with scrapie.</a> Dtsch. Tierärztl. Wochenschr. 116 (11), 380-388 (2009).</li>
<li>Konold, T., Bone, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Scrapie+in+goats%5BTitle%5D)+AND+%22Vet.+Rec%22%5BJournal%5D)">Scrapie in goats.</a> Vet. Rec. 161 (11), 395-396 (2007).</li>
<li>Konold, T., Bone, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pruritus+is+a+common+feature+in+sheep+infected+with+the+BSE+agent%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Vet.+Res%22%5BJournal%5D)">Pruritus is a common feature in sheep infected with the BSE agent.</a> BMC Vet. Res. 4, 16 (2008).</li>
<li>Konold, T., Bone, G. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Monitoring+of+clinical+signs+in+goats+with+transmissible+spongiform+encephalopathies%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Vet.+Res%22%5BJournal%5D)">Monitoring of clinical signs in goats with transmissible spongiform encephalopathies.</a> BMC Vet. Res. 6, 13 (2010).</li>
<li>Konold, T., Davis, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Clinical+findings+in+two+cases+of+atypical+scrapie+in+sheep%3A+a+case+report%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Vet.+Res%22%5BJournal%5D)">Clinical findings in two cases of atypical scrapie in sheep: a case report.</a> BMC Vet. Res. 3, 1 (2007).</li>
<li>Passler, T., Walz, P. H., Pugh, D. G. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aPassler%2C+T+%22Diseases+of+the+Neurologic+System.+In%3A+Sheep+and+Goat+Medicine%22">Diseases of the Neurologic System. In: Sheep and Goat Medicine</a>. Pugh, D. G., Baird, A. N. , 2, W.B.Saunders. Saint Louis. 361-405 (2012).</li>
<li>Russel, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Body+condition+scoring+of+sheep%5BTitle%5D)+AND+%22In+Pract%22%5BJournal%5D)">Body condition scoring of sheep.</a> In Pract. 6 (3), 91-93 (1984).</li>
<li>Simmons, H. A., Simmons, M. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Atypical+scrapie+in+sheep+from+a+UK+research+flock+which+is+free+from+classical+scrapie%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Vet.+Res%22%5BJournal%5D)">Atypical scrapie in sheep from a UK research flock which is free from classical scrapie.</a> BMC Vet. Res. 5, 8 (2009).</li>
<li>Simmons, M. M., Konold, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+natural+atypical+scrapie+phenotype+is+preserved+on+experimental+transmission+and+sub-passage+in+PRNP+homologous+sheep%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Vet.+Res%22%5BJournal%5D)">The natural atypical scrapie phenotype is preserved on experimental transmission and sub-passage in PRNP homologous sheep.</a> BMC Vet. Res. 6, 14 (2010).</li>
<li>Spiropoulos, J., Lockey, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Isolation+of+prion+with+BSE+properties+from+farmed+goat%5BTitle%5D)+AND+%22Emerg.+Infect.+Dis%22%5BJournal%5D)">Isolation of prion with BSE properties from farmed goat.</a> Emerg. Infect. Dis. 17 (12), 2253-2261 (2011).</li>
<li>Ulvund, M. J. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aUlvund%2C+MJ+%22Clinical+Findings+in+Scrapie.+In%3A+Prions+in+humans+and+animals%22">Clinical Findings in Scrapie. In: Prions in humans and animals</a>. Hörnlimann, B., Riesner, D., Kretzschmar, H. , de Gruyter. Berlin. 398-407 (2006).</li>
</ol>

