Name: 无线电遥测系统，以监测大鼠脊髓横断和胚胎神经干细胞移植在心血管功能 (视频) | JoVE Journal
Uploaded: 2014-10-07T14:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 59 s
Description: 学习使用无线电遥测系统监测大鼠脊髓横断后心血管功能，结合胚胎神经干细胞移植技术评估自主神经反射异常及功能恢复情况。该方法为脊髓损伤研究提供重要工具。

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本研究工作获得了美国国立卫生研究院神经疾病与中风研究所（NIH/NINDS，项目号NS054883）、克雷格·H·尼尔森基金会（Craig H. Neilsen Foundation，项目号280072）、退伍军人事务部以及加拿大脊髓研究组织的资助。我们感谢位于密苏里州哥伦比亚市的密苏里大学大鼠资源与研究中心（Rat Resource and Research Center）提供GFP大鼠。

所有动物实验方案均经机构动物照护与使用委员会（IACUC）批准。严格遵守美国国立卫生研究院（NIH）关于实验室动物护理与安全的指南。接受手术的动物均得到充分处理，以最大程度减轻疼痛与不适。
1. 脊髓手术与细胞移植
<ol>
	<li>所有手术前均需对手术器械进行高压灭菌。在不同动物之间进行操作时，使用热珠灭菌器（Fine Science Tools）去除器械上的病原体和微生物污染物。手术过程中使用无菌外科手套、手术衣和手术单。每次手术均采用无菌外科技术。</li>
	<li>通过腹腔注射（i.p.）给予雌性Fischer 344大鼠混合麻醉剂（2 ml/kg），包含氯胺酮（25 mg/ml）、赛拉嗪（1.3 mg/ml）和乙酰丙嗪（0.25 mg/ml）。</li>
	<li>剃除背部毛发，并反复使用碘伏和乙醇清洁皮肤。</li>
	<li>使用#10刀片切开皮肤，钝性分离肌肉层。用手术刀分离椎骨，暴露T3椎体，并使用精细咬骨钳行椎板切除术。</li>
	<li>纵向切开硬脊膜，使用虹膜剪和微吸引器联合方法在T4水平横断脊髓，形成约1 mm的头尾向脊髓断端间隙。</li>
	<li>等待约1–2分钟，直至出血完全停止，然后用3-0 Vycril缝线缝合肌肉层，并用伤口夹闭合皮肤。</li>
	<li>术后立即皮下注射乳酸林格氏液（5 ml）、布托啡诺（0.035 mg/kg）和氨苄青霉素（33 mg/kg），并将大鼠置于温暖的孵育箱中直至苏醒。</li>
	<li>术后每日皮下注射一次林格氏液和氨苄青霉素，持续至术后10天；布托啡诺每日两次，持续3天或直至疼痛和痛苦症状消失。动物未完全恢复前不得与其他动物合笼。</li>
	<li>术后约两周内每日手动排尿两次，直至建立反射性排尿功能；此后根据需要每日排尿一次，持续至实验结束。</li>
	<li>两周后，按照上述方法重新麻醉脊髓损伤大鼠，并重新暴露脊髓损伤部位。保持硬脊膜闭合，以保留植入细胞于损伤区域。</li>
	<li>使用内径为40 µm的拉制玻璃微量移液管连接Hamilton注射器，将10 µl细胞悬液（3.5 × 105 µl），该细胞来源于E14期泛表达GFP转基因大鼠胚胎，并包埋于纤维蛋白原和凝血酶5,6中，注射至损伤腔中心以及损伤区头侧和尾侧交界处的多个位点。</li>
	<li>缝合肌肉层，并用伤口夹闭合皮肤。</li>
	<li>按照步骤1.6–1.8所述进行术后注射和膀胱护理。</li>
	<li>灌注前一周，腹腔注射0.5% Fluorogold（FG，0.4 ml溶于蒸馏水）以逆行标记脊髓中的交感前节神经元7。</li>
</ol>
2. 发射器植入
<ol>
	<li>将发射器浸泡于2%戊二醛溶液（4 ml 50%戊二醛加入96 ml蒸馏水中）中，室温下至少1–2小时（最长可达10小时），以进行消毒。</li>
