Name: 在小鼠试验的气味辨别和习惯化 (视频) | JoVE Journal
Uploaded: 2015-05-05T13:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 41 s
Description: 学习小鼠气味习惯化与辨别测试方法，用于评估嗅觉功能并区分非社会性与社会性气味反应。该方案为神经科学研究提供可靠的行为学控制手段。

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本工作由贝勒大学研究委员会资助项目以及癫痫基金会的研究资助支持。

以下实验所用的成年雄性小鼠在贝勒大学培育并饲养，环境温度为 22 °C，光照周期为 14 小时光照/10 小时黑暗&#160;hr 光照和 10&#160;hrs 黑暗（20:00 至 6:00）昼夜节律。小鼠被给予 随意摄取 可自由获取食物和水。所有对小鼠的操作均符合美国国立卫生研究院《实验动物护理和使用指南》的要求，并经贝勒大学动物护理与使用委员会批准动物实验方案。小鼠在上午晚些时候至下午早些时候进行测试。以下所有操作过程中，实验人员应佩戴手套，以消除气味并防止污染。
1. 非社会性气味的制备
<ol>
	<li>每天测试时均需配制新鲜的非社会性气味物质。 
	注意：实验人员在配制气味物质时应佩戴手套。
	<ol>
		<li>取3个离心管，每管加入10 ml水。</li>
		<li>用移液器将100 µl香蕉提取物加入一个15 ml&#160;锥形管中，并将100 µl&#160;杏仁提取物加入另一个15 ml&#160;锥形管中，以制备1:100的稀释液。&#160; 
		注意：第三个15 ml&#160;锥形管仅装入水。</li>
	</ol>
	</li>
</ol>
2. 社会性气味的制备
<ol>
	<li>在测试当天早晨准备新鲜的社会气味。从至少三天未清洁且含有相同数量小鼠的两个笼子中获取社会气味。获取与测试小鼠相同性别的小鼠所产生的社会气味。 
	注意：这些气味应室温保存，并在4-6小时内使用，以保持气味的强度和一致性。
	<ol>
		<li>确定需要制备的社会气味棉签数量&#160;：每只待测小鼠将接触来自社会气味1的三根棉签和来自社会气味2的三根棉签。</li>
		<li>通过将棉签在脏笼底部以之字形方式擦拭来制备社会气味。轻甩棉签尖端，去除附着的多余垫料。</li>
		<li>将棉签存放于带盖的大玻璃罐或用Parafilm封口的烧杯中。指定一个容器用于存放社会气味1，另一个容器用于存放社会气味2。</li>
	</ol>
	</li>
	<li>将气味来源的笼子置于实验测试室外。</li>
</ol>
3. 实验小鼠的适应性驯养
<ol>