所有涉及动物的实验均依照英国政府内政部颁发的《1986年动物（科学程序）法》许可进行。 
作者声明不存在任何竞争性经济利益。

痒病是世界动物卫生组织（OIE）列明的动物疫病，目前尚缺乏快速可靠的检测方法 死前 检测依赖于农民或兽医识别与该疾病相关的临床症状的能力。然而，目前大多数痒病病例，尤其是非典型痒病病例，是通过有针对性的TSE监测发现的。 即 通过对屠宰或死亡的小反刍动物进行脑部检查发现，由于针对经典型痒病抗性培育羊群，导致经典型痒病病例数量减少，这很可能也降低了人们对该病的认知，使其在羊神经疾病鉴别诊断中较少被考虑。非典型痒病的流行率也较低，在欧洲每检测10,000头屠宰动物约发现5例，死亡动物中约发现8例4此外，瘙痒症通常表现为脱毛（伴或不伴表皮抓伤），常被视为羊瘙痒病的特征性症状。13因此，非典型痒病中所观察到的无伴随瘙痒症状的神经系统疾病12 或山羊瘙痒病的非瘙痒型11 可能不会引起对痒病的怀疑。
本检查方案旨在通过评估与不同类型的痒病（非典型和典型痒病，后者由接种牛海绵状脑病后表现出典型痒病样症状的羊只代表）相关的特定临床体征，识别绵羊中传染性海绵状脑病（TSE）的临床表现。在典型痒病中，超过100只绵羊的研究显示，表现出阳性搔痒反应（“啃咬反射”）的病例比例为50%至77%5,8。根据多项研究，运动障碍可在高达81%的典型痒病病例中被观察到18。共济失调也是多种自然发生的非典型痒病病例中的主要体征，常伴随行为改变1；但在自然感染和实验感染的非典型痒病绵羊中，还报告有转圈行为和视觉障碍12,15,16，因此本检查方案包含了蒙眼测试和恐吓反应测试。对体况评分（例如采用6分制评分系统14）可评估消瘦情况，这在患痒病的绵羊中可能被观察到5。尽管此前已有研究提出用于辅助检测绵羊痒病的临床标准2，但这些标准仅针对典型痒病的识别，且依赖于临床病史，而若动物送至屠宰场时，相关病史可能无法获得。
本方案可在短时间内对大量动物进行痒病症状的筛查。此外，该检查方案还可应用于绵羊和山羊痒病的实验研究，以监测临床症状的出现、进展及终点。然而，本方案不能替代更为详细的体格检查和神经系统检查，并记录相应的临床病史，必要时还需进行辅助诊断检测（如血液和脑脊液检查；必要时采用更先进的影像学技术），以便后续排除其他具有类似症状的小反刍动物疾病，例如代谢性或炎性神经系统疾病、脑脓肿或肿瘤。
尽管临床检查在检测TSE感染动物方面的敏感性通常低于 死后 基于朊蛋白检测的检测方法2,11尤其是在潜伏期的早期阶段，这是目前在活体动物中进行检测的唯一方法，对于尚未建立针对TSE感染小反刍动物监测系统的国家而言尤为重要。

痒病是一种绵羊和山羊的可传播性海绵状脑病（TSE），属于蛋白质错误折叠疾病，与牛的牛海绵状脑病（BSE）、鹿的慢性消耗性疾病以及人类的克雅氏病同属一类。该病的诊断通过以下方法进行 死后 通过检测脑组织中通常存在的蛋白酶抗性异常构象的朮蛋白来进行诊断。两种主要的天然发生型羊瘙痒症在流行病学、病理学和生物化学特征上有所不同，可明确区分：经典型羊瘙痒症和非典型羊瘙痒症。此外，通过实验性接种牛海绵状脑病（BSE）病原体，可在绵羊和山羊中诱导出具有类似经典型羊瘙痒症临床症状的神经系统疾病。6,10-11事实上，已诊断出山羊患有天然发生的牛海绵状脑病（BSE）3,17. 通过针对朊蛋白基因的遗传抗性育种，已成功控制经典型痒病（以及若自然发生的羊只BSE），但非典型痒病的防控更为困难，因其被认为是一种散发性疾病，且已在被认为无经典型痒病的国家中被诊断出。 例如 新西兰7.
痒病是一种成年绵羊和山羊的神经系统疾病，会导致行为、感觉和运动方面的改变，但该病进展缓慢，临床症状常不被识别，因为饲养人员或兽医可能不熟悉其临床表现，或在小反刍动物神经系统疾病的鉴别诊断中完全未考虑痒病。
本方案设计的检查流程旨在协助临床诊断痒病，具有两个目的：一方面应尽可能简短，以便在短时间内对大量动物进行筛查；另一方面应具备足够的特异性，以检出患痒病的动物，这通过评估痒病感染动物中常见临床症状的存在来实现。该流程在用于监测山羊经典痒病症状的原有方案基础上略作修改11，并增加了对动物进行蒙眼处理的步骤，该操作可能加剧一些通常不与痒病相关的临床症状9。

