Name: Immunotargeted的合成磁等离子团簇 (视频) | JoVE Journal
Uploaded: 2014-08-22T16:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 43 s
Description: 学习合成免疫靶向磁等离子纳米团簇的方法，通过制备氧化铁核心、沉积金壳层及油水微乳液组装技术，实现强磁性及近红外吸收特性。该方法可用于靶向药物递送和分子成像等生物医学应用。

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本工作部分得到了美国国立卫生研究院（NIH）基金项目R01 EB008101和R01 CA103830的支持。

1. 仪器与玻璃器皿的准备
<ol>
	<li>穿戴适当的防护装备， 即实验服、一次性手套和护目用具。</li>
	<li>将圆底烧瓶连接至冷凝管，并将其浸入硅油浴中，通过温度计监测油浴温度。放置热源（例如， 热板）置于油浴下方（图1使用能够测量高于260 °C温度的温度计。</li>
</ol>
2. 一次杂化磁等离子体纳米颗粒的合成
<ol>
	<li>制备磁性核纳米颗粒
	<ol>
		<li>将353.2 mg（1 mmol）乙酰丙酮铁(III)、1 ml（2 mmol）油酸、1 ml（2 mmol）油胺、1.292 g（5 mmol）1,2-十六烷二醇和10 ml苯基醚加入圆底烧瓶中。</li>
		<li>使用磁力搅拌子剧烈搅拌混合物，并在回流条件下加热至250–260 °C，持续1小时。随后，等待溶液冷却至室温。确保温度低于260 °C，以防止苯基醚沸腾，避免反应混合物从圆底烧瓶喷溅至冷凝管。 
		注意：反应混合物温度极高，化学品可能引起刺激。必须在通风橱内操作，并佩戴适当的个人防护装备。确保油浴具有足够的通风。 
		备注：在磁性纳米颗粒合成过程中，油浴需保持在250–260 ºC温度下持续1&#160;小时。原则上可使用Pyrex玻璃皿实现该目的。然而，根据供应商信息，Pyrex玻璃的最高持续使用温度约为260 ºC。因此，金属容器是更安全的选择，因其可耐受更高温度，并在多次使用中具有更长的使用寿命。</li>
	</ol>
	</li>
	<li>在磁性核纳米颗粒上沉积金壳
	<ol>
		<li>将411.5 mg（1.1 mmol）乙酸金、0.25 ml（0.75 mmol）油酸、1.5 ml（3.0 mmol）油胺、775.3 mg（3 mmol）1,2-十六烷二醇和15 ml苯基醚加入圆底烧瓶中。</li>
		<li>加入5 ml来自步骤2.1的磁性纳米颗粒悬浮液。将反应混合物加热至180 °C，并在回流条件下保持1小时。等待溶液冷却至室温。</li>
		<li>加入50 ml乙醇以沉淀杂化初级纳米颗粒，随后在3,250 × g条件下离心15分钟。</li>
		<li>使用水浴超声仪将沉淀物重悬于25 ml正己烷中。加入25 ml乙醇以再次沉淀初级杂化纳米颗粒。在3,250 x&#160;g条件下离心15分钟，并将沉淀物重新悬浮于正己烷中。重复此步骤三次。</li>
		<li>将沉淀的初级杂化纳米颗粒在真空干燥器中过夜干燥。确认颗粒已完全干燥。</li>
	</ol>
	</li>
</ol>
3. 杂化磁等离子体纳米簇的合成与尺寸分离
<ol>
	<li>使用水浴超声仪将5 mg干燥的初级杂化纳米颗粒溶于1 ml正己烷中。超声处理纳米颗粒悬浮液，直至无可见沉淀物。</li>
	<li>将步骤3.1所得溶液逐滴加入含有10 ml十二烷基硫酸钠水溶液（2.8 mg/ml）的20 ml带盖玻璃小瓶中。逐滴加入初级杂化纳米颗粒悬浮液，以避免在下一步操作前两相过早混合。</li>
	<li>将两相混合液在水浴超声仪中超声处理2小时，随后在80 °C水浴中加热10分钟。待溶液冷却至室温。
	<ol>
		<li>将水加至超声仪工作液位线处。将玻璃小瓶置于超声仪中心位置。两相之间立即形成乳液。超声开始后用手轻轻摇动两相溶液，以促进含初级杂化纳米颗粒的相与下层水相之间的混合。 
		注意：超声仪连续运行2小时后会产生热量，请注意。</li>
	</ol>
	</li>
	<li>将杂化纳米团簇悬浮液在100 x&#160;g条件下离心30分钟。收集沉淀和上清液。将沉淀在0.1 mM柠檬酸钠溶液中重新悬浮，并进行10分钟超声处理。所得纳米团簇的预期直径约为180 nm。</li>
	<li>将步骤3.3所得上清液转移至新的锥形管中。</li>
	<li>将步骤3.4所得悬浮液在400 x&#160;g条件下离心30分钟。收集沉淀和上清液。将沉淀在0.1 mM柠檬酸钠溶液中重新悬浮，并进行10分钟超声处理。所得纳米团簇的预期直径约为130 nm。</li>
	<li>将步骤3.5所得上清液转移至新的锥形管中。</li>
	<li>将步骤3.6所得悬浮液在1,500 x&#160;g条件下离心30分钟。收集沉淀，并在0.1 mM柠檬酸钠溶液中重新悬浮，进行10分钟超声处理。所得纳米团簇的预期直径约为90 nm。</li>
	<li>取300 μl纳米团簇悬浮液加入96孔微孔板，用于测定UV-Vis-NIR吸收光谱。取10 μl纳米团簇悬浮液滴加于碳支持膜铜网上，用于透射电子显微镜（TEM）成像。</li>
</ol>
4. 单克隆抗体与纳米簇的偶联
<ol>
	<li>在 PBS（pH 7.2）中配制 100 μl 单克隆抗体溶液（1 mg/ml） 例如，抗表皮生长因子受体2（HER2）抗体或抗表皮生长因子受体1（EGFR）抗体。</li>
	<li>将步骤 4.1 中的抗体溶液加入 3.9 ml 4 mM HEPES（pH 7.2）中。将溶液通过 10 k MWCO 离心滤膜，在 3,250 x&#160;g，20 分钟，8 °C。用 4 mM HEPES（pH 7.2）将抗体重悬至终体积 100 μl。 
	注意：此步骤旨在用 HEPES 缓冲液替换抗体溶液中的原始培养基。</li>
	<li>加入10 μl 100 mM NaIO4 加入100 μl抗体溶液。用铝箔包裹反应管，在室温下使用旋转摇床混匀30分钟。</li>
	<li>通过加入 500 μl 的 1x PBS 终止反应。</li>
	<li>加入 2 μl 的 46.5 mM 连接剂溶液（二硫代芳基 PEG6-CONHNH）2将步骤 4.4 中的抗体溶液加入并室温振荡孵育 1 小时。</li>
	<li>使用10 k MWCO离心过滤器在3,250 x g条件下过滤溶液&#160;8 °C下离心20分钟。用1×PBS重悬抗体至终体积100 μl，得到抗体浓度约为1 mg/ml。</li>
	<li>将100 μl O.D. ~1.0的纳米簇悬液与1 μl来自步骤4.6的修饰抗体（1 mg/ml）在室温下混合孵育120分钟。</li>
	<li>加入10 μl的10-3 5 kDa 巯基 PEG，室温下振荡 15 分钟。</li>
	<li>将溶液在830 x g下离心&#160;离心3分钟，弃去上清液，将沉淀重悬于100 μl含2%（w/v）5 kDa PEG的PBS（pH 7.2）中。</li>
	<li>测量抗体偶联纳米簇的吸光度谱，并与未修饰纳米簇的吸光度谱进行比较。偶联后预期出现数纳米的红移。</li>
	<li>如果纳米颗粒发生聚集，表现为红光至近红外区域吸光度（O.D.）显著升高，则将巯基聚乙二醇（thiol PEG）的浓度提高至5倍&#160;10-3 M。此外，将巯基PEG的孵育时间延长至30分钟，并将离心速度降低至200 × g&#160;克增量。</li>
	<li>用于癌细胞标记检测时，将步骤4.9中获得的抗体偶联纳米颗粒加入癌细胞悬液中，悬液可为培养基或1×PBS（1 ml约含10⁶细胞）。6 细胞）并混匀60分钟。</li>
</ol>

<ol><li>Bigall, N. C., Parak, W. J., Dorfs, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fluorescent%2C+magnetic+and+plasmonic%E2%80%94Hybrid+multifunctional+colloidal+nano+objects%5BTitle%5D)+AND+%22Nano+Today%22%5BJournal%5D)">Fluorescent, magnetic and plasmonic—Hybrid multifunctional colloidal nano objects.</a> Nano Today. 7, 282-296 (2012).</li>
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<li>Truby, R. L., Emelianov, S. Y., Homan, K. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ligand-mediated+self-assembly+of+hybrid+plasmonic+and+superparamagnetic+nanostructures%5BTitle%5D)+AND+%22Langmuir%22%5BJournal%5D)">Ligand-mediated self-assembly of hybrid plasmonic and superparamagnetic nanostructures.</a> Langmuir. 29, 2465-2470 (2013).</li>
<li>Bai, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+Versatile+Bottom%E2%80%90up+Assembly+Approach+to+Colloidal+Spheres+from+Nanocrystals%5BTitle%5D)+AND+%22Angewandte+Chemie+International+Edition%22%5BJournal%5D)">A Versatile Bottom‐up Assembly Approach to Colloidal Spheres from Nanocrystals.</a> Angewandte Chemie International Edition. 46, 6650-6653 (2007).</li>
</ol>

作者声明不存在任何竞争性经济利益。

成功合成磁等离子体纳米簇的关键步骤包括制备高度单分散的金壳/氧化铁核初级纳米颗粒，以及引导这些初级颗粒自组装形成纳米簇。初级颗粒与表面活性剂之间的摩尔比在决定纳米簇尺寸分布方面起着重要作用。初级纳米颗粒尺寸分布不均可能导致在磁等离子体纳米簇组装过程中形成大的聚集体。此外，纳米簇形成的微乳液方法依赖于两亲性表面活性剂：疏水尾基将初级纳米颗粒聚集在一起，而亲水头基则在水溶液中稳定纳米簇。表面活性剂的浓度决定了纳米簇的组装行为：高浓度会导致形成较小的纳米簇或单个初级颗粒，而低浓度则会引起颗粒聚集。
新合成的纳米簇具有较宽的尺寸分布，范围从 约 50 nm 到 约 300 nm，需要额外的分离步骤。按照上述方案中逐渐增加离心速度的方式进行离心，可获得良好的分离效果，所得各组分的粒径分布分别为 90 ± 18 nm、130 ± 26 nm 和 180 ± 39 nm。若需进一步实现更精细的分离以获得更窄的粒径分布，可采用尺寸排阻色谱法。还应注意，这些纳米簇在红光至近红外区域具有宽广的吸收特性，因而可利用该范围内的任意光源激发其表面等离子体共振 约 ...

由具有不同理化性质的多种材料组成的杂化纳米颗粒可在生物医学应用中开辟新的机遇，包括多模态分子成像、治疗递送与监测、新型筛选与诊断检测方法1-3。将等离子体与磁性特性集于单一纳米颗粒中尤其引人关注，因为它兼具等离子体共振相关的强光散射与吸收截面，以及对外加磁场的响应能力。&#160;例如，磁-等离子体纳米颗粒已被用于通过外部电磁铁施加时间信号调制，从而增强标记细胞暗场成像中的对比度3-5。最近，类似原理已被应用于一种新型成像技术——磁-光声成像的开发中，其中磁-等离子体纳米颗粒显著提升了&#160;对比度和信背比6,7。已有研究证明，此类杂化纳米颗粒可用于全血及体内循环肿瘤细胞的同步捕获与检测8,9。&#160;此外，磁-等离子体纳米颗粒是一类极具前景的诊疗一体化试剂，可实现分子特异性光学与磁共振成像，并结合光热治疗用于癌细胞的靶向治疗10。
已探索多种方法用于合成磁等离子体纳米颗粒。例如，Yu 等 利用了Fe(CO)的分解与氧化5 开启&#160;金纳米颗粒形成哑铃状双功能Au–Fe3O4 纳米颗粒11. Wang 等 已通过热分解法制备了金包覆的氧化铁纳米颗粒12一些其他方法依赖于将聚合物或胺功能分子包覆在磁性核纳米颗粒上，随后在聚合物表面沉积金壳，以制备杂化颗粒7,13此外，通过静电相互作用或化学反应将氧化铁纳米颗粒连接到金纳米棒上14,15尽管这些方法能够制备出磁-等离激元纳米结构，但在一定程度上会牺牲该复合结构的某些关键性能，例如近红外（NIR）窗口内的光学吸收能力或强磁矩，而这些特性在生物医学应用中极为重要。例如，&#160;哑铃形金-铁3O4 纳米颗粒在520 nm处具有等离子体共振峰，这限制了其应用范围 体内 由于该光谱范围内组织浑浊度较高。此外，所制备的磁等离子体纳米颗粒&#160;现有方案仅限于一种11 或少数（少于10个）14,15 超顺磁性基团（例如，其包含的氧化铁纳米颗粒数量远低于致密排列的纳米结构所能达到的水平。例如，一个紧密堆积的直径为60 nm的球形纳米颗粒，可容纳约一千个直径为6 nm的超顺磁性纳米颗粒。因此，这类杂化纳米颗粒的磁学性能仍有很大的提升空间。此外，前述部分已有报道的制备方法相对复杂，且在合成过程中需要精细优化，以避免颗粒发生聚集。14,15.
在此，我们描述了一种合成具有强磁矩和强近红外吸收性能的磁等离子体纳米颗粒的方案，该方案克服了现有技术的主要局限性。该合成方法源于油包水微乳液法。16基于将更小的初级粒子组装成所需尺寸的纳米粒子。该方法已成功用于由单一材料（如金、氧化铁和半导体初级粒子）制备纳米结构。16我们将其拓展应用于磁-等离子体纳米粒子的合成，首先制备直径为6 nm的金壳/氧化铁核颗粒，然后将这些初级杂化颗粒组装成最终的球形纳米结构。将初级颗粒组装成纳米簇不仅能够增强其组成纳米粒子的性能，例如在保持超顺磁性的同时获得更强的磁矩，还能利用各个纳米粒子之间的相互作用，从而&#160;创建&#160;在近红外窗口具有强烈光学吸收等原始组分纳米粒子所不具备的新特性。该方案可制备出具有高密度磁性和等离激元功能的杂化纳米粒子。在完成初级粒子的合成后，本方法本质上为一个简单的单釜反应。整体等离激元共振强度和磁矩由以下因素决定&#160;初级粒子的数量，因此可根据具体应用轻松优化。此外，我们还开发了一种将抗体偶联到杂化纳米粒子的方案，适用于需要分子特异性靶向的各种生物医学应用。抗体通过其Fc片段连接，从而保留负责抗原结合的Fab区域用于靶向。

<table><tbody><tr><td>PYREX 50 ml 短颈圆底烧瓶 &amp;amp; 24/40 [ST] 关节</td><td>康宁</td><td>4320A-50</td><td>热分解反应</td></tr><tr><td>PYREX 41 x 300 mm 五球阿林冷凝管，外/内接口为 24/40 [ST]</td><td>康宁</td><td>2480-300</td><td>热分解反应</td></tr><tr><td>硅油</td><td>Fisher</td><td>S159-500</td><td>油浴</td></tr><tr><td>加热磁力搅拌器</td><td>康宁</td><td>PC-351</td><td>在搅拌条件下加热反应</td></tr><tr><td>温度计</td><td>ThermoWorks</td><td>221-092</td><td>测量温度</td></tr><tr><td>乙酰丙酮铁(III)</td><td>Fisher</td><td>AC11913-0250</td><td>初级杂化纳米颗粒合成材料</td></tr><tr><td>油酸 99%</td><td>Fisher</td><td>A195-500</td><td>初级杂化纳米颗粒合成材料</td></tr><tr><td>乙酸金(III)</td><td>Fisher</td><td>AA3974206</td><td>初级杂化纳米颗粒合成材料</td></tr><tr><td>己烷</td><td>Fisher</td><td>H292-1</td><td>初级杂化纳米颗粒合成材料</td></tr><tr><td>苯醚 99%</td><td>Fisher</td><td>AC13060-0025</td><td>初级杂化纳米颗粒合成材料</td></tr><tr><td>1,2-十六烷二醇 90%</td><td>Sigma</td><td>213748-50G</td><td>初级杂化纳米颗粒合成材料</td></tr><tr><td>油胺 70%</td><td>Sigma</td><td>O7805-100G</td><td>初级杂化纳米颗粒合成材料</td></tr><tr><td>十二烷基硫酸钠</td><td>Fisher</td><td>BP166-100</td><td>团簇合成</td></tr><tr><td>柠檬酸钠二水合物</td><td>Sigma</td><td>W302600</td><td>团簇合成</td></tr><tr><td>单克隆抗EGF受体抗体</td><td>Sigma</td><td>E2156</td><td>细胞标记特异性检测</td></tr><tr><td>单克隆抗HER2抗体</td><td>Sigma</td><td>AMAB90627</td><td>细胞标记特异性检测</td></tr><tr><td>高碘酸钠</td><td>Sigma</td><td>311448</td><td>氧化抗体的 Fc 区域</td></tr><tr><td>二硫代芳香族 PEG6-CONHNH&lt;sub&gt;2&lt;/sub&gt;</td><td>SensoPath Technologies</td><td>SPT-0014B</td><td>用于抗体与纳米簇偶联的双功能连接剂</td></tr><tr><td>甲氧基-聚乙二醇-硫醇，5 k</td><td>Creative PEGworks</td><td>PLS-604</td><td>抗体偶联后钝化剩余的金表面</td></tr><tr><td>Amicon Ultra-4 离心滤过装置（Ultracel-10 膜）</td><td>Millipore</td><td>UFC801008</td><td>蛋白质纯化</td></tr><tr><td>HEPES</td><td>Sigma</td><td>H3375</td><td>缓冲液</td></tr><tr><td>PBS，1×溶液</td><td>Fisher</td><td>BP2438-20</td><td>缓冲液</td></tr><tr><td>紫外-可见光谱法</td><td>BioTek&amp;nbsp;</td><td>Synergy HT</td><td>获取光谱</td></tr><tr><td>离心</td><td>Eppendorf</td><td>5810R</td><td>分离</td></tr><tr><td>透射电子显微镜</td><td>FEI</td><td>TECNAI G2 F20 X-TWIN</td><td>获取纳米结构的形貌</td></tr><tr><td>直立显微镜</td><td>Leica</td><td>DM6000</td><td>获取暗场图像</td></tr><tr><td>超声波破碎仪</td><td>布拉森</td><td>1510</td><td>超声处理</td></tr><tr><td>碳支持膜300目铜网</td><td>EMS</td><td>CF300-Cu</td><td>透射电子显微镜成像</td></tr><tr><td>96孔板</td><td>康宁</td><td>09-761-145</td><td>紫外-可见光读板仪</td></tr></tbody></table>

免疫靶向磁-等离子体纳米簇的合成

Synthesis of Immunotargeted Magneto-plasmonic Nanoclusters

单个纳米颗粒中结合磁性与等离子体特性，可在多种生物医学应用中产生协同效应，包括在新型磁驱成像模式中增强对比度、同时捕获&#160;和检测循环肿瘤细胞（CTCs），&#160;以及结合光热治疗的多模态分子成像。这些应用激发了人们对开发具有近红外（NIR）区光学吸收性和强磁矩的磁等离子体纳米颗粒合成方案的广泛兴趣。本文介绍一种基于水包油微乳液法的新型杂化纳米颗粒合成方案。本方案的独特之处在于，利用同样具备磁等离子体特性的初级结构单元，合成出不同尺寸的磁等离子体纳米颗粒。该方法获得的纳米颗粒具有高密度的磁性和等离子体功能单元，且在纳米颗粒体积内均匀分布。通过Fc片段将抗体连接至杂化纳米颗粒，可轻松实现功能化，同时保留负责抗原结合的Fab区域，用于靶向识别。

一种免疫靶向磁-等离子体纳米簇合成方案如图所示 图2首先，使用磁性Fe3O4 氧化铁纳米颗粒通过热分解法制备。随后，包被一层薄薄的 约 通过热分解法在氧化铁核颗粒上沉积1 nm的金壳。初级 约 6 nm杂化纳米颗粒作为种子，通过水包油微乳液法构建磁等离子体纳米簇。该纳米簇经单克隆抗体功能化修饰，实现分子特异性靶向。
合成的氧化铁核纳米颗粒的尺寸约为5 nm直径。在磁性核上沉积金壳后，氧化铁核/金壳初级纳米颗粒的尺寸增大至约6 nm直径。胶体颜色从氧化铁纳米颗粒的棕色变为沉积金壳后的红紫色，最终在初级颗粒组装成直径约180 nm的球形纳米簇后，呈现紫灰色（图3）。紫外-可见光谱显示，氧化铁核/金壳初级纳米颗粒在530 nm处具有明显的共振峰，而未包覆的氧化铁颗粒则无此峰（图4）。在形成簇结构后，光谱发生显著变化，并表现出强烈的宽近红外吸收（图4）。
<p clas...

本文介绍一种合成具有强磁矩和强近红外（NIR）吸收能力的磁等离子体纳米颗粒的实验方案。该方案还包括通过抗体的Fc片段将抗体偶联到纳米颗粒上，适用于需要分子特异性靶向的各种生物医学应用。

单个纳米颗粒中结合磁性与等离子体特性，可在多种生物医学应用中产生协同优势……

本实验的总体目标是合成具有强磁矩和强近红外吸收能力的免疫靶向磁-等离子体纳米簇。该目标的实现分为两个步骤：首先合成氧化铁核纳米颗粒，第二步是在氧化铁核纳米颗粒表面沉积金壳层。接下来，通过油水微乳液法形成纳米簇。最后一步是将单克隆抗体与纳米簇进行偶联。最终，通过暗场成像展示免疫靶向磁等离子体纳米簇的分子特异性。本方法结合了简单纳米颗粒合成工艺，具有强磁矩，同时不牺牲超顺磁性能以及强可见光至近红外吸收特性，克服了以往方法的主要局限。该实验流程将由在我实验室中开发出此方法的研究生 Frank W. 演示。制备纳米颗粒时，首先在通风橱中安装好实验器具，将圆底烧瓶连接至冷凝管，并将其浸入置于加热板上的硅油浴中。使用可读取至160摄氏度以上的温度计监测反应浴，并穿戴防护装备。由于反应温度过高，不适合使用派热克斯玻璃（Pyrex），因此需在金属烧瓶中开始混合试剂。制备磁性纳米颗粒悬浮液时，需混合乙酰丙酮铁、油酸、油胺、1,2-十六烷二醇、三乙二醇单甲醚和苯基醚。剧烈搅拌混合物，并将其加热至250至260摄氏度。切勿加热过高，否则苯基醚会沸腾，导致容器破裂。在回流条件下维持高温反应一小时，然后让反应物冷却。回到室温，以在磁性核纳米颗粒上沉积金壳。将以下物质加入一个新的圆底烧瓶中：乙酸金、油酸、油胺、1,2-己二醇和苯基醚。然后加入五毫升磁性纳米颗粒悬浮液。将该反应加热至180摄氏度，并在此温度下回流保持一小时。随后等待溶液冷却至室温。为了沉淀杂化初级纳米颗粒，向悬浮液中加入50毫升乙醇。然后将悬浮液装入离心管中并进行离心。现在使用超声将沉淀重新悬浮于25毫升己烷中，再加入25毫升乙醇，并重复离心步骤。再重复洗涤过程三次。最后，将初级杂化纳米颗粒沉淀物置于真空干燥器中干燥过夜。在颗粒完全干燥之前，请勿进行下一步操作。制备杂化磁等离子体纳米簇时，首先将干燥的初级纳米颗粒在1毫升己烷中重新悬浮。当无可见沉淀时，使用超声处理。接下来，将纳米颗粒悬浮液逐滴加入含有10毫升十二烷基硫酸钠的20毫升玻璃盖瓶中，尽量保持溶液呈两相状态，盖上瓶盖后用手摇晃。然后将两相溶液超声处理两小时。将小瓶置于水浴中心附近。两小时后，水浴将逐渐升温。将混合物置于80摄氏度水浴中加热10分钟，然后冷却至室温。现在以100 ×g离心悬浮液30分钟。保留上清液，并将沉淀重悬于0.1毫摩尔的柠檬酸钠中，使用超声处理10分钟。这些纳米簇的直径应约为180纳米。接下来，将保存的上清液在400 ×g 条件下离心30分钟。再次收集上清液，并将沉淀重悬于0.1毫摩尔的柠檬酸钠溶液中，使用超声处理10分钟。此重悬液中的纳米簇直径约为130纳米。接着将之前保存的上清液在1500 ×g条件下离心30分钟，然后按前述方法将沉淀重悬，所得纳米簇直径约为90纳米。用于分析时，将每种悬浮液各300微升转移至96孔板中的独立孔内，并读取其

synthesis-of-immunotargeted-magneto-plasmonic-nanoclusters

Research

科研

JoVE Journal

Chemistry

化学

Immunotargeted的合成磁等离子团簇

等离激元镊子和光子晶体纳米结构可有效提高光学捕获微纳米粒子的效率并实现取向控制。...

利用等离激元与光子晶体纳米结构增强微米和纳米粒子操控

靶向细胞递送在多种生物医学应用中具有重要意义。本实验方案旨在利用超顺磁性氧化铁纳米颗粒（SPION）标记细胞，从而实现磁性细胞靶向，以高度可控的方式进行细胞递送与定位。...

使用超顺磁性氧化铁纳米颗粒进行细胞标记与靶向

通过首先沉积硫化银壳层，并将银阳离子置换为锌或镉阳离子，实现对均匀金纳米颗粒进行硫化镉（CdS）或硫化锌（ZnS）半导体壳层的包覆合成。...

杂化金/硫化镉和金/硫化锌核/壳纳米粒子的合成、表征与功能化

我们描述了通过湿化学法制备多功能Fe2O3-Au纳米颗粒及其性质，并利用激光照射研究其光热性能。该复合型Fe2O3-Au纳米颗粒保留了两种材料的特性，形成具有优异磁性和等离子体特性的多功能结构。...

多功能杂化 Fe2O3-Au 纳米颗粒用于高效等离激元加热

本文介绍了一种用于胶体合成银纳米立方体及制备具有亚10...

用于等离激元学与纳米光子学应用的纳米贴片天线胶体合成

我们描述了一种在纳米等离激元光晶格中光学捕获微粒的方法。...

纳米等离激元光晶格中微粒的捕获

我们演示了利用胶体光刻技术制备周期性金纳米杯阵列的方法，并讨论了纳米等离激元薄膜的重要性。...

利用胶体光刻技术制备周期性金纳米杯阵列

由于抗原特异性T细胞频率极低，因此难以对其进行表征或用于治疗。本文中，我们提供了一种磁性微粒的制备方案，该微粒可结合抗原特异性T细胞，用于富集这些细胞，并将其扩增数百倍，从而用于后续的表征与治疗应用。...

利用磁性纳米颗粒富集并扩增稀有抗原特异性T细胞

本文描述了一种可靠且易于重复的方法，用于制备可功能化、近红外发射的光致发光金纳米簇，并通过流式细胞术和共聚焦激光扫描显微镜直接检测其在HeLa细胞内的存在。...

近红外发光金纳米簇的合成及其生物应用

本文介绍了一种通过自组装制备氧化铁纳米颗粒包壳微泡（NSMs）的方案，该方案将磁性、声学和光学响应性协同整合于一个纳米治疗平台中，用于磁热疗与光热联合癌症治疗。...

磁性、声学与光学三重响应型微泡用于磁热与光热联合癌症治疗

在本研究中，我们提供了一种利用抗体对磁性纳米材料进行生物功能化的方案，以实现对特定细胞的靶向。作为示例，我们使用铁纳米线来靶向癌细胞。...

磁性纳米材料的生物功能化

学习合成免疫靶向磁等离子纳米团簇的方法，通过制备氧化铁核心、沉积金壳层及油水微乳液组装技术，实现强磁性及近红外吸收特性。该方法可用于靶向药物递送和分子成像等生物医学应用。

免疫靶向磁-等离子体纳米簇的合成

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