神经病理性疼痛小鼠坐骨神经掴型号
July 16th, 2014
神经性疼痛是一种病变或疾病影响的体感系统的结果。在"袖口模式"对小鼠神经病理性疼痛是由周围的坐骨神经的主要分支聚乙烯袖口的植入。机械痛是使用von Frey细丝测试。
该程序的总体目标是建立周围神经压迫后神经性疼痛的小鼠模型。在为动物准备手术后，暴露坐骨神经的主支，并在神经周围插入聚乙烯袖带。然后伤口闭合。
为了测试爪子的敏感性，将小鼠放入多孔钢板上的透明盒子中。然后将一系列越来越大的 Von Fray 细丝涂在爪子上，直到动物对压力做出一致的反应。最终，可以通过绘制从 Von Fray 测试获得的机械阈值随时间的变化来观察到长期持续且与手术爪同侧的机械异常性疼痛的存在。
该模型可以帮助回答疼痛领域的关键问题，例如神经性疼痛的潜在机制。它还可用于研究当前的治疗方法，以测试 neo thepath 药物或研究神经性疼痛的 anxi 抑郁后果。然而，这种方法的视觉演示至关重要，因为如果没有视觉支持，袖带的植入是一个难以解释的步骤。
为了评估机械爪子撤回阈值，首先将小鼠放入多孔钢板上的透明独立盒子中，最多可以同时测试 12 只动物进行测试。使用 von Frey 细丝。这些校准直径的塑料毛发连接到手持式涂抹器上。
弯曲时，每根细丝施加与其直径成正比的压力。在小鼠中，最常用的细丝范围为 16 至 10 克。从最轻的压力开始。
测量阈值以测试小鼠时，将细丝贴在左后爪上，直到细丝开始弯曲。避开爪子的外侧边界，这可能更敏感。动物对细丝应用产生反应。
如果爪子退缩或退缩，请再重复两次应用，如果动物对所有三次应用都有反应，请测试另一只爪子。否则，在测试另一只爪子之前，总共涂抹细丝五次。使用所选的 von Frey 细丝连续测试每只小鼠，然后用下一根细丝重复该过程。
如果动物对同一根细丝反应 3 次，则被认为是积极的结果。当两根连续的细丝获得正分时，停止对该爪子的测试。爪子退出阈值是给定鼠标的两个 gram 值中的较低者。
这两个爪子之间的值可能不同。每天重复此过程，直到至少三个连续的阈值稳定。然后继续手术。
记录动物的体重，应超过 20 克，并用氯胺酮和甲苯噻嗪麻醉动物。检查是否有任何爪子或眼睛反射。用棉签将保护凝胶涂抹在眼睛上。
然后从膝盖到臀部剃掉右腿。然后将右后腿向上的动物放在一个小枕头上，并用胶带固定这条腿。用洗必泰和 70% 乙醇对暴露的皮肤进行消毒。
首先触诊找到股骨。然后在股骨后方约 1.5 毫米处平行于股骨做一个 0.5 厘米的切口。现在使用高压灭菌棒，将靠近股骨的肌肉分开，但不要切割它们。
坐骨神经的主要分支应该可见。如果有出血，请务必用棉签擦干净，以进行假对照。这样就完成了对小鼠进行袖口的手术。
在坐骨神经下方插入两根棍子，露出神经的主支。加入一小撮生理盐水来滋润神经。现在用尖头钢棒和斗牛犬夹抓住分叉袖口。
然后插入斗牛犬并将其旋转 180 度，使其将袖带保持在袖带横向开口的对面。现在关闭 bulldog 并移除尖头棒。接下来，让助手将两根棍子放在神经下，轻轻地将它们分开。
为了能够进入神经，将两毫米的袖带插入坐骨神经的主分支周围。首先将袖带远端的部分插入靠近髋部的神经部分周围。然后用钳子轻轻关闭袖带，以确保袖带正确闭合。
扭转局面。现在，取下棍子并缝合皮肤。使用手术结，将鼠标转移到干净的家笼中，将鼠标放在左侧。
用加热灯保温，直到它醒来。在笼子里添加额外的食物和水，这样老鼠就可以自我滋养。可以在手术后第二天对动物进行不良戒断阈值测试，但最好等待三天以减轻手术后的超敏反应。
与假对照相比，袖带小鼠表现出同侧异常性疼痛超过两个月。用每公斤 5 毫克去甲替林治疗小鼠。每天两次的三环类抗抑郁药在治疗约两周后缓解神经性异常性疼痛。
如果中断治疗，小鼠通常会在 3 到 4 天内复发。该模型对另一种神经性疼痛加巴喷丁类药物治疗也很敏感。看完这个视频，你应该对如何在麻醉的 mize 中找出坐骨神经的主要分支并在其周围插入盖子有一个很好的了解。
在这种神经性疼痛模型中，One Fray 测试进一步允许评估机械阈值和研究药物反应。
概述
本文描述了一种通过在坐骨神经周围使用聚乙烯袖套进行周围神经压迫来诱导神经病理性疼痛的小鼠模型。该模型允许通过冯·弗赖丝丝线测试来评估机械性异痛。
关键研究组成部分
科学领域
- 神经科学
- 疼痛研究
- 动物模型
背景
- 神经病理性疼痛是由影响躯体感觉系统的病变或疾病引起的。
- 袖套模型是一种广泛用于研究小鼠神经病理性疼痛的方法。
- 机械性异痛是可以在该模型中测量的常见症状。
- 理解神经病理性疼痛的机制对开发有效治疗至关重要。
研究目的
- 建立一个可靠的小鼠模型用于研究神经病理性疼痛。
- 评估神经压迫后的机械敏感性和异痛。
- 研究神经病理性疼痛的潜在治疗方法。
使用的方法
- 小鼠的准备和在坐骨神经周围手术植入聚乙烯袖套。
- 使用冯·弗赖丝丝线测定机械性异痛。
- 随时间监测爪子撤退阈值。
- 使用去甲替利嗪和加巴喷丁类药物评估治疗效果。
主要结果
- 小鼠在袖套植入后显示出持续的同侧异痛。
- 机械阈值随时间稳定且可测量。
- 去甲替利嗪治疗缓解了神经病理性异痛。
- 加巴喷丁类药物也显示出在减轻疼痛症状方面的有效性。
结论
- 袖套模型是研究神经病理性疼痛机制的有价值工具。
- 它允许在受控环境中评估治疗效果。
- 进一步的研究可以基于这个模型探索新的治疗策略。
常见问题
Executive Industry Relevance
The sciatic nerve cuffing model provides a reliable preclinical system for evaluating neuropathic pain mechanisms and therapeutic interventions. By inducing long-lasting mechanical allodynia in mice, it enables target validation and assay development for analgesic candidates. This model supports mechanistic de-risking and predictive confidence in early discovery pipelines.
Strategic Applications in Biopharma R&D