检测绵羊非典型和典型痒病的临床检查方案

Clinical Examination Protocol to Detect Atypical and Classical Scrapie in Sheep

羊瘙痒病（一种绵羊和山羊的可传播性海绵状脑病）的诊断目前主要依据检测与疾病相关的朊蛋白，方法包括 死后 检测。除非对羊或山羊群体进行随机抽样并主动监测痒病，否则痒病病例的识别依赖于临床可疑病例的报告，而这类报告又取决于个体对该病的了解程度以及识别与痒病相关临床症状的能力。在小反刍动物神经系统疾病的鉴别诊断中，可能未将痒病纳入考虑范围，特别是在痒病流行率较低的国家，或者临床症状未被识别的情况下。&#160;如果呈现为非瘙痒型，例如非典型痒病，则可通过一个简短的检查方案来帮助识别临床可疑病例，以评估绵羊中与瘙痒型和非瘙痒型TSE相关的特定临床体征，该方案也可应用于山羊。检查内容包括行为评估、视力（通过恐吓反应测试）、瘙痒（通过搔抓反应测试）以及运动能力（睁眼和蒙眼状态下）。这可能为进一步详细的神经学检查提供依据。&#160;报告动物为疑似痒病病例。它&#160;也可用于绵羊或山羊的实验性TSE研究，以评估疾病进展或确定临床终点。

临床上健康的绵羊。一只来自无痒病羊群的多赛特阉公羊，通过脑内接种新西兰来源的牛脑组织，在接种后49个月进行检查。该羊姿势正常，行为正常，表现出正常的恐吓反应（图1），对划痕试验无反应，被毛完整，体况极佳。在蒙眼状态下临床表现无异常，无运动障碍迹象。
呈现非瘙痒性TSEs症状的非典型痒病绵羊。该动物为来自无痒病群体的黑面山地绵羊阉羊，通过颅内接种方式接种了来自同一朊蛋白基因型（AHQ/AHQ）的非典型痒病田间病例的脑匀浆，并在接种后36个月进行检查。该羊体态姿势正常，但行为与圈内其他羊只不同，表现为顺时针方向转圈。进行恐吓反应测试时无眨眼反应。搔抓皮肤不引起任何反应，羊毛外观无明显改变，但体况仅为中等。蒙眼后仍顺时针转圈（图2），并失去平衡。步态表现为共济失调，可见细微的头部震颤。
呈现瘙痒型TSE临床症状的非典型BSE绵羊，其临床表现与经典型痒病感染绵羊相似。因此，本例未包括经典型痒病病例。该动物为来自无痒病群体的波尔多塞特阉羊，经脑内接种牛非典型（L型）BSE脑组织匀浆，并在接种后50个月进行检查。该羊站立时背部略呈拱起，后肢常呈宽基底姿势，被抓住时易倒地。恐吓反射减弱。搔抓背部不同区域可引发头部或嘴唇运动（图3），头部顶部可见脱毛及轻微皮肤损伤。体况良好。蒙眼后不愿移动，并将后躯靠在障碍物上以维持平衡。该羊表现出共济失调及前肢高跨步态。
<img alt="在基因研究操作中处理绵羊，带有标签的动物和戴手套、身穿实验服的研究人员。" fo:content-width="5in" fo:src="/files/ftp_upload/51101/51101fig1highres.jpg" src="/files/ftp_upload/51101/51101fig1.jpg" data-altupdatedat="1787630408000" data-alt="图 1"> 
图 1. 威胁反应测试。 向动物眼睛做出威胁性手势可引发眨眼反应。 <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/51101/51101fig1highres.jpg" target="_blank">点击此处查看大图。</a>
<img alt="绵羊行为研究；动物在受控环境中；观察性研究；数据收集。" fo:content-width="5in" fo:src="/files/ftp_upload/51101/51101fig2highres.jpg" src="/files/ftp_upload/51101/51101fig2.jpg" data-altupdatedat="1787630408000" data-alt="图 2"> 
图 2. 蒙眼处理。 通过使用头套蒙住绵羊的眼睛，诱发其顺时针转圈行为。 <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/51101/51101fig2highres.jpg" target="_blank">点击此处查看高清图像。</a>
<img alt="绵羊操作流程、农场管理技术、畜牧养殖、家畜护理示范。" fo:content-width="5in" fo:src="/files/ftp_upload/51101/51101fig3highres.jpg" src="/files/ftp_upload/51101/51101fig3.jpg" data-altupdatedat="1787630408000" data-alt="图3"> 
图3. 刮擦反应测试。 刮擦背部会引发舔唇及头部侧向运动 <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/51101/51101fig3highres.jpg" target="_blank">点击此处查看大图。</a>