	<li>戴上手套，称量待测小鼠，并将其单独放入一个顶部带有金属网盖的洁净笼子中，移除饮水瓶。</li>
	<li>将小鼠置于非测试用房的房间内，适应新笼子环境 45 分钟。确保房间内无异常气味或噪音。</li>
	<li>由于每次测试约需 45 分钟，可在即将测试当前小鼠前，立即将下一只待测小鼠放入洁净笼中开始适应，以此错开各小鼠的适应时间。</li>
</ol>
4. 检测室的准备
<ol>
	<li>在测试室内放置新的棉签、实验室胶带、装有社交气味棉签的瓶子、非社交气味样本管、移液器、两个计时器&#160;以及带盖的废液瓶。</li>
	<li>确保测试室无明显气味、无嘈杂噪音且光线不强烈。测试人员不得使用有香味的香水或乳液。 
	注意：观察者在测试期间不得咀嚼口香糖或糖果，并应尽量避免接触气味强烈的食品。</li>
</ol>
5. 测试步骤
<ol>
	<li>将已适应环境的小鼠连同其笼子一起带入测试室，并将笼子放置在实验台上，高度应便于坐着时观察。</li>
	<li>每种气味连续呈现3次，每次2分钟。使用表1中列出的呈现顺序。
	<ol>
		<li>用移液器吸取50 µl&#160;待测气味物质，滴加到棉签头部，并立即盖上气味源容器的盖子。提起笼子的金属网盖，将未沾气味的木柄端棉签从饮水瓶开口插入，从金属网底部向上推入，直至棉签穿过。注意避免棉签头部接触任何物体（包括手指），以防气味污染。</li>
		<li>继续将棉签穿过饮水瓶开口，直到约1英寸长的棉头部分垂入笼内。用实验室胶带将棉签的木柄固定在笼壁上。 
		注意：操作时需小心，防止笼盖重新落下产生噪音，惊扰测试小鼠。</li>
		<li>立即开始计时2分钟。使用一个计时器记录每次2分钟的气味呈现时间。记录在2分钟测试期间小鼠累计嗅闻气味的时间。使用另一个秒表单独记录动物的嗅闻行为。当动物鼻部朝向棉签头部，且距离棉头约2 cm或更近时，定义为活跃嗅闻。</li>
		<li>每次试验结束后，提起金属网盖，从网盖下方将棉签向下拉出（此操作可避免棉头接触金属网，防止气味残留污染）。将使用过的棉签密封于500 ml&#160;的废液瓶中。</li>
		<li>准备并插入下一根棉签，随即开始计时。每次试验间间隔约1分钟。重复上述步骤，直至每种气味均连续呈现3次，每次持续2 min&#160;。</li>
	</ol>
	</li>
	<li>小鼠完成全部试验后，将装有废弃棉签的废液瓶清空至测试室外的垃圾桶中。将小鼠放回其原饲养笼中。</li>
</ol>
6. 分析
<ol>
	<li>使用双因素方差分析（two-way ANOVA）对每种气味条件下各组的数据进行分析，随后采用Newman-Keuls法或类似的事后检验，以确定是否存在显著的习惯化（对连续出现的相同气味嗅闻时间减少）和去习惯化（对新气味嗅闻时间增加）。</li>
</ol>

