行为和运动测量使用一个开放的领域活动监控系统的骨骼肌疾病

该程序的总体目标是测量小鼠在开阔场地环境中的运动和行为活动。第一步是让小鼠连续四天适应旷野室。使用专门的软件记录驯化后的行为活动。

每天，数据都会被导出和审查以用于质量控制目的。测试后，对数据进行多个行为参数分析。最终，旷场活动用于以非侵入性方式显示对照动物和测试动物之间的差异。

这种非侵入性方法的优点是它以纵向方式提供对一般生活质量的总体评估。这模拟了用作临床结果测量的 6 分钟步行测试，并提供了对潜在脱靶药物影响的见解 以获得最佳结果。确保所有动物都适应了适当的环境，并且每天在同一时间进行测试，并在一个安静的温度和湿度控制室中，光线均匀。

首先，将小鼠带入测试室，让它们适应大约 10 分钟。在此期间离开房间。接下来，返回房间并打开活动室。

即使此时没有收集数据，这也将模拟测试环境。本协议中使用的活动室包含一个中心分隔器，将活动室划分为多个象限。确保隔板在腔室内正确对齐。

接下来，轻轻地将每只鼠标从它们的家笼中取出，并立即将它们放入空象限中。装载完所有动物后，将盖子盖在上面并离开房间。在驯化期后，让动物适应测试室 60 分钟。

返回房间并取下盖子。轻轻地将每只鼠标放回它们的家笼中。在每次会议之间用消毒剂和纸巾彻底清洁每个腔室。

初始数据收集前一周连续四天重复这些步骤。注意在每次会议中将动物随机分配到一个新的盒子中，以避免习惯化并在整个研究期间跟踪盒子分配。要测量旷场活动，请将小鼠带入测试室适应 10 到 30 分钟。

在此期间离开房间。在此之后，返回房间并打开活动室。接下来，打开随附的计算机软件，该软件将记录动物的运动。

在计算机软件中设置主要数据收集参数，以收集 6 个 10 分钟的数据块，然后输入适当的日期、文件名和鼠标 ID 号。设置完所有参数后，运行光束前检查以验证所有红外光束是否正常工作。如果腔室未通过预梁检查，很可能是由于中心分隔器对准不良。

如果发生这种情况，请重新对齐分隔器，直到传感器被解锁并且系统准备就绪。当所有测试室都准备就绪时，轻轻地将鼠标从其家用笼中取出并将其放入测试室中。在数据收集过程中，可以同时将两只动物放置在测试室中。

例如，一只动物可以放置在左前象限，一只动物可以放置在右后象限。加载所有动物后，将盖子放在腔室顶部，然后启动程序以开始数据收集。程序将根据之前设置的数据收集参数开始记录活动水平。

考试期间离开考场。数据收集完成后返回会议室。保存数据，然后将每只动物放回各自的家笼中。

在检测另一组动物之前，先用消毒剂和纸巾清洁所有单元。测试后，将数据导出到电子表格。计算机软件在数据收集期间计算多个参数。

对于每只小鼠，请查看所有数据以进行质量控制。连续四天重复这些步骤。注意在每个会话中将动物随机分配到一个新盒子中，并在整个研究期间跟踪盒子分配。

最后，计算平均水平活动。收集数据四天的垂直活动、总行驶距离、总移动时间和总休息时间。这些结果显示雄性和雌性 ddy 2 J laminate alpha two 缺陷先天性肌营养不良症小鼠和对照小鼠的典型旷场活动水平随着时间的推移，对照小鼠的水平活动更高，垂直活动和总行进距离也更高。

DY 两只 J 小鼠在 19 周龄时也表现出垂直活动完全丧失，这反映了它们的后肢麻痹，进而在 6 周龄的坏死高峰期无法后退。在 Duchenne 肌营养不良症的动物模型中，MDX 小鼠表现出较低水平的水平活动、垂直活动和总行进距离。不同品系小鼠之间旷场活性的差异也得到证实。

与 L 6 只小鼠相比，BL 10 小鼠具有更高的水平活动、垂直活动和总行进距离。由于行为活动容易出现较大变化，因此旷场活动可能不是合适的主要终点指标。然而，当与其他功能组织学和分子分析一起进行时，它可以成为临床前研究中非常有价值的次要结果指标。