Early Discovery & Target Validation
- Scientific Value: Enables interrogation of therapeutic hypotheses related to neuropathic pain mechanisms.
- Operational Value: Supports biological de-risking through functional validation of sensory pathway targets.
- Strategic Value: Facilitates predictive confidence for portfolio triage of analgesic candidates.
Screening & Assay Development
- Scientific Value: Provides a disease-relevant system for preparing validated biological systems.
- Operational Value: Enables assay standardization and reproducibility via quantitative von Frey filament measurements.
- Strategic Value: Enhances screening readiness and scalability for compound evaluation workflows.
Translational & Preclinical Research
- Scientific Value: Aligns with translational biomarker studies through measurable sensory and anxiodepressive outcomes.
- Operational Value: Ensures continuity from discovery through preclinical validation of treatment effects.
- Strategic Value: Informs risk-adjusted advancement decisions based on sustained analgesic responses.
Pipeline & Workflow Integration
The model integrates into the discovery continuum from target validation through lead identification to preclinical efficacy testing.
- Discovery Biology: Supports hypothesis testing and pathway clarification in somatosensory signaling.
- Screening: Delivers assay readiness and quantitative outputs for mechanical hypersensitivity assessment.
- Analytics: Enables statistical comparison of paw withdrawal thresholds across treatment groups.
- Translational Research: Connects to preclinical continuity via evaluation of nortriptyline and gabapentinoid efficacy.
- Enterprise Reuse: Functions as a reusable platform for iterative analgesic candidate screening.
Operational & Enterprise Impact
- Scientific Value: Predictive confidence in target validation and reduction of mechanistic ambiguity in pain pathways.
- Operational Value: Standardization, reproducibility, and scalability of mechanical allodynia measurement.
- Strategic Value: Improved go/no-go decisions, capital efficiency, and reduced late-stage biological risk in analgesia programs.
- Portfolio Impact: Risk-adjusted prioritization and advancement decisions based on durable treatment responses.
Implementation Considerations
- Requires expertise in rodent neurosurgery and behavioral pain testing.
- Dependent on precision instrumentation for cuff implantation and von Frey filament application.
- Necessitates cross-team standardization between surgery, behavior, and pharmacology teams.
- Involves adaptation considerations across mouse strains and baseline sensitivity profiles.
- Limited by postoperative variability requiring stabilization periods before baseline testing.