<ol><li>Doty, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Odor-guided+behavior+in+mammals%5BTitle%5D)+AND+%22Experientia%22%5BJournal%5D)">Odor-guided behavior in mammals.</a> Experientia. 42, 257-271 (1986).</li>
<li>Restrepo, D., Arellano, J., Oliva, A. M., Schaefer, M. L., Lin, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Emerging+views+on+the+distinct+but+related+roles+of+the+main+and+accessory+olfactory+systems+in+responsiveness+to+chemosensory+signals+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Horm+Behav%22%5BJournal%5D)">Emerging views on the distinct but related roles of the main and accessory olfactory systems in responsiveness to chemosensory signals in mice.</a> Horm Behav. 46, 247-256 (2004).</li>
<li>Keverne, E. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Importance+of+olfactory+and+vomeronasal+systems+for+male+sexual+function%5BTitle%5D)+AND+%22Physiol+Behav%22%5BJournal%5D)">Importance of olfactory and vomeronasal systems for male sexual function.</a> Physiol Behav. 83, 177-187 (2004).</li>
<li>Gregg, B., Thiessen, D. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+simple+method+of+olfactory+discrimination+of+urines+for+the+Mongolian+gerbil%2C+Meriones+unguiculatus%5BTitle%5D)+AND+%22Physiol+Behav%22%5BJournal%5D)">A simple method of olfactory discrimination of urines for the Mongolian gerbil, Meriones unguiculatus.</a> Physiol Behav. 26, 1133-1136 (1981).</li>
<li>Yang, M., Crawley, J. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Simple+behavioral+assessment+of+mouse+olfaction%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Protoc+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Simple behavioral assessment of mouse olfaction.</a> Curr Protoc Neurosci. Chapter 8 (Unit 8 24), (2009).</li>
<li>Pan, Y. W., Kuo, C. T., Storm, D. R., Xia, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Inducible+and+targeted+deletion+of+the+ERK5+MAP+kinase+in+adult+neurogenic+regions+impairs+adult+neurogenesis+in+the+olfactory+bulb+and+several+forms+of+olfactory+behavior%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+ONE%22%5BJournal%5D)">Inducible and targeted deletion of the ERK5 MAP kinase in adult neurogenic regions impairs adult neurogenesis in the olfactory bulb and several forms of olfactory behavior.</a> PLoS ONE. 7, e49622(2012).</li>
<li>Wesson, D. W., Levy, E., Nixon, R. A., Wilson, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Olfactory+dysfunction+correlates+with+amyloid-beta+burden+in+an+Alzheimer%27s+disease+mouse+model%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Olfactory dysfunction correlates with amyloid-beta burden in an Alzheimer's disease mouse model.</a> J Neurosci. 30, 505-514 (2010).</li>
<li>Fadool, D. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Kv1.3+channel+gene-targeted+deletion+produces+%27Super-Smeller+Mice%27+with+altered+glomeruli%2C+interacting+scaffolding+proteins%2C+and+biophysics%5BTitle%5D)+AND+%22Neuron%22%5BJournal%5D)">Kv1.3 channel gene-targeted deletion produces 'Super-Smeller Mice' with altered glomeruli, interacting scaffolding proteins, and biophysics.</a> Neuron. 41, 389-404 (2004).</li>
<li>Arakawa, H., Arakawa, K., Blanchard, D. C., Blanchard, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Scent+marking+behavior+in+male+C57BL%2F6J+mice%3A+sexual+and+developmental+determination%5BTitle%5D)+AND+%22Behav+Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Scent marking behavior in male C57BL/6J mice: sexual and developmental determination.</a> Behav Brain Res. 182, 73-79 (2007).</li>
<li>Baum, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sexual+differentiation+of+pheromone+processing%3A+links+to+male-typical+mating+behavior+and+partner+preference%5BTitle%5D)+AND+%22Horm+Behav%22%5BJournal%5D)">Sexual differentiation of pheromone processing: links to male-typical mating behavior and partner preference.</a> Horm Behav. 55, 579-588 (2009).</li>
<li>Ferguson, J. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Social+amnesia+in+mice+lacking+the+oxytocin+gene%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Genet%22%5BJournal%5D)">Social amnesia in mice lacking the oxytocin gene.</a> Nat Genet. 25, 284-288 (2000).</li>
<li>Yang, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Low+sociability+in+BTBR+T%2Btf%2FJ+mice+is+independent+of+partner+strain%5BTitle%5D)+AND+%22Physiol+Behav%22%5BJournal%5D)">Low sociability in BTBR T+tf/J mice is independent of partner strain.</a> Physiol Behav. 107, 649-662 (2012).</li>
<li>Best, J. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Non-associative+learning+in+larval+zebrafish%5BTitle%5D)+AND+%22Neuropsychopharmacology%22%5BJournal%5D)">Non-associative learning in larval zebrafish.</a> Neuropsychopharmacology. 33, 1206-1215 (2008).</li>
<li>Wolman, M. A., Jain, R. A., Liss, L., Granato, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chemical+modulation+of+memory+formation+in+larval+zebrafish%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Chemical modulation of memory formation in larval zebrafish.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. , (2011).</li>
<li>Sorge, R. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Olfactory+exposure+to+males%2C+including+men%2C+causes+stress+and+related+analgesia+in+rodents%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Methods%22%5BJournal%5D)">Olfactory exposure to males, including men, causes stress and related analgesia in rodents.</a> Nat Methods. 11, 629-632 (2014).</li>
</ol>

