The Use of Fluorescent Target Arrays for Assessment of T Cell Responses <em>In vivo</em>

Benjamin J. C. Quah; Danushka K. Wijesundara; Charani Ranasinghe; Christopher R. Parish

doi:10.3791/51627

JoVE Journal
Immunology and Infection

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JoVE Journal Immunology and Infection

The Use of Fluorescent Target Arrays for Assessment of T Cell Responses In vivo

荧光目标阵列的T细胞反应评价中的应用在体内

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12:09 min

June 19, 2014

DOI: 10.3791/51627-v

Benjamin J. C. Quah¹, Danushka K. Wijesundara¹, Charani Ranasinghe¹, Christopher R. Parish¹

¹Department of Immunology, John Curtin School of Medical Research,Australian National University

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

监测体内详细的T细胞应答的能力，对于我们的免疫应答的理解的发展非常重要。在这里，我们描述了评估同时采用流式细胞仪> 250参数体内 T细胞检测使用荧光目标阵列（自由贸易协定）的。

该程序的总体目标是生成多达 252 个独特标记的荧光靶细胞阵列，用于使用多参数流式细胞术进行免疫测定。这是通过首先用独特的活性染料（如 CFSE 和 CTV）组合和强度标记靶淋巴细胞来实现的。下一步是用候选 MHC 1 类和 MHC 2 类结合肽表位脉冲每个不同的靶淋巴细胞群。

然后广泛洗涤细胞以保持表位的特异性，然后将细胞汇集并注射到动物体内。最后一步是从特定组织中收集荧光标签阵列细胞，标记它们并评估 MHC 肽特异性反应。最终，流式细胞术结果可以通过测量靶细胞死亡来显示 CTL 反应，并且它们可以通过测量 B 细胞靶标活化标志物的上调来显示 CD 四个阳性 T 辅助反应与传统体内 CTL 测定相比，该技术的主要优点是它允许同时测量一只动物中超过 250 个靶细胞，证明该程序将是 Ben Quire，我实验室的一名研究员。

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