	<li>用无菌0.9%生理盐水彻底清洗发射器3次，并将其保存在生理盐水中直至使用（不超过1小时）。</li>
	<li>在E14细胞移植后第八周（损伤后第十周），对接受脊髓损伤（SCI）并进行或未进行细胞移植的大鼠以及未处理的对照大鼠重新实施麻醉。</li>
	<li>剃除腹部及后肢区域的毛发，使用碘伏清洁皮肤，并将大鼠仰卧位固定于手术台上。</li>
	<li>使用#15刀片在右侧腹侧腹部及大腿内侧切开皮肤。</li>
	<li>用小型剪刀剪开皮下结缔组织，暴露股动静脉束及神经。</li>
	<li>使用尖端弯曲的精细镊子将股动脉与静脉及神经分离。</li>
	<li>在动脉下方放置三条丝线缝合线，并在每条缝线上打松结。</li>
	<li>向动脉表面滴加0.1 ml利多卡因（2%），以促进血管扩张，便于后续插管。</li>
	<li>远端用永久性丝线结扎固定血管，近端通过拉紧一条松结丝线实现暂时性阻断。</li>
	<li>使用20号弯曲针穿刺动脉，并借助导管插入工具将遥测导管（长8 cm）的尖端插入血管。</li>
	<li>将导管向头侧插入至4 cm深度，使导管尖端位于胸主动脉内。</li>
	<li>通过在股动脉周围结扎三条丝线，将导管固定于血管内。</li>
	<li>用钝头剪刀在肋缘后端与膝关节活动范围最前端之间沿体侧皮下制作一个皮下囊袋。</li>
	<li>将发射器本体置入囊袋中，并用缝线将其固定于周围结缔组织，以防止过度移动。</li>
	<li>使用6号丝线缝合皮肤。</li>
	<li>术后立即皮下注射乳酸林格液（5 ml）、布托啡诺（0.035 mg/kg）和氨苄青霉素（33 mg/kg），并将大鼠置于温暖的孵育箱中直至苏醒。</li>
</ol>
3. 基础平均动脉压（MAP）和心率（HR）记录
<ol>
	<li>在植入发射器后最早一天，将单个动物放置在接收垫上并打开发射器。等待约 10 - 15 分钟，使动物适应环境并稳定心血管参数。</li>
	<li>使用计算机化数据采集系统，持续记录至少 1 小时由脉动脉压导出的静息平均动脉压（MAP）和心率（HR），每 5 秒采集一次数据。</li>
	<li>持续监测动物，并在出现明显痉挛时剔除相应数据点。对每只动物的数据点进行平均，以获得平均值。</li>
</ol>
4. 结直肠扩张诱发的自主神经功能异常
<ol>
	<li>将NSC移植大鼠或脊髓损伤对照组大鼠用毛巾固定，并在发射器接收器内提供食物颗粒。通常大鼠在操作过程中能够合作保持不动。</li>
	<li>将带有乳胶球囊的导管插入直肠约2 cm，并用胶带将其固定于尾巴上8。</li>
	<li>打开发射器，等待10–15分钟，使血压恢复至插入导管前的基线水平。</li>
	<li>通过在10秒内缓慢向球囊注入1.4 ml空气并维持1分钟，诱导直肠结肠扩张，产生约30 mmHg的压力。</li>
	<li>记录直肠结肠扩张前1分钟、扩张期间1分钟及扩张后1分钟的平均动脉压（MAP）和心率（HR）；在3分钟操作过程中每3秒采集一次数据。</li>
	<li>每只动物进行2–3次试验，每次试验之间至少间隔15分钟以确保恢复。</li>
	<li>若无需进一步评估，则给予动物上述麻醉剂双倍剂量进行腹腔注射（i. p.）处死&#160;；随后用生理盐水灌注，继之以4%多聚甲醛灌注。</li>
	<li>对每只动物，分别计算直肠结肠扩张前和扩张期间各项指标的平均值；计算每次试验中基线与扩张引起的MAP和HR变化差值；对2–3次试验的结果取平均，获得均值。</li>
</ol>
5. 发射器清洁
<ol>
	<li>在麻醉动物后、灌注前，将发射器从动物体内取出。立即浸入盛有蒸馏水的烧杯中，直至进行清洗；避免遥测装置干燥。</li>
	<li>将遥测仪转移至1% Terg-A-Zyme酶清洗液（10 g/L水）中，在室温下浸泡24小时。</li>
	<li>使用连接至注胶注射器的钝头30号针头，对发射器导管尖端进行注胶处理。</li>
	<li>用折叠的软纸巾小心擦干发射器，并将其存放于原始塑料托盘中。</li>
</ol>