作者无任何利益冲突需要披露。

本文提供的结果适用于小鼠。小鼠对新气味表现出强烈反应，随后迅速产生习惯化。该方法中的一个关键步骤是气味的制备。研究者需格外注意将不同气味彼此隔离，以防止交叉污染。另一个关键环节是棉签的呈现方式。研究者需要调试棉签头部的最佳位置，使小鼠能够探查棉签尖端，但不会将其撕咬损坏。测试中的一个重要组成部分是气味的选择。我们使用了三种非社会性气味，但增加其他气味也不困难。需要注意的是，所选气味之间应具有明显差异。若连续呈现相似气味，可能会出现“下限效应”。此外，当小鼠连续接触过多新气味时，其反应可能逐渐减弱。如果研究者希望增加更多气味刺激，则可能需要增加测试天数。每只小鼠的测试时间约为一小时。此外，在将特定气味作为实验条件纳入正式实验前，应先在对照小鼠中对所选气味进行调试和验证。
嗅觉习惯化/去习惯化是研究社会行为时需要包含的一项重要测试。三箱社会行为测试通常用于检测小鼠的社会行为缺陷。该测试包含一个实验动物探索新物体和新小鼠的条件，新物体和新小鼠分别放置在腔室两端的杯子下方。该测试还可以包含另一个条件，即在一个杯子下放置一只新小鼠，在另一个杯子下放置另一只小鼠（熟悉小鼠）。研究人员随后检查实...

小鼠依赖嗅觉来探索新环境、寻找食物、识别其他个体以及进行性行为1-3。在开展涉及食物、社会互动或任何旨在诱发小鼠反应的气味相关行为学实验之前，研究人员必须首先确认实验动物是否具备正常的功能性嗅觉。嗅觉缺失或无法区分不同气味的情况可能导致多种行为学范式中出现假阳性或假阴性结果，因此应在进行其他类型行为学测试之前，先确认小鼠检测和区分气味的能力。
嗅觉习惯化/去习惯化测试最早于20世纪80年代被描述4。该测试已被穆阳（Mu Yang）博士和杰奎琳·克劳利（Jacqueline Crawley）博士改进并适用于小鼠5。这是一种简单且成本低廉的测试，可使研究者确认小鼠是否能够感知并区分不同气味。除了检测嗅觉功能外，该测试还允许研究者观察小鼠的一般行为，因此应在实验流程的早期进行。关于小鼠运动能力、焦虑迹象、活动水平以及对社交气味与食物气味反应的定性观察，可能提示可进一步开展测试的新方向。
在此项测试中，将浸有不同气味的棉签连续三次呈现给小鼠。每次重复呈现同一气味时，小鼠会对棉签产生习惯化，表现为每次接触后探索时间逐渐减少。当呈现一种新气味时，会发生去习惯化，正常小鼠会花更多时间探索该棉签，表明其能够区分当前气味与先前气味5。该测试每次仅对一只小鼠进行，包括45分钟的适应期，随后进行45分钟的测试。
尽管该实验操作简便，但可用于探究小鼠嗅觉系统的复杂问题。其他常用的嗅觉检测方法，例如埋藏食物实验，仅能确定嗅觉缺失的存在与否。然而，嗅觉辨别与习惯化实验可使研究者确定小鼠不仅具备嗅觉感知能力，还能区分不同气味。习惯化与去习惯化的反应模式已被用于证实新的突变小鼠能够区分不同气味6,7。在一项令人意外的研究中，Fadool 及其同事使用复杂的气味混合物发现，Kv1.3 通道基因靶向敲除的小鼠是“超级嗅觉者”，其区分极为相似气味的能力优于正常小鼠8。
在研究一种新的基因敲除小鼠模型时，确定其在基本感觉任务中是否存在正常行为是十分有用的。在测试流程的早期进行气味辨别与习惯化测试，可使研究人员有机会观察到任何异常行为。这些观察结果有助于防止后续测试中因突变体的混杂特征而导致假阳性或假阴性结果。随着研究人员对社会行为研究的不断深入，验证基本嗅觉功能的需求变得愈发重要。除了在突变品系中检测嗅觉功能外，该测试还可用于回答特定科学问题，例如：某种药理学处理是否特异性地增强动物对社交气味刺激的反应，还是其对所有气味刺激的反应均有所增强。

