在自发活动的测定果蝇

该程序的总体目标是量化果蝇的自发运动活动。这是通过首先收集和老化实验果蝇来实现的。第二步是在温控培养箱中设置种群监测器并下载适当的软件。

接下来，将苍蝇转移到玻璃文件中，然后放置在运行活动监视器的种群监视器中。最后一步是分析数据。最终，种群监测器用于显示果蝇自发身体活动的差异。

与现有方法（例如负几何轴）相比，该技术的主要优点是它允许简单、可靠和客观地连续记录多个苍蝇种群的自发身体活动。这种方法可以帮助我们确定不同的作如何影响苍蝇。实验室的实验室助理 Suzanne Kowski 将自发地演示该程序 根据随附文本协议中列出的步骤开始准备食物，并在热板上不断混合使其冷却。

将 5 毫升食物分装到每个狭窄的玻璃瓶中，确保食物量低于最低的种群环。在食物冷却至室温后进行监测。用海绵塞盖住小瓶，并在 4 摄氏度下保持长达两周。

使用前将样品瓶加热至室温。接下来，将 Canton S 苍蝇与标准实验室食品一起放入塑料瓶中。将样品瓶保存在 25 摄氏度的加湿温控室中，进行 12 小时的光暗循环。

早上从小瓶中清除成蝇。然后在产后 8 小时内在二氧化碳垫上按性别将新封闭的苍蝇分开，以确保雌性苍蝇是处女。准备 10 瓶亲本苍蝇，放置 5 到 10 天大的初蝇雄性和雌性。

在标准食品瓶中装有几粒酵母的果蝇。将果蝇保存在 25 摄氏度的培养箱中，光照黑暗循环 12 小时，持续两天。每隔一天将果蝇放入新的塑料瓶中，并将装有所得鸡蛋的小瓶保存在 25 摄氏度的培养箱中。

然后清除并丢弃他在第一天关闭的果蝇，并将小瓶放回培养箱，以便在第二天收集更同步的果蝇种群。接下来，在二氧化碳垫上，在 24 小时内用金属勺快速收集每瓶 25 只雄性苍蝇和 25 只雌性苍蝇。在小瓶上写下 ELO 的日期。

每个样品瓶至少组装 5 个 Replicate 样品瓶。适用于实验组和对照组。将样品瓶保存在 25 °C 的温度受控环境室中，并进行 12 小时的光暗循环。

每隔一天将苍蝇转移到一个新的塑料瓶中，持续 10 天。使用漏斗将种群监测器置于温控培养箱中。接下来，使用四线电话线将每台显示器通过五路分路器连接到电源接口单元或 PSIU。

然后将电话线连接到 PSIU。将 PSIU 连接到 100 至 240 伏电源插座，并将电源输出连接器插入其中一个 PSIU 配对 jax。然后下载 PSIU 使用的 USB 软件，以合成计算机程序与 PSIU 和活动监视器之间的数据链路。

启动程序。然后在 preferences.为 Macintosh 选择串行端口 PSIU。

然后选择读取间隔。接下来，按显示器的唯一制造商编号选择显示器。选择与分配给监视器的编号相对应的监视器范围。

通过寻找绿灯确保所有显示器都已正确连接。红灯表示连接已丢失。黑框表示系统已关闭或未正确建立 USB 连接。

将同龄的雄性和雌性苍蝇分开。在二氧化碳垫上，将 10 只雄性和 10 只雌性果蝇放入单独的室温中。玻璃 vi.

每个实验和对照线至少使用三个小瓶，对于每种性别的果蝇，将小瓶侧放，直到果蝇从二氧化碳中恢复过来，以确保它们不会卡在食物中。将它们在室温下放置两个小时以从二氧化碳中回收。然后将小瓶放入群体中。

安装在培养箱中的显示器。三到四天后将果蝇转移到新的小瓶中，以避免食物干燥。在实验结束时，扫描数据以消除重复读数并确保记录完整。

使用 file scan 110 x，选择数据收集的间隔，并丢弃在所选时间段的前 24 小时内收集的数据。该程序会将每个显示器的当前总数发送到计算机，并从零开始重新开始计数。接下来，选择一个实验名称并从计算机数据文件夹中复制文件以保存数据。

通过将文本文件中收集的数据仔细复制到 Excel 电子表格的列中来开始数据分析。然后计算每个监测器在所需时间段内的总活动，该活动表示在三个不同高度的红外光束处收集的活动总和。最后，使用两个尾部学生 T 检验确定代表三个生物学重复的三个监视器之间的平均运动活动和标准差。

果蝇的自发运动活动取决于果蝇的性别和明暗周期。正如这张雄性和雌性苍蝇的平均活动图所示，箭头标记了从明到暗的过渡。在看到活动减少的地方，与高热量饮食中果蝇活动减少相比，当苍蝇在低热量饮食中摄入标准食物量的一半时，20 日龄雄性果蝇的总活动增加。

看完这个视频，你应该对如何确定果蝇的自发身体活动有一个很好的了解。该方法有助于确定不同的遗传学或环境作如何影响果蝇的活动。