<ol><li>Krassioukov, A. V., Furlan, J. C., Fehlings, M. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Autonomic+dysreflexia+in+acute+spinal+cord+injury%3A+an+under-recognized+clinical+entity%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurotrauma%22%5BJournal%5D)">Autonomic dysreflexia in acute spinal cord injury: an under-recognized clinical entity.</a> J Neurotrauma. 20, 707-716 (2003).</li>
<li>Lindan, R., Joiner, E., Freehafer, A. A., Hazel, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Incidence+and+clinical+features+of+autonomic+dysreflexia+in+patients+with+spinal+cord+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Paraplegia%22%5BJournal%5D)">Incidence and clinical features of autonomic dysreflexia in patients with spinal cord injury.</a> Paraplegia. 18, 285-292 (1980).</li>
<li>Inskip, J. A., Ramer, L. M., Ramer, M. S., Krassioukov, A. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Autonomic+assessment+of+animals+with+spinal+cord+injury%3A+tools%2C+techniques+and+translation%5BTitle%5D)+AND+%22Spinal+Cord%22%5BJournal%5D)">Autonomic assessment of animals with spinal cord injury: tools, techniques and translation.</a> Spinal Cord. 47, 2-35 (2009).</li>
<li>Mayorov, D. N., Adams, M. A., Krassioukov, A. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Telemetric+blood+pressure+monitoring+in+conscious+rats+before+and+after+compression+injury+of+spinal+cord%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurotrauma%22%5BJournal%5D)">Telemetric blood pressure monitoring in conscious rats before and after compression injury of spinal cord.</a> J Neurotrauma. 18, 727-736 (2001).</li>
<li>Hou, S., Tom, V. J., Graham, L., Lu, P., Blesch, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Partial+restoration+of+cardiovascular+function+by+embryonic+neural+stem+cell+grafts+after+complete+spinal+cord+transection%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Partial restoration of cardiovascular function by embryonic neural stem cell grafts after complete spinal cord transection.</a> J Neurosci. 33, 17138-17149 (2013).</li>
<li>Lu, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Long-distance+growth+and+connectivity+of+neural+stem+cells+after+severe+spinal+cord+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">Long-distance growth and connectivity of neural stem cells after severe spinal cord injury.</a> Cell. 150, 1264-1273 (2012).</li>
<li>Akhavan, M., Hoang, T. X., Havton, L. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Improved+detection+of+fluorogold-labeled+neurons+in+long-term+studies%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci+Methods%22%5BJournal%5D)">Improved detection of fluorogold-labeled neurons in long-term studies.</a> J Neurosci Methods. 152, 156-162 (2006).</li>
<li>Maiorov, D. N., Fehlings, M. G., Krassioukov, A. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Relationship+between+severity+of+spinal+cord+injury+and+abnormalities+in+neurogenic+cardiovascular+control+in+conscious+rats%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurotrauma%22%5BJournal%5D)">Relationship between severity of spinal cord injury and abnormalities in neurogenic cardiovascular control in conscious rats.</a> J Neurotrauma. 15, 365-374 (1998).</li>
<li>Laird, A. S., Carrive, P., Waite, P. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cardiovascular+and+temperature+changes+in+spinal+cord+injured+rats+at+rest+and+during+autonomic+dysreflexia%5BTitle%5D)+AND+%22J+Physiol%22%5BJournal%5D)">Cardiovascular and temperature changes in spinal cord injured rats at rest and during autonomic dysreflexia.</a> J Physiol. 577, 539-548 (2006).</li>
<li>Phillips, A. A., Krassioukov, A. V., Ainslie, P. N., Warburton, D. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Baroreflex+function+after+spinal+cord+injury%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurotrauma%22%5BJournal%5D)">Baroreflex function after spinal cord injury.</a> J Neurotrauma. 29, 2431-2445 (2012).</li>
<li>Osborn, J. W., Taylor, R. F., Schramm, L. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Determinants+of+arterial+pressure+after+chronic+spinal+transection+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol%22%5BJournal%5D)">Determinants of arterial pressure after chronic spinal transection in rats.</a> Am J Physiol. 256, 666-673 (1989).</li>
<li>Rabchevsky, A. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+gabapentin+on+muscle+spasticity+and+both+induced+as+well+as+spontaneous+autonomic+dysreflexia+after+complete+spinal+cord+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Physiol%22%5BJournal%5D)">Effects of gabapentin on muscle spasticity and both induced as well as spontaneous autonomic dysreflexia after complete spinal cord injury.</a> Front Physiol. 3, 329(2012).</li>
<li>Hou, S., Lu, P., Blesch, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Characterization+of+supraspinal+vasomotor+pathways+and+autonomic+dysreflexia+after+spinal+cord+injury+in+F344+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Auton+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Characterization of supraspinal vasomotor pathways and autonomic dysreflexia after spinal cord injury in F344 rats.</a> Auton Neurosci. 176, 54-63 (2013).</li>
</ol>