本文介绍了一种简短的临床检查方案，以协助检测绵羊和山羊中的经典型和非典型痒病。

羊和山羊传染性海绵状脑病（TSE）——痒病的诊断目前主要基于疾病相关蛋白的检测……

痒病是一种在绵羊和山羊中传播的传染性海绵状脑病，会导致患病动物出现神经系统症状。该病的确诊需在动物死后通过检查脑组织进行，同时脑组织检查还可用于将痒病分为不同类型，包括经典型痒病、非典型痒病，以及罕见的由其他物种传播的形式，例如牛海绵状脑病（简称BSE）。痒病被世界动物卫生组织列为法定报告疾病，但该病常常未被识别，尤其是在患病的小反刍动物中。本视频展示了一项约五分钟的简短临床检查方案，旨在通过三只绵羊的实例，协助检测可传播性海绵状脑病的临床病例。实例一为一只经脑内接种BSC（牛脑匀浆）的临床健康绵羊，在接种后49个月进行检查，作为对照组。示例二为一只临床上受累的绵羊，通过脑内接种非典型痒病（atypical scrapie）OV脑匀浆，在接种后36个月进行检查，代表一例非典型痒病病例。示例三为一只临床上受累的绵羊，通过再次接种非典型牛海绵状脑病（atypical BSE）牛脑匀浆，在接种后50个月进行检查，其临床表现与经典型痒病相似。因此，未包含经典型痒病病例。体态评估。在圈舍中未受干扰时，佩戴耳标编号为1的健康绵羊（红色箭头所示）表现出正常的体态。患有非典型痒病的绵羊体态也看似正常。表现为非典型BSC的绵羊略微弓背，且倾向于用后肢发出声音。行为评估时，正常绵羊表现为步态宽基，健康绵羊会停留在群体中，并跟随检查者的移动。当接近并捕捉该绵羊时，未引发任何异常表现。这只异常的刮羊与围栏内其他羊的行为不同，它背对摄像头站立，而所有其他羊均面向摄像头。羊是群居动物，通常成群移动，但此羊不会立即跟随其他羊，且似乎较慢才意识到其他羊已顺时针离开。对该羊进行检查后诱发了转圈行为。这种强迫性行为只有在接近绵羊并使其逃跑时才会停止。患有非典型BSC的绵羊在被捕获后抓握时会倒在地上。威胁反应测试：将手或几根手指多次移向动物每只眼睛，但不接触任何面部毛发，也不产生气流。湍流应引起眨眼反应，这在健康绵羊的双眼上均可观察到。然而，在患有非典型瘙痒症的绵羊中，这种反应消失，该类绵羊不会眨眼，尽管其眼睑受到触碰时仍具有眨眼能力。非典型BSE的眨眼反应在受到威胁时会出现，但与右眼相比，左眼的眨眼反应较弱。当触碰眼睑时，测试搔抓反射，测试在此时进行，绵羊站在墙边，检查者用一条腿防止其向前逃脱，绵羊足够安静以继续完成测试。在此处对背部多个区域进行搔抓，包括骶腰部、胸腰段、中胸部和颅胸部区域，每次搔抓之间留有停顿，以观察反应。这只临床上健康的绵羊不会表现出可重复的刻板反应。同样，患有非典型性瘙痒症的绵羊在背部多个区域被搔抓时也不会产生反应。然而，当患有非典型性BSC的绵羊被搔抓时，则会引发反应。根据被刮擦的部位，羊只会出现嘴唇啃咬动作或头部运动的反应。该反应被视为阳性。检查时需注意是否存在壁损和皮肤病变。