<table><tbody><tr><td>小鼠笼具</td><td>Allentown</td><td>标准小鼠笼</td><td></td></tr><tr><td>金属网盖</td><td>Allentown</td><td>BCU Mouse WBL 2500</td><td></td></tr><tr><td>垫料</td><td>Harlan</td><td>7090 Sani-Chips</td><td></td></tr><tr><td>棉签</td><td>VWR</td><td>89031-270</td><td>6&amp;rdquo; 木质手柄</td></tr><tr><td>香蕉香精</td><td>McCormick</td><td></td><td></td></tr><tr><td>杏仁香精</td><td>McCormick</td><td></td><td></td></tr><tr><td>实验室封口膜</td><td>VWR</td><td>89098-062</td><td></td></tr><tr><td>秒表</td><td>VWR</td><td>62374-000</td><td></td></tr><tr><td>腈类手套</td><td>VWR</td><td>82026</td><td></td></tr><tr><td>计时装置</td><td>VWR</td><td>61161-350</td><td></td></tr><tr><td>15 ml 圆锥形离心管</td><td>VWR</td><td>89003-294</td><td></td></tr><tr><td>2 L 烧杯&amp;nbsp;</td><td>Pyrex</td><td>1003</td><td></td></tr><tr><td>Parafilm 封口膜</td><td>Parafilm</td><td>PM-992</td><td>4&amp;rdquo; x 250&amp;rsquo;</td></tr><tr><td>带盖 1 L 瓶</td><td>VWR</td><td>89000-240</td><td></td></tr></tbody></table>

小鼠气味辨别与习惯化测试

 Testing for Odor Discrimination and Habituation in Mice

本视频演示了一种用于确定小鼠嗅觉系统是否正常运作的技术。该测试有助于判断小鼠是否能够区分非社会性气味与社会性气味，是否会对重复呈现的气味产生习惯化，以及在接触新气味时是否表现出去习惯化。由于许多社会行为测试是通过测量实验动物对熟悉或陌生小鼠的反应来进行的，因此确认动物能够感知并区分社会性气味，有助于避免假阳性结果。在使用气味构建新环境或将嗅觉线索作为关联刺激的恐惧条件化等学习测试中，也存在类似的考量。嗅觉系统的功能缺陷会影响动物区分不同环境背景的能力，并损害其在恐惧条件化过程中与嗅觉线索形成关联的能力。
在气味习惯化/去习惯化测试中，反复向小鼠呈现多种气味。每种气味呈现三次，每次持续两分钟。研究者记录小鼠朝向气味的嗅探时间，以此作为嗅觉反应性的测量指标。典型的小鼠在多次呈现同一气味后，对该气味的反应会逐渐减弱（习惯化）。随后实验者呈现一种新的气味，小鼠会表现出对新气味嗅探时间的增加（去习惯化）。当新气味被反复呈现后，动物再次表现出习惯化。本实验方案包括水、两种或多种非社会性气味以及两种社会性气味的呈现。除了减少实验干扰因素外，该测试还可用于评估新构建的基因敲除、基因敲入和条件性基因敲除小鼠品系嗅觉系统的功能。

按照所述方案，实验结果基于十只成年（出生后第90-120天）雄性C57BL/6J小鼠和八只雄性FVB混合背景品系（出生后第50-70天）小鼠获得。测试由一名研究者在多个日期内完成。图中每个数据点代表小鼠探索某种气味的平均时间。
当首次引入浸过水的棉签时，小鼠会花费大量时间探究这一新奇物体（图1：前三个数据点）。随着后续每次呈现，小鼠探究棉签的时间逐渐减少，表明已产生习惯化。当引入一种新气味时，小鼠探究棉签的时间出现上升，说明小鼠能够区分新气味与先前的气味（图1：杏仁气味数据点）。同样，随着该气味的多次重复呈现，探究时间再次逐渐减少。在三次试验中，小鼠对水棉签的嗅探时间表现出显著下降 F(2,18) = 3.8，p &lt;0.05。当反复呈现杏仁气味时，小鼠也表现出类似的趋势 F(2,18) = 3.6，p &lt;0.05。到第三次呈现气味时，小鼠仍表现出习惯化，但此时动物的行为已接近下限效应（图1：香蕉气味数据点）。下限效应是指行为反应已低至无法可靠检测进一步下降的程度。当呈现...