作者无任何利益冲突需要披露。

传统上，将充满液体的套管插入动脉并连接至压力传感器，以在每只动物身上记录心血管参数的终末快照11。为了长期连续监测心血管功能，许多实验室采用无线电遥测系统。这种更为精细的工具可在清醒、自由活动的动物中记录血压。与充满液体的导管相比，遥测技术被认为是一种更先进的方法，可准确评估脊髓损伤（SCI）动物的心血管功能。尽管在本研究中，发射器仅在记录前1天植入，但根据实验需求，其可在脊髓损伤前或损伤后植入，以实现多次数据采集12。对于基础血压和心率（HR），既可通过中枢也可通过外周方式进行记录。然而，根据我们的经验，基于无创尾套法无法检测到对直肠结肠扩张引起的心血管反应。近期的遥测分析证实，在大鼠完全性高位胸段脊髓横断后，低血压和心动过速可长期持续存在9,13。我们在SCI对照组大鼠中观察到的基础平均动脉压（MAP）较低、心率较高，与先前使用相同记录技术的研究报道一致。接受细胞移植的大鼠中，直肠结肠刺激诱发的自主神经反射异常有所缓解。根据我们的组织学证据，多节段脊髓内去甲肾上腺素能和5-羟色胺能纤维向脊髓中间外侧核（SPNs）的投射增加，可能是生理功能改善的原因。
<p c...

脊髓损伤（SCI）高位损伤后会出现心血管功能障碍。其表现为静息状态下血压和心率紊乱、直立性低血压、运动诱发的低血压，以及自主神经反射异常，后者以下损伤平面的感觉刺激诱发高血压发作及压力感受器介导的反射性心动过缓为特征1,2。这些症状严重影响脊髓损伤患者日常生活。因此，建立有效的研究工具以评估脊髓损伤动物模型的心血管变化及实验性治疗手段显得尤为重要。
为了研究动物的心血管功能，已有多种技术用于监测血压和心率。中心心血管参数可通过插管法和遥测技术进行记录，而无创尾套法则可用于测量外周血压3。与其他方法相比，遥测技术的主要优势在于能够对自由活动的动物进行连续记录，并实现心血管功能的长期监测4。在脊髓损伤（SCI）动物模型中，实验刺激后外周血压的变化可能不够显著，难以被检测到。因此，应为脊髓损伤动物选择合适的心脏监测技术。
本研究中，采用遥测系统监测成年大鼠在完全性脊髓横断后的心血管功能。在损伤部位移植了同系大鼠胚胎第14天（E14）脑干来源的神经干细胞（BS-NSCs）。未移植的损伤大鼠以及未受伤的正常大鼠作为对照组。遥测操作流程包括发射器的灭菌与植入（图1）、基础心血管参数的记录、结直肠扩张诱导的反应检测，以及发射器的清洁与保存。

<table><tbody><tr><td>纤维蛋白原（大鼠）</td><td>Sigma</td><td>F6755-25MG</td><td>37℃下2小时 &lt;sup&gt;o&lt;/sup&gt;C 以溶解</td></tr><tr><td>凝血酶（大鼠）</td><td>Sigma</td><td>T5772-100UN</td><td>在10 mM CaCl2中溶解</td></tr><tr><td>1% Terg-A-Zyme</td><td>Sigma</td><td>Z273287</td><td>用于遥测仪清洁的酶解溶液</td></tr><tr><td>Fluorogold</td><td>荧光染料</td><td></td><td>用蒸馏水溶解，避光保存</td></tr><tr><td>遥测仪&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp; (PA-C40)</td><td>Data Sciences International</td><td></td><td></td></tr><tr><td>遥测记录与分析系统</td><td>Data Sciences International</td><td></td><td>信号刺激器，数据交换矩阵，接收器，环境压力参考监测仪</td></tr><tr><td>球囊导管</td><td>爱德华生命科学</td><td>111F7-P</td><td>用于结直肠扩张</td></tr></tbody></table>

一种用于监测脊髓横断并移植胚胎神经干细胞大鼠心血管功能的遥测系统

A Radio-telemetric System to Monitor Cardiovascular Function in Rats with Spinal Cord Transection and Embryonic Neural Stem Cell Grafts

高位胸段或颈段脊髓损伤（SCI）可导致心血管功能障碍。为了监测心血管参数，我们在接受T4脊髓完全横断手术的大鼠股动脉内植入了连接无线发射器的导管，部分大鼠同时移植了表达绿色荧光蛋白的胚胎脑干来源神经干细胞。与其他方法（如插管或尾套法）相比，遥测技术的优势在于能够对自由活动动物的血压和心率进行连续监测，并可实现长期、多次的数据采集。在脊髓损伤大鼠模型中，成功记录了无束缚状态下基础心血管数据以及对直肠结肠扩张诱发的自主神经反射异常反应。此外，若在脊髓横断前预先植入发射器，则可在同一只大鼠中比较脊髓损伤前后的心血管参数。该遥测技术的一个局限性在于，股动脉内植入可能影响同侧后肢的血液供应。

利用上述遥测技术，我们成功记录了脊髓损伤动物的心血管参数。在仅发生脊髓损伤（SCI）的动物中，平均动脉压（MAP）显著降低，而心率（HR）升高，与未受干预的对照动物相比，结果与既往报道一致9。在接受脑干来源神经干细胞（BS-NSC）移植的动物中，MAP和HR接近未受干预动物的水平（图2）。在进行直肠结肠扩张时，若有害刺激引起MAP升高和HR降低，则认为该大鼠出现自主神经反射异常3,8。所有动物均不可避免地出现阵发性高血压及压力感受器反射介导的缓脉，但不同组别之间反应程度存在差异。接受BS-NSC移植动物的MAP升高幅度明显低于仅受损伤动物（16.9 ± 3.1 mmHg，n = 3 对比 64.1 ± 1.6 mmHg，n = 3）（图3）。然而，在直肠结肠扩张期间，各组间HR的下降程度无显著差异。由于缓脉主要由压力感受性反射机制介导，该差异可能源于脊髓损伤后压力感受器敏感性降低10。无论接受何种处理，大多数大鼠在直肠结肠扩张期间均出现肌肉痉挛。
经...

我们介绍了一种利用无线电遥测系统记录胚胎脑干神经干细胞移植至损伤部位八周后T4脊髓横断大鼠心血管参数的实验方案。遥测技术是一种先进的方法，可用于准确评估清醒、自由活动的脊髓损伤大鼠的心血管功能。

高位胸段或颈段脊髓损伤（SCI）可导致心血管功能障碍。为监测心血管参数，我们植入了一根导管……

本实验的总体目标是在移植了胚胎神经干细胞的脊髓损伤大鼠体内植入发射器，以记录其心血管参数。该目标的实现首先需要在成年大鼠的T4水平完全横断脊髓。两周后，下一步操作是将来自胚胎第14天大鼠脑干的神经干细胞移植到损伤部位。八周后的第三步是将发射器植入大鼠的股动脉。最后的步骤是采集生命体征数据，并通过结直肠扩张诱导自主神经反射异常。最终，通过遥测记录的结果可以显示，接受胚胎神经干细胞移植的大鼠其心血管功能部分恢复。该方法的可视化演示至关重要，因为发射器植入和直肠结肠区分难以掌握，需要具备专业技能才能完成。在植入发射器前八周，大鼠必须接受脊髓损伤手术，可选择是否进行细胞移植。本方案的详细信息在文中提供。首先对这些大鼠或未经处理的对照大鼠重新进行麻醉。确认大鼠完全麻醉后，剃除腹部区域和后肢的毛发。用碘伏清洁暴露的皮肤，然后将大鼠转移至手术区域，并置于仰卧位。使用剪刀从腹部腹侧至右侧内侧大腿做第一处切口。剪开皮下组织以暴露股神经及血管。接着使用弯头镊子分离股动脉、静脉和神经。然后在动脉下方放置三根缝线，每根均松松结扎，并用 0.1 毫升 2% 利多卡因使动脉扩张。随后用永久性丝线结扎远端血管。通过收紧缝线暂时阻断近端动脉。现在使用20号弯针刺入孔洞中的动脉。利用导管插入工具，将一根8厘米长的无菌遥测导管尖端插入。推进导管，缓慢插入至多4厘米，使导管尖端置于胸主动脉内。为固定导管，在动脉周围再绑两道丝线缝合。现在使用钝头剪刀，在肋骨下缘与膝盖最颅侧延伸范围之间的侧腹部皮下制作一个囊袋，将发射器主体插入该囊袋中。缝合周围组织以更好地固定发射器。使用6-0丝线缝合皮肤。手术后立即皮下注射5毫升乳酸林格液，以及皮下注射布托啡诺和氨苄西林。将大鼠置于温暖的培养箱中，直至其在发射器植入后的第二天苏醒。将动物放置在接收器垫上并打开发射器。让动物适应环境10至15分钟。大鼠的心血管参数应趋于稳定，然后测量其静息平均动脉压。该数值是通过每5秒采集一次、持续一小时的脉搏动脉压数据计算得出。在此一小时内，需持续监测动物状态，并剔除因明显痉挛所采集到的数据点，以避免诱发大鼠的自主神经反射异常。首先用毛巾固定动物。将大鼠置于接收器上方，以采集植入式发射器的数据。接着，将带有球囊的导管插入其直肠内。将其插入约两厘米深，并用胶带固定在尾巴上。打开发射器，等待10至15分钟，使动物的血压在基线期恢复至插管前的基线水平。每三秒记录一次平均动脉压，持续一分钟。然后在10秒内缓慢向球囊导管注入1.4毫升空气，并维持压力1分钟。产生的压力约为30托（torr）。继续从发射器记录数据1分钟。充气后，每次试验之间至少间隔15分钟，重复此过程两到三次。然后通过过量麻醉处死动物，随后灌注脊髓。受伤的大鼠按照所述方法植入发射器。在损伤部位移植了脑干来源的神经干细胞的动物，其基础平均动脉压和心率与未损伤的对照动物相似。损

