Combined DNA-RNA Fluorescent <em>In situ</em> Hybridization (FISH) to Study X Chromosome Inactivation in Differentiated Female Mouse Embryonic Stem Cells

Tahsin Stefan Barakat; Joost Gribnau

doi:10.3791/51628

结合DNA-RNA荧光原位杂交（FISH）研究X染色体失活的分化雌性小鼠胚胎干细胞

JoVE Journal
Biology

A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.

JoVE Journal Biology

Combined DNA-RNA Fluorescent In situ Hybridization (FISH) to Study X Chromosome Inactivation in Differentiated Female Mouse Embryonic Stem Cells

结合DNA-RNA荧光原位杂交（FISH）研究X染色体失活的分化雌性小鼠胚胎干细胞

Full Text

28,465 Views

15:54 min

June 14, 2014

DOI: 10.3791/51628-v

Tahsin Stefan Barakat¹, Joost Gribnau¹

¹Department of Reproduction and Development,Erasmus MC - University Medical Center

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

荧光原位杂交（FISH）可在细胞内其天然环境中的核酸的检测。我们在这里描述了一种协议，用于组合，同时检测RNA和DNA的鱼的装置，它可以被用来研究X染色体失活在小鼠胚胎干细胞。

该程序的总体目标是通过在 C two 杂交或 D-N-A-R-N-A 鱼中同时结合 DNA 和 RNA 荧光来研究分化的雌性小鼠胚胎干细胞中的 X 染色体失活。这是通过首先在雌性小鼠胚胎干细胞中诱导分化来实现的。在这个模拟正常植入后胚胎发育的过程中，X 染色体失活开始，导致囊肿 RNA 的转录和积累增强，编码未来失活的 X 染色体。

第二步是使用Paraldehyde固定分化的胚胎干细胞。接下来，通过用生物素或 digo genin 标记 DNA 片段来制备用于检测 X 染色体 DNA 和囊肿 RNA 的探针。使用 Nick 翻译。

View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos