2014年12月18日
破坏再巩固过程是减轻焦虑症或创伤后应激障碍患者恐惧记忆行为表达的一种有前景的方法。在一系列人类恐惧条件化研究中,我们发现通过去甲肾上腺素能β受体阻滞剂普萘洛尔破坏再巩固过程,可非常有效地消除条件性恐惧反应。
以下实验的总体目标是通过靶向记忆再巩固过程,永久性地削弱恐惧反应。该方法首先通过差异性巴甫洛夫式条件反射在人体内人为建立恐惧;第二步是提取恐惧记忆,从而触发该记忆的去稳定化过程。
随后给予40毫克普萘洛尔,以干扰记忆再巩固过程。结果显示,基于惊吓反应的恐惧表现出永久性降低。与现有的恐惧消退等方法相比,该技术的主要优势在于能够实现恐惧的永久性减轻。
以下研究应在与实验者所在房间分离的隔音室内进行。在提供指导并获得知情同意后,按照标准方案测量血压和心率。开始时,将双面粘性电极套环连接到肌电图(EMG)电极上。
使用酒精棉片清洁受试者一只眼睛下方及前额处的皮肤,并指导受试者保持闭眼状态,以避免可能的刺激。接下来,用注射器将导电性极强的电解质凝胶填充至肌电图(EMG)电极的中央位置,注意避免在凝胶中引入气泡,以免对记录结果产生不利影响。将其中一个电极贴附于下眼睑下方,位置与向前平视时瞳孔的垂直线对齐。
沿下眼睑的弧度,在第一个电极外侧约1.5厘米处粘贴第二个电极。接着,将接地参考电极贴于前额。在刺激电极上涂抹一滴导电凝胶,然后使用尼龙搭扣带将其固定在左手腕上方。
确保绑带不要太紧。告知受试者,电击应引起不适感,但不应感到疼痛。为每位受试者 individually 调整两次 MS.Electric shock 的强度。
准备就绪后,手动触发电刺激。起始强度为1毫安。持续触发单次电刺激,同时以每次2至3毫安的幅度逐步增加刺激强度。
当受试者报告电击感到不适但不疼痛时停止。记录最终的电击强度,并保持该强度不变。在实验剩余过程中,向受试者说明图片内容。
指导他们监测所看到的图片与电击传递之间的关系。要求受试者在测试期间报告对电击的预期程度。通过移动连续评分量表上的光标,指导受试者保持注视屏幕,并尽可能保持静止不动。
在测试期间为受试者佩戴耳机,调暗灯光并关闭房门。离开房间后,从相邻的房间启动实验。通过呈现10次基线惊跳刺激,以降低恐惧习得初期的惊跳反应性,从而开始恐惧习得阶段。
在75%强化方案中,两张图片中的一张将在电击结束时同时终止,而另一张图片则永远不会单独伴随电击噪音出现。测试期间应在试次间隔中引入试验。测试结束后,取下电极并用水彻底清洗。
完全取下凝胶,注意不要刮伤氯化银层。清洁后,不要擦干水分,而是为下一位受试者使用另一套电极。在测试的第二天,采集血压和心率测量数据以及唾液样本。
将受试者置于计算机屏幕前,并按照之前所示连接肌电图(EMG)和电刺激电极。告知受试者电刺激强度将保持不变,并告知其计算机屏幕上将呈现相同的两张图片,要求他们回忆前一天所学内容。
再次指导参与者报告其对电击的预期。在调暗灯光并离开房间后,通过呈现10次基线惊吓探针以降低初始惊吓反应性,开始记忆再激活。随后,呈现一次无强化的条件刺激(CS)单次试验,紧接着进行一次单独噪音试验。
将受试者从实验装置上断开,并让其清理掉导电凝胶。随后,在双盲条件下引导受试者到另一张桌子,给予口服安慰剂或40毫克盐酸普萘洛尔。给药后,开始约90分钟的静息期。
在等待期间为受试者提供杂志阅读。再次测量血压和心率,并采集唾液样本。在采集血压和心率数据后90分钟,将受试者安置在电脑屏幕前,并连接肌电图(EMG)和电刺激电极。
告知参与者电击强度将保持不变。指导参与者,计算机屏幕将再次呈现相同的两张图片。同样,要求参与者在所有图片呈现期间报告对电击的预期程度。
当受试者准备就绪后,关闭房门,调暗灯光,并在另一房间启动实验。在消退阶段,首先呈现10次基线惊吓刺激作为探针。随后,分别呈现约12次未强化的条件刺激一(CS one)和条件刺激二(CS two)试验,以及12次中性刺激(NA)试验。
消退后,进行三次无强化的非条件刺激呈现,以开展复燃测试。随后,向受试者呈现约四次未强化的条件刺激一(CS one)和条件刺激二(CS two)试验,以及四次中性刺激(NA)试验。测试完成后,取下电极,给予受试者相应报酬,并用水彻底清洗电极。非条件刺激预期结果的代表性数据。
此处显示评分结果。普萘洛尔治疗对预期评分无显著影响。此处显示安慰剂组的惊吓恐惧反应结果。
在第三天的测试中,惊吓反应仍然保持完整。与安慰剂相反,在记忆提取后给予普萘洛尔可消除第三天测试开始时的惊吓恐惧反应。若未进行记忆提取,单独给予普萘洛尔则不产生任何减轻恐惧的作用。
观看本视频后,您应能充分理解如何在人类中人为地建立并随后消除恐惧。
本研究探讨了使用普萘洛尔(一种肾上腺素能β受体阻滞剂)干扰恐惧记忆再巩固的过程。研究结果表明,该方法可有效降低人类的条件性恐惧反应。
破坏恐惧记忆的再巩固过程为干预焦虑症治疗靶点提供了一种基于机制的去风险策略,旨在解决适应不良性恐惧反应的持续存在。该方法在早期靶点验证中具有预测价值,能够验证药物干预是否可对条件性恐惧产生持久改变,而条件性恐惧是精神疾病领域关键的可转化生物标志物。该技术有助于项目组合的筛选,通过识别能够调节记忆过程而不仅仅是抑制症状的化合物,契合中枢神经系统药物研发中的机制性去风险策略。
该方法适用于从靶点验证到先导化合物发现的整个研究流程,其中记忆再巩固干扰作为一种功能性检测手段,用于优先筛选具有疾病修饰潜力的中枢神经系统活性化合物。