本文描述了一种用于检测啮齿类动物嗅觉系统的方法。通过嗅觉习惯化/去习惯化实验，研究人员可以判断小鼠是否对重复呈现的气味产生习惯化，以及在呈现新气味时是否表现出去习惯化反应。

本视频展示了一种用于验证小鼠嗅觉系统正常功能的技术。该检测有助于确定……

本实验的总体目标是提供一种方法，用于研究小鼠检测、习惯化以及对新异气味和社会性气味产生去习惯化的能力。首先准备一系列非社会性新异气味（如果味和坚果味提取物）以及社会性气味（如鼠笼垫料）。第二步是向小鼠呈现这些气味，先呈现三种新异气味，随后呈现两种不同的社会性气味。在每次试验中，评估并记录小鼠的嗅探行为。最终，通过气味识别、辨别和适应性测试来评估动物的嗅觉功能，以证明动物能够对新气味产生反应，能够对气味产生适应，随后在呈现另一种新气味或社交气味时表现出去适应的能力。该方法可用于回答神经科学领域中的关键问题，例如动物对新动物或新刺激无反应，是否是因为其无法察觉该气味所致。开始准备非社会性气味，戴上手套后，取三个15毫升的锥形管，每管加入10毫升水。用移液器向第一管中加入100微升杏仁提取物，向第二管中加入100微升香蕉提取物，第三管仅保留纯水，作为对照。接着，获取两个至少三天未清洁的小鼠笼，每个笼内小鼠数量相等，且性别与测试小鼠相同。使用棉签以之字形方式擦拭脏鼠笼的底部。将棉签上附着的垫料抖落，然后将棉签有绒毛的一端朝下放入一个带有紧密盖子的大玻璃罐中。为每只需要检测的小鼠，从两个鼠笼中各重复此操作三次，共获得三根棉签。将罐子置于室温下保存，并在4至6小时内使用棉签。为保持气味稳定且一致，实验当天应将气味样本笼子移至测试区域外的房间。请勿使用有香味的香水或乳液，避免食用气味强烈的食物。在测试开始前，将准备好的社交性与非社交性气味物质、实验室用胶带、新的棉签、带盖废液瓶以及两个计时器放入测试房间。戴上洁净手套，称量第一只小鼠的体重，然后将其转移至一个带有金属网盖且无水瓶的洁净笼子中。将笼子放置在无异常气味或噪音的区域，让小鼠在新笼子中适应45分钟。适应期结束后，将装有小鼠的笼子移至测试区域，并开始对另一只小鼠进行适应。将已适应的小鼠连同其笼子放置在操作台上，高度应便于坐着时观察。接着，按照文本方案中所述顺序，准备一种非社会性气味：将100微升气味液体滴加到一根新棉签的尖端，供立即使用。对于社会性气味，则从相应的容器中取出一支预先制备好的棉签直接使用。抬起笼子的金属网盖，从网盖下方将无味棉签的末端插入水瓶口内。避免棉签头部接触任何物体，包括手指，以防气味污染。当约一英寸长的带气味棉签仍留在笼内时，用实验室胶带将棉签的木质末端固定在笼子底部的网盖下方。然后轻轻将笼盖放回笼子上。为避免干扰测试小鼠，立即开始计时两分钟。使用第一个计时器，同时用第二个秒表记录测试小鼠嗅闻气味的累计时间。主动嗅探定义为小鼠在距离棉签两厘米范围内时，将其鼻部朝向棉签。试验结束后，抬起金属网盖，小心地将棉签从网盖底部向下拉出并移除。为避免棉签携带气味的一端接触网盖，应将使用过的棉签立即密封于废弃瓶中，同时让小鼠休息一分钟，并准备下一个供体棉签。每种气味连续呈现三次，每次持续两分钟。所有试验完成后，将测试室外垃圾桶中装有已使用棉签的废液瓶清空，并将小鼠放回其饲养笼中。每种气味物质首先呈现给具有 C57BL/6J 背景的小鼠，每种气味依次连续呈现。小鼠用于探究提示有居住迹象的气味的时间更短。无论是社交气味还是非社交气味，均可观察到相似的居住与辨别模式。然而，小鼠用于探究社交气味的时间更长。当向雄性FVB混合背景品系小鼠呈现相同的非社会性气味时，也观察到类似的适应模式。每次引入新的气味，都会引起主动嗅闻行为的增加，而随着同一种气味的反复呈现，该行为逐渐减少。然而，FVB小鼠在面对社会性气味时表现出不同的模式：在重复暴露过程中，其嗅闻时间未出现显著减少。数据表明，小鼠对重复呈现的两种社交气味不会产生习惯化。观看本视频后，您应能充分理解如何测试小鼠检测新气味或社交气味的能力，使其对该气味产生习惯化，并在呈现新气味时出现去习惯化现象。