大面积的壁损无论是否伴有皮肤病变通常可在远处观察到，但在保定羊只进行近距离检查时，可能发现因剧烈瘙痒引起的小范围壁损。这些区域通常位于头部、背部、臀部以及胸腹部的侧面，常呈双侧对称分布。在对照组绵羊及患有非典型 Scrapie 的绵羊中未检测到皮肤缺损，而患有非典型 BSC 的绵羊在体表部位已失去羊毛。除皮肤受损后形成的小结痂外，皮肤其余部分保持完整。这可能是由于过度搔痒导致体况评分不准确。动物的体况评分是通过触诊腰部的横突和棘突来进行的。该操作也可在绵羊搔痒试验期间进行。可使用从0到5的评分标准，其中5分对应极度肥胖的绵羊。图中所示为腰椎纵切面的示意图，椎骨的突起部分被红色的肌肉组织和黄色的脂肪组织覆盖，即使对皮肤施加压力，也无法触及横突末端。相比之下，身体状况较差。如果脊柱棘突末端触感尖锐，施加任何压力时均无法感觉到覆盖的脂肪层（如此图所示），则评分为0。临床健康的绵羊体况非常好，评分为4分；而患有非典型痒病的绵羊体况下降，仅为2分，属一般水平。相比之下，患有非典型BSC的绵羊仍保持良好的体况，评分为3分。在进行遮眼测试时，将绵羊头部覆盖一个手工制作的遮眼罩，该遮眼罩可以是任何非C3袋，需剪去一个角以露出动物的鼻部，确保其能够正常呼吸，然后在确保安全的前提下放开绵羊。一些羊可能会惊慌并四处奔跑或跳跃，有可能会伤害到自己或他人。此时，不要完全放开羊，应在继续控制羊的同时观察其行为。健康的羊会保持安静且在被蒙住眼睛的情况下，通过摇头试图取下眼罩。其运动或平衡能力未受影响。相比之下，患非典型痒病的羊会顺时针转圈，并出现平衡能力丧失。患有非典型BSC的绵羊不愿移动，并会倚靠在障碍物上，但在倚靠时，其四肢交叉，且明显失去平衡。对动物运动能力的评估显示，临床上健康绵羊的步态正常。无论是在绵羊未受干扰时，还是在之前处理过程中，均无明显震颤现象。患有非典型痒病的绵羊表现出共济失调。当它跟随其他绵羊时会出现打滑，后肢运动显得不协调，当绵羊群中站立时可短暂观察到轻微的头部震颤。在标注为非典型BSE的绵羊中也可观察到明显的共济失调。可见步态异常，表现为高抬腿后跌倒，显示出协调性失衡和运动过度。步态解读。患有可传播性海绵状脑病的绵羊所表现出的临床症状包括行为异常、恐吓反应消失、搔痒反应阳性、脱毛、皮肤损伤、蒙眼时转圈、运动不协调以及震颤，可出现其中一种或多种症状。若出现上述任何症状，检查人员应提高警惕，并考虑痒病作为可能病因之一。结论：本视频展示了对临床上健康绵羊进行临床检查的操作流程，并提供了患有可传播性海绵状脑病绵羊的异常检查结果示例。该方案有助于识别临床上可疑的病例，可对其进行更详细的检查，以排除具有相似临床表现的其他疾病，或用于评估临床发病、疾病进展或临床终点。在小型反刍动物传染性海绵状脑病的实验研究中，该方案具有重要应用价值。

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