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无线电遥测系统，以监测大鼠脊髓横断和胚胎神经干细胞移植在心血管功能

介绍了一种用于自由活动小鼠的市售遥测发射器植入手术技术，该发射器可连续测量生物电位（单导联心电图）、心率、核心体温和运动活动。同时提供了术后护理和镇痛的建议与操作规程，以促进动物恢复、改善健康状况并提高存活率。...

植入遥测发射器以获取自由活动实验小鼠心电图、心率、核心体温和活动数据

含有生长因子的纤维蛋白基质被用于将移植的神经干细胞固定在完全性脊髓横断损伤部位。移植的细胞完全填充了损伤空腔，并分化为多种神经细胞类型，包括能够向宿主脊髓长距离延伸轴突的神经元。...

严重脊髓损伤后使用纤维蛋白与生长因子混合物促进神经干细胞的存活与分化

将遥测装置的导管植入腹主动脉，以在高位胸段脊髓横断术前和术后持续采集动物逐搏的血流动力学数据。采用一种新型的JAVA软件来分析血流动力学参数以及自主神经反射异常自发发作的频率和强度。...

开发一种算法，利用遥测设备对高段脊髓损伤动物的自主神经反射异常进行全面研究

麻醉小鼠表现出非生理性的全身血压，由于血压与自主神经系统之间存在密切关系，这使得无法对自主神经张力进行有意义的评估。因此，本文介绍了一种在清醒小鼠中同时记录肾交感神经活动和血压并进行静脉输注的新方法。...

清醒自由活动小鼠中同时记录肾交感神经活动和血压并进行静脉输注的新方法

本文介绍了一种技术：在脊髓完全横断后，将一个中空导管插入脊髓残端之间，并填充施万细胞（SCs）和可注射的基底膜基质，以桥接断端并促进轴突跨越缺损区域再生。...

将雪旺细胞移植至聚偏氟乙烯-三氟乙烯导管内以桥接大鼠横断脊髓残端促进轴突再生跨越缺损

本文介绍了一种结合激光多普勒血流成像（LDPI）和激光多普勒血流监测（LDPM）的方法，用于测量脊髓局部血流量和氧饱和度（SO2），以及一种在大鼠中建立脊髓损伤的标准化操作流程。...

利用激光多普勒成像与监测技术分析大鼠脊髓微循环

本文展示了在成年小鼠中建立的一种保留中央管微环境（该微环境容纳内源性神经干细胞（NSCs））的最小化脊髓损伤模型的操作方法。我们介绍了如何利用神经球形成实验来定量分析损伤后确定性神经干细胞和原始神经干细胞的激活与迁移情况。...

一种用于评估轻度脊髓损伤小鼠模型中内源性神经干细胞激活的神经球形成实验

大鼠胸段脊髓半切术是一种有价值的、可重复的单侧脊髓损伤模型，可用于研究运动功能恢复的神经机制及治疗效果。本文提供了详细的分步操作指南，介绍如何实施脊髓半切手术，并在开放场地环境中评估动物的运动功能表现。...

大鼠胸段脊髓半切手术及开放场地运动功能评估

本文介绍了一种用于安装和制备肌内电极的方案，以及一种可安装在动物身上、微型化的肌电图（EMG）测量装置，适用于运动研究中的EMG分析。该系统能够无线传输实时EMG数据，用于研究脑卒中模型大鼠的运动功能恢复。...

一种用于小型动物的实时可穿戴肌电测量系统

本文介绍了一种在大鼠降主动脉内植入in...

体内 遥测技术用于长期记录脊髓损伤大鼠模型的心血管参数、体温及活动度

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