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科研

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Behavior

行为

在小鼠试验的气味辨别和习惯化

啮齿类动物嗅觉系统具有基本而独特的特性，这使其在生物学研究中受到日益广泛的关注。因此，也需要一种相对简单的功能评估方法。本文描述了用于表征小鼠嗅觉敏感性和偏好的高灵敏度检测方法。...

成年小鼠的嗅觉行为测试

嗅觉功能障碍是多种神经退行性疾病（包括帕金森病、阿尔茨海默病和亨廷顿病）的常见特征。本文介绍了一组用于评估小鼠嗅觉辨别和嗅觉检测能力的测试方法，可用于测量神经退行性疾病小鼠模型中的嗅觉功能。...

神经退行性疾病小鼠模型的嗅觉检测方法

我们介绍一种在小鼠中进行的简单且无偏倚的嗅觉测试。通过该方案，可在单次行为学实验中评估小鼠对新气味与水相比的嗅觉辨别能力、偏好性、回避行为及敏感性。该方法适用于单名实验者操作，数据分析基于计算机辅助的视频处理。...

小鼠简易及计算机辅助嗅觉检测

注意性设转移认知异常是多种精神疾病的核心特征。本文介绍了一种新型自动化系统，可用于高效研究小鼠的注意性设转移能力、执行功能及其他认知能力，该系统与人类研究具有高度的可转化性。...

小鼠的自主性维度内/维度间转换任务

在此，我们通过关联学习任务训练小鼠以测试其气味辨别能力。该方案还可用于研究学习诱导的大脑结构变化。...

小鼠嗅觉学习与辨别能力的客观可重复检测方法

本文详细描述了一种新型的小鼠判断偏倚实验方案。同时展示了该嗅觉挖掘任务对情绪状态敏感性的证据，并讨论了其在不同研究领域的应用价值。...

通过嗅觉挖掘任务评估小鼠的判断偏差

本文详细描述了埋藏食物测试和社会气味辨别实验，以评估吸入性环境污染物暴露对小鼠嗅觉功能的影响。...

研究吸入性环境污染物对小鼠嗅觉功能的影响

本方案描述了用于“选择/不选择”嗅觉行为实验的嗅觉仪的构建方法。提供了分步操作说明及相应图片，以确保嗅觉仪的成功搭建。同时包含了在构建过程中可能遇到问题的故障排除信息。...

构建用于啮齿类动物嗅觉行为研究的嗅觉仪

本文介绍了一种嗅觉偏好测试方案，可用于评估抑郁小鼠模型对具有吸引力和厌恶性气味刺激的负面嗅觉偏向。...

一种用于测量抑郁小鼠模型中嗅觉享乐偏好的嗅觉偏好测试

本文介绍了一种利用视频分析系统评估小鼠恐惧学习与记忆的场景性和提示性恐惧条件反射实验方案。...

使用视频分析系统对小鼠进行情境与线索性恐惧条件反射测试

学习小鼠气味习惯化与辨别测试方法，用于评估嗅觉功能并区分非社会性与社会性气味反应。该方案为神经科学研究提供可靠的行为学控制手段。

小鼠气味辨别与习